Klinická, histologická a biochemická charakterizace hyperpigmentované léze

Cíle -

1. Charakterizujte a klasifikujte lentiginy a mealy z klinického a fyziologického hlediska. To nám pomůže lépe porozumět buněčným procesům vedoucím k rozvoji lentigin (také označovaných jako senilní nebo solární lentigo).
2. Správná charakterizace a klasifikace lentiginů a melasmat by usnadnila vývoj modelů pro studium a nalezení řešení pro léčbu těchto lézí.

Hypotéza - Vývoj solárního lentiginu a melasmatu je způsoben mutacemi v keratinocytech, které řídí produkci a přenos pigmentu z melanocytů do keratinocytů.

Metodika -

Budou zařazeni pacienti ve věku 21 - 80 let, kteří se rozhodli podstoupit plastickou operaci. Některé informace o pacientovi (např. věk, pohlaví, rasa, rodinná anamnéza, životní styl související s expozicí slunci) budou shromažďovány.

Po operaci budou hyperpigmentované skvrny vyříznuty a uloženy v jednotlivých nádobách pro následné experimentální postupy.

Před operací bude oblast obsahující hyperpigmentované skvrny vyfotografována pomocí digitální kamery s vysokým rozlišením a posouzena pomocí optických sond (spektrofotometr pro měření kožních chromoforů, mexametr pro měření indexů melaninu a erytému a difuzní reflektanční spektrometr pro měření hemoglobinu, deoxyhemoglobinu a melanin).

Po operaci budou vyříznuté vzorky kůže zpracovány pro histologické hodnocení, jiné pro analýzu genové nebo proteinové exprese a další skupina bude použita k izolaci keratinocytů a melanocytů k dalšímu studiu jejich chování a reakce na podněty v primárních kulturách.

Klinické hodnocení hyperpigmentovaných lézí:

Morfologické vyšetření lentigo (před operací)

1. Makuly se liší barvou od žluté, světle hnědé až po černou, v závislosti na typu pokožky
2. Velikost se pohybuje od 1 mm do více než 1 cm
3. Objevte se na místech vystavených slunci (obličej, krk atd.)

Morfologické vyšetření (před operací)

1. Nepravidelné světle až tmavě hnědé až šedohnědé makuly nebo skvrny na místech vystavených slunci
2. Při vyšetření Woodovou lampou lze melasma rozdělit na 3 typy, epidermální, dermální nebo smíšené, podle intenzity pigmentů, přičemž epidermální melasma má tmavší barvu než melasma derma. Smíšené melasma má směs tmavých i světlých pigmentací
3. Melanocyty v melasmové lézi mají zvýšený počet mitochondrií, Golgiho aparátu, drsných ER a ribozomů

Spektrofotometr bude použit k měření optických vlastností skvrn a kontrolních oblastí (bez skvrny)

Zpracování vzorku

1. Extrakce RNA
2. Histologie
3. Izolace keratinocytů a melanocytů.