Studie zkoumající vliv suplementace vitaminu D3 na stav železa u žen s nedostatkem železa

Strategie náboru a odběru vzorků:

Účastníci budou přijímáni pouze v rámci University of Chester ve Spojeném království. E-maily a plakáty/letáky budou využívány jako médium reklamy pro cílovou skupinu (zaměstnance a studenty). Do studie bude zahrnuto celkem 62 premenopauzálních žen ve věku 19 až 40 let na základě kritérií popsaných níže. Způsobilost bude založena na sérovém feritinu a také na koncentraci vitaminu D při screeningu před začátkem studie. Účastníci budou muset vyplnit screeningový dotazník, který poskytne informace o zdravotním stavu účastníka, užívání léků/léků/doplňků a nedávném výskytu onemocnění/traumatu/zranění. Bude odebráno 6 ml žilní krve k posouzení koncentrací plazmatického feritinu vitaminu D, hemoglobinu a plného krevního obrazu. Do studie budou zahrnuti účastníci s plazmatickou koncentrací feritinu pod 20,0 µg/l a koncentrací vitaminu D pod 250 nmol/l. Pokud se zjistí, že hladiny hemoglobinu jsou v těžkém stadiu anémie, potenciální účastník bude informován a bude mu doporučeno, aby se obrátil na svého praktického lékaře (hladiny hemoglobinu < 8,0 g/dl). Všichni způsobilí účastníci budou informováni o protokolu studie před zahájením studie a způsobilí účastníci obdrží informační list pro účastníka (PIS) a požádáni o poskytnutí písemného informovaného souhlasu.

8týdenní, dvojitě zaslepená, randomizovaná kontrolovaná studie bude provedena v Chesteru, Spojené království (UK). 8týdenní intervenční období bylo zvoleno, protože více než 1 měsíc je vhodný pro celkové zvětšení erytropoetické dřeně a pozorování změn v indexech červených krvinek, zejména u neanemických skupin. Většina studií vitaminu D používala doplňkovou koncentraci 1000 IU a nezaznamenala žádné nežádoucí účinky na účastníky. Některé studie používaly vyšší dávky 1600 nebo 4000 IU bez hlášených nepříznivých výsledků u účastníků.

Účastníci budou náhodně rozděleni do 2 skupin:

1. Skupina Fe (snídaňové cereálie obohacené železem a placebo)
2. Skupina vitaminu D (snídaňové cereálie obohacené železem a vitamin D3).

Každý účastník bude konzumovat 60 gramů železem obohacených snídaňových cereálií obsahujících celkem 9 mg železa denně po dobu 8 týdnů buď s vitaminem D3 jako placebo, nebo s vitaminem D3 (1500 IU) podle přidělené skupiny. Snídaňové cereálie obohacené železem budou účastníci konzumovat ráno s 200 ml polotučného mléka denně po dobu 8 týdnů. Účastníci budou konzumovat vitamín D nebo placebo večer s 200 ml vody. Účastníci budou požádáni, aby během studia udržovali své stravovací návyky a fyzickou aktivitu. Účastníci budou také požádáni, aby v průběhu studie nedarovali krev. Zbývající doplňky budou vráceny na konečné klinice (8. týden) a bude odhadnuta shoda.

Účastníci budou muset navštěvovat celkem 3 kliniky po dobu 8 týdnů a budou hodnoceni na začátku (den 0), mezitím (4. týden) a po intervenci (8. týden). Účastníci budou požádáni, aby se přes noc postili přibližně 8 hodin před všemi klinikami. Na každé klinice se odebere 30 ml krve a změří se jak výška (cm), tak váha (kg). Před zahájením a koncem studie budou účastníci povinni vést si 3denní jídelní deník, který zahrnuje 2 pracovní dny a 1 víkendový den, které představují obvyklý příjem potravy účastníka. Vzorky krve budou dávkově analyzovány na konci intervence, aby se vyhodnotily všechny biomarkery stavu železa a metabolismu vitaminu D.

Velikost vzorku a odůvodnění:

Velikost vzorku byla odhadnuta pomocí údajů o suplementaci železa ze studie provedené Scholz-Ahrensem et al. (2004), ve kterých byla hlášena koncentrace feritinu v séru po intervenci v 8. týdnu (průměr ± standardní odchylka) 17,7 ± 11,8 ug/l (skupina s mlékem obohaceným Fe) a 10,6 ± 8,1 ug/l (skupina s mlékem bez obohacení). Při velikosti účinku 0,7015447 je celková velikost vzorku požadovaná pro každou skupinu v navrhované studii 26. Vezmeme-li v úvahu 20% míru vyřazení, celková požadovaná velikost vzorku je 31 (výkon = 0,80). Celková velikost vzorku potřebná pro celou studii je tedy 62. Velikost vzorku byla odhadnuta pomocí G Power Software verze 3.1.7.

Statistická analýza:

Všechny statistické analýzy budou prováděny pomocí softwaru International Business Machines (IBM) Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) Statistic Data Editor Software (verze 21). Za předpokladu, že data jsou normálně rozložena po provedení Shapiro Wilksova testu normality, bude provedena jednosměrná analýza rozptylu (ANOVA) s opakovanými měřeními, aby se porovnaly průměrné rozdíly pro všechny měřené parametry v každé skupině na začátku, v mezidobí a po intervenci. Změny měřených parametrů mezi obdobími studie budou analyzovány pomocí párového t-testu. Bude proveden Pearsonův korelační test ke zkoumání vztahu mezi profilem hepcidinu a biomarkery stavu železa. Neparametrický přístup bude přijat, pokud data nejsou normálně distribuována pro všechny analýzy. Rozdíly budou považovány za významné s hodnotou p ≤ 0,05.