Tutkimus D3-vitamiinilisän vaikutuksesta raudanpuutteisten naisten raudan tilaan

Rekrytointi- ja näytteenottostrategia:

Osallistujat rekrytoidaan vain Chesterin yliopistossa, Isossa-Britanniassa. Sähköpostiviestejä ja julisteita/lehtisiä käytetään mainosvälineenä kohderyhmälle (henkilöstö ja opiskelijat). Kaikkiaan 62 premenopausaalista naista, iältään 19-40 vuotta, otetaan mukaan tutkimukseen alla kuvattujen kriteerien perusteella. Kelpoisuus perustuu seerumin ferritiini- ja myös D-vitamiinipitoisuuksiin seulonnassa ennen tutkimuksen alkua. Osallistujien on täytettävä seulontakysely, joka antaa tietoa osallistujan terveydentilasta, lääkkeiden/lääkkeiden/lisäravinteiden käytöstä ja viimeaikaisista sairaudesta/traumasta/vammasta. Plasman ferritiini-D-vitamiinipitoisuuksien, hemoglobiinin ja täysverenkuvan arvioimiseksi otetaan 6 ml:n laskimoverta. Tutkimukseen otetaan osallistujat, joiden plasman ferritiinipitoisuus on alle 20,0 µg/l ja D-vitamiinipitoisuus alle 250 nmol/l. Jos hemoglobiinitasojen todetaan olevan vaikeassa anemiavaiheessa, mahdolliselle osallistujalle ilmoitetaan asiasta ja neuvotaan ottamaan yhteyttä yleislääkäriin (hemoglobiinitasot < 8,0 g/dl). Kaikille kelvollisille osallistujille kerrotaan tutkimusprotokollasta ennen tutkimuksen alkua, ja kelvollisille osallistujille annetaan osallistujatietolomake (PIS) ja pyydetään antamaan kirjallinen tietoinen suostumus.

8 viikkoa kestävä kaksoissokkoutettu, satunnaistettu kontrolloitu koe suoritetaan Chesterissä, Yhdistyneessä kuningaskunnassa (Yhdistynyt kuningaskunta). 8 viikon interventiojakso valittiin, koska yli 1 kuukausi on sopiva erytropoieettisen luuytimen suurentamiseen ja punasoluindeksien muutosten havaitsemiseen, erityisesti ei-anemiaryhmissä. Useimmissa D-vitamiinitutkimuksissa on käytetty 1000 IU:n lisäpitoisuutta, eikä osallistujilla ole raportoitu haittavaikutuksia. Joissakin tutkimuksissa on käytetty suurempia annoksia 1600 tai 4000 IU, eikä osallistujilla ole raportoitu haittavaikutuksia.

Osallistujat jaetaan satunnaisesti kahteen ryhmään:

1. Fe-ryhmä (raudalla täydennetyt aamiaismurot ja lumelääke)
2. D-vitamiiniryhmä (raudalla täydennetyt aamiaismurot ja D3-vitamiini).

Jokainen osallistuja kuluttaa 60 grammaa raudalla täydennettyjä aamiaismuroja, jotka sisältävät yhteensä 9 mg rautaa, päivittäin 8 viikon ajan joko D3-vitamiinin lumelääkkeen tai D3-vitamiinin (1500 IU) kanssa ryhmänsä mukaan. Osallistujat nauttivat raudalla täydennetyt aamiaismurot aamuisin 200 ml rasvattoman maidon kanssa päivittäin 8 viikon ajan. Osallistujat nauttivat D-vitamiinia tai lumelääkettä illalla 200 ml:n kanssa vettä. Osallistujia pyydetään ylläpitämään ruokailutottumuksiaan ja fyysistä aktiivisuuttaan opintojen aikana. Osallistujia pyydetään myös olemaan luovuttamatta verta tutkimuksen aikana. Loput lisäravinteet palautetaan viimeisellä klinikalla (viikolla 8), ja niiden noudattaminen arvioidaan.

Osallistujien tulee käydä yhteensä kolmella klinikalla 8 viikon aikana, ja heidät arvioidaan lähtötilanteessa (päivä 0), välivaiheessa (viikko 4) ja toimenpiteen jälkeen (viikko 8). Osallistujia pyydetään paastoamaan yön yli noin 8 tuntia ennen kaikkia klinikoita. Jokaisella klinikalla otetaan 30 ml verinäyte ja mitataan sekä pituus (cm) että paino (kg). Ennen tutkimuksen alkua ja loppua osallistujien tulee pitää 3 päivän ruokapäiväkirjaa, joka sisältää 2 arkipäivää ja 1 viikonloppupäivä, joka kuvaa osallistujan tavanomaista ravinnonsaantia. Verinäytteet analysoidaan eräanalyysin jälkeen toimenpiteen lopussa kaikkien rautatilan ja D-vitamiinin aineenvaihdunnan biomarkkerien arvioimiseksi.

Näytteen koko ja perustelut:

Näytteen koko arvioitiin käyttämällä rautalisätietoja Scholz-Ahrensin et al. tekemästä tutkimuksesta. (2004), jossa seerumin ferritiinipitoisuudeksi toimenpiteen jälkeen 8 viikon kohdalla (keskiarvo ± S.D) ilmoitettiin 17,7 ± 11,8 ug/l (Fe-pitoinen maitoryhmä) ja 10,6 ± 8,1 ug/l (väkevöimätön maitoryhmä). Vaikutuskoolla 0,7015447 kunkin ryhmän vaadittava kokonaisotoskoko ehdotetussa tutkimuksessa on 26. Kun otetaan huomioon 20 %:n keskeyttämisprosentti, vaadittu otoskoko on yhteensä 31 (teho = 0,80). Siksi koko tutkimukseen tarvittava otoskoko on 62. Otoskoko arvioitiin käyttämällä G Power Softwaren versiota 3.1.7.

Tilastollinen analyysi:

Kaikki tilastolliset analyysit suoritetaan International Business Machines (IBM) Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) -tilastotietojen muokkausohjelmistolla (versio 21). Olettaen, että tiedot jakautuvat normaalisti Shapiro Wilks -normaalisuustestin suorittamisen jälkeen, suoritetaan yksisuuntainen varianssianalyysi (ANOVA) toistuvin mittauksin, jotta voidaan verrata kaikkien mitattujen parametrien keskimääräisiä eroja kussakin ryhmässä lähtötilanteessa, välivaiheessa ja toimenpiteen jälkeen. Mitattujen parametrien muutokset tutkimusjaksojen välillä analysoidaan parillisen t-testin avulla. Pearsonin korrelaatiotesti suoritetaan hepsidiiniprofiilin ja rautastatuksen biomarkkerien välisen suhteen tutkimiseksi. Ei-parametrista lähestymistapaa käytetään, jos tietoja ei normaalisti jaeta kaikkia analyyseja varten. Erot katsotaan merkittäviksi, jos p-arvo on ≤ 0,05.