Um estudo para investigar o efeito da suplementação de vitamina D3 no status de ferro em mulheres com deficiência de ferro

Estratégia de Recrutamento e Amostragem:

Os participantes serão recrutados apenas na Universidade de Chester, no Reino Unido. E-mails e pôsteres/folhetos serão usados ​​como meio de propaganda para o grupo-alvo (funcionários e alunos). Um total de 62 mulheres na pré-menopausa com idades entre 19 e 40 anos serão incluídas no estudo com base nos critérios descritos abaixo. A elegibilidade será baseada na ferritina sérica e também nas concentrações de vitamina D na triagem antes do início do estudo. Os participantes deverão preencher um questionário de triagem que fornecerá informações sobre o estado de saúde do participante, uso de drogas/medicamentos/suplementos e ocorrências recentes de doenças/traumas/lesões. Um sangue venoso de 6 ml será coletado para avaliar as concentrações plasmáticas de ferritina, vitamina D, hemoglobina e hemograma completo. Os participantes com concentrações plasmáticas de ferritina abaixo de 20,0 µg/L e concentração de vitamina D abaixo de 250 nmol/l serão incluídos no estudo. Se os níveis de hemoglobina estiverem em estágio grave de anemia, o potencial participante será notificado e aconselhado a consultar seu médico de clínica geral (GP) (níveis de hemoglobina < 8,0 g/dL). Todos os participantes elegíveis serão informados sobre o protocolo do estudo antes do início do estudo, e os participantes elegíveis receberão uma Folha de Informações do Participante (PIS) e solicitados a fornecer consentimento informado por escrito.

Um estudo controlado randomizado, duplo-cego, de 8 semanas será realizado em Chester, Reino Unido (Reino Unido). O período de intervenção de 8 semanas foi selecionado, pois mais de 1 mês é geralmente apropriado para aumentar a medula eritropoiética e observar alterações nos índices de glóbulos vermelhos, especialmente em grupos não anêmicos. A maioria dos estudos de vitamina D usou uma concentração de suplemento de 1000 UI e não relatou efeitos adversos nos participantes. Alguns estudos usaram doses mais altas de 1600 ou 4000 UI sem resultados adversos relatados nos participantes.

Os participantes serão alocados aleatoriamente em 2 grupos:

1. Grupo Fe (cereais matinais enriquecidos com ferro e placebo)
2. Grupo da vitamina D (cereais matinais enriquecidos com ferro e vitamina D3).

Cada participante consumirá 60 gramas de cereais matinais enriquecidos com ferro contendo um total de 9 mg de ferro diariamente por 8 semanas com placebo de vitamina D3 ou vitamina D3 (1500 UI) de acordo com o grupo designado. Os participantes consumirão os cereais matinais enriquecidos com ferro pela manhã, com 200 ml de leite meio-gordo diariamente por um período de 8 semanas. Os participantes consumirão a vitamina D ou placebo à noite com 200 ml de água. Os participantes serão solicitados a manter seus hábitos alimentares e atividade física durante o curso do estudo. Os participantes também serão solicitados a não doar sangue durante o curso do estudo. Os suplementos restantes serão devolvidos na clínica final (semana 8) e a adesão será estimada.

Os participantes serão obrigados a comparecer a 3 clínicas no total durante um período de 8 semanas, e serão avaliados na linha de base (Dia 0), interino (Semana 4) e pós-intervenção (Semana 8). Os participantes serão solicitados a jejuar durante a noite por aproximadamente 8 horas antes de todas as clínicas. Em cada clínica, uma amostra de sangue de 30 ml será coletada e a altura (cm) e o peso (kg) serão medidos. Antes do início e do final do estudo, os participantes deverão manter um diário alimentar de 3 dias, incluindo 2 dias da semana e 1 dia do fim de semana para representar a ingestão alimentar habitual do participante. Amostras de sangue serão analisadas em lote no final da intervenção para avaliar todos os biomarcadores de status de ferro e metabolismo de vitamina D.

Tamanho da amostra e justificativa:

O tamanho da amostra foi estimado usando dados de suplementação de ferro de um estudo realizado por Scholz-Ahrens et al. (2004) em que foi relatada uma concentração sérica de ferritina pós-intervenção em 8 semanas (média ± DP) de 17,7 ± 11,8 ug/l (grupo de leite fortificado com Fe) e 10,6 ± 8,1 ug/l (grupo de leite não fortificado). Com um tamanho de efeito de 0,7015447, o tamanho amostral total necessário para cada grupo no estudo proposto é 26. Levando em consideração uma taxa de abandono de 20%, o tamanho total da amostra necessária é 31 (Power = 0,80). Portanto, o tamanho total da amostra necessário para todo o estudo é 62. O tamanho da amostra foi estimado usando o software G Power versão 3.1.7.

Análise estatística:

Todas as análises estatísticas serão conduzidas com o Software Statistic Data Editor da International Business Machines (IBM) Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) (Versão 21). Assumindo que os dados são normalmente distribuídos após a realização de um teste de normalidade de Shapiro Wilks, uma análise de variância (ANOVA) de uma via com medidas repetidas será realizada para comparar as diferenças médias de todos os parâmetros medidos dentro de cada grupo na linha de base, intermediária e pós-intervenção. As mudanças nos parâmetros medidos entre os períodos do estudo serão analisadas por meio do teste t pareado. O teste de correlação de Pearson será realizado para investigar a relação entre o perfil de hepcidina e os biomarcadores de status de ferro. Uma abordagem não paramétrica será adotada se os dados não forem normalmente distribuídos para todas as análises. Diferenças serão consideradas significativas com valor de p ≤ 0,05.