Badanie mające na celu zbadanie wpływu suplementacji witaminą D3 na stan żelaza u kobiet z niedoborem żelaza

Strategia rekrutacji i pobierania próbek:

Uczestnicy będą rekrutowani wyłącznie na Uniwersytecie w Chester w Wielkiej Brytanii. E-maile i plakaty/ulotki będą wykorzystywane jako nośnik reklamy do grupy docelowej (pracownicy i studenci). Łącznie 62 kobiety przed menopauzą w wieku od 19 do 40 lat zostaną włączone do badania w oparciu o kryteria opisane poniżej. Kwalifikacja będzie oparta na stężeniu ferrytyny w surowicy, a także witaminy D podczas badania przesiewowego przed rozpoczęciem badania. Uczestnicy będą zobowiązani do wypełnienia kwestionariusza przesiewowego, który dostarczy informacji na temat stanu zdrowia uczestnika, zażywanych leków/leków/suplementów oraz ostatnich przypadków choroby/traumy/urazu. Zostanie pobrana 6 ml krwi żylnej w celu oceny stężenia ferrytyny, witaminy D w osoczu, hemoglobiny i pełnej morfologii krwi. Uczestnicy ze stężeniem ferrytyny w osoczu poniżej 20,0 µg/L i stężeniem witaminy D poniżej 250 nmol/l zostaną włączeni do badania. Jeśli poziom hemoglobiny zostanie stwierdzony w ciężkim stadium anemii, potencjalny uczestnik zostanie powiadomiony i zalecony, aby skonsultował się z lekarzem rodzinnym (poziom hemoglobiny < 8,0 g/dL). Wszyscy kwalifikujący się uczestnicy zostaną poinformowani o protokole badania przed rozpoczęciem badania, a kwalifikujący się uczestnicy otrzymają arkusz informacyjny uczestnika (PIS) i zostaną poproszeni o wyrażenie świadomej zgody na piśmie.

8-tygodniowa, podwójnie ślepa, randomizowana, kontrolowana próba zostanie przeprowadzona w Chester w Wielkiej Brytanii (Wielka Brytania). Wybrano 8-tygodniowy okres interwencji, ponieważ czas dłuższy niż 1 miesiąc jest wystarczający do ogólnego powiększenia szpiku erytropoetycznego i zaobserwowania zmian wskaźników krwinek czerwonych, zwłaszcza w grupach bez niedokrwistości. W większości badań nad witaminą D stosowano suplement w stężeniu 1000 IU i nie zgłaszano żadnych działań niepożądanych u uczestników. W niektórych badaniach stosowano wyższe dawki 1600 lub 4000 IU bez zgłaszanych działań niepożądanych u uczestników.

Uczestnicy zostaną losowo przydzieleni do 2 grup:

1. Grupa Fe (wzbogacone żelazem płatki śniadaniowe i placebo)
2. Grupa witaminy D (wzbogacone w żelazo płatki śniadaniowe i witamina D3).

Każdy uczestnik będzie spożywał 60 gramów płatków śniadaniowych wzbogaconych żelazem, zawierających w sumie 9 mg żelaza dziennie przez 8 tygodni z placebo witaminy D3 lub witaminą D3 (1500 IU) zgodnie z przydzieloną grupą. Uczestnicy będą spożywać wzbogacone w żelazo płatki śniadaniowe rano, popijając 200 ml półtłustego mleka dziennie przez okres 8 tygodni. Uczestnicy spożywają witaminę D lub placebo wieczorem, popijając 200 ml wody. Uczestnicy zostaną poproszeni o utrzymanie nawyków żywieniowych i aktywności fizycznej w trakcie studiów. Uczestnicy zostaną również poproszeni o nieoddawanie krwi w trakcie trwania badania. Pozostałe suplementy zostaną zwrócone w ostatniej klinice (tydzień 8), a zgodność zostanie oszacowana.

Uczestnicy będą musieli uczestniczyć łącznie w 3 klinikach przez okres 8 tygodni i zostaną poddani ocenie na początku badania (dzień 0), w okresie przejściowym (tydzień 4) i po interwencji (tydzień 8). Uczestnicy zostaną poproszeni o poszczenie przez noc przez około 8 godzin przed wszystkimi klinikami. W każdej klinice zostanie pobrana 30 ml próbka krwi i zmierzony zostanie zarówno wzrost (cm), jak i waga (kg). Przed rozpoczęciem i zakończeniem badania uczestnicy będą zobowiązani do prowadzenia 3-dniowego dziennika żywieniowego, który obejmuje 2 dni powszednie i 1 dzień weekendowy, aby przedstawić zwyczajową dietę uczestnika. Próbki krwi będą analizowane partiami pod koniec interwencji w celu oceny wszystkich biomarkerów statusu żelaza i metabolizmu witaminy D.

Wielkość próbki i uzasadnienie:

Wielkość próby oszacowano na podstawie danych dotyczących suplementacji żelaza z badania przeprowadzonego przez Scholz-Ahrens i in. (2004), w którym odnotowano stężenie ferrytyny w surowicy po interwencji po 8 tygodniach (średnia ± SD) wynoszące 17,7 ± 11,8 ug/l (grupa z mlekiem wzbogaconym Fe) i 10,6 ± 8,1 ug/l (grupa z mlekiem niewzbogaconym). Przy wielkości efektu 0,7015447 całkowita wielkość próby wymagana dla każdej grupy w proponowanym badaniu wynosi 26. Biorąc pod uwagę 20% odsetek rezygnacji, całkowita wymagana wielkość próby wynosi 31 (moc = 0,80). Dlatego całkowita wielkość próby potrzebna do całego badania wynosi 62. Wielkość próby oszacowano za pomocą oprogramowania G Power Software w wersji 3.1.7.

Analiza statystyczna:

Wszystkie analizy statystyczne będą przeprowadzane za pomocą oprogramowania Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) Statistical Data Editor (wersja 21) International Business Machines (IBM). Zakładając, że dane mają rozkład normalny po przeprowadzeniu testu normalności Shapiro Wilksa, zostanie przeprowadzona jednokierunkowa analiza wariancji (ANOVA) z powtarzanymi pomiarami w celu porównania średnich różnic dla wszystkich mierzonych parametrów w każdej grupie na początku, w trakcie i po interwencji. Zmiany mierzonych parametrów pomiędzy okresami badania zostaną przeanalizowane za pomocą sparowanego testu t. Test korelacji Pearsona zostanie przeprowadzony w celu zbadania związku między profilem hepcydyny a biomarkerami stanu żelaza. Podejście nieparametryczne zostanie przyjęte, jeśli dane nie mają rozkładu normalnego dla wszystkich analiz. Różnice będą uważane za istotne przy wartości p ≤ 0,05.