Een studie om het effect van vitamine D3-suppletie op de ijzerstatus bij vrouwen met ijzertekort te onderzoeken

Wervings- en bemonsteringsstrategie:

Deelnemers worden alleen geworven binnen de University of Chester, VK. E-mails en posters/folders worden ingezet als reclamemedium voor de doelgroep (personeel en studenten). In totaal zullen 62 pre-menopauzale vrouwen tussen 19 en 40 jaar oud deelnemen aan het onderzoek op basis van de hieronder beschreven criteria. Geschiktheid zal gebaseerd zijn op serumferritine- en ook vitamine D-concentraties bij screening vóór de start van het onderzoek. Deelnemers moeten een screeningvragenlijst invullen die informatie geeft over de gezondheidstoestand van de deelnemer, het gebruik van drugs/medicatie/supplementen en recente gevallen van ziekte/trauma/letsel. Er zal 6 ml veneus bloed worden afgenomen om de concentraties van plasma-ferritine vitamine D, hemoglobine en volledige bloedtellingen te bepalen. Deelnemers met plasma-ferritineconcentraties van minder dan 20,0 µg/L en vitamine D-concentratie van minder dan 250 nmol/l zullen in het onderzoek worden opgenomen. Als de hemoglobinewaarden zich in een ernstig stadium van bloedarmoede bevinden, wordt de potentiële deelnemer hiervan op de hoogte gesteld en geadviseerd om zijn huisarts te raadplegen (hemoglobinewaarden < 8,0 g/dL). Alle in aanmerking komende deelnemers zullen worden ingelicht over het onderzoeksprotocol vóór aanvang van het onderzoek, en de in aanmerking komende deelnemers zullen een deelnemersinformatieblad (PIS) ontvangen en worden gevraagd om schriftelijke geïnformeerde toestemming te geven.

Een 8 weken durende, dubbelblinde, gerandomiseerde gecontroleerde studie zal worden uitgevoerd in Chester, Verenigd Koninkrijk (VK). De interventieperiode van 8 weken werd gekozen omdat meer dan 1 maand geschikt is om het erytropoëtische merg in het algemeen te vergroten en veranderingen in de rode bloedcelindexen waar te nemen, vooral bij niet-anemische groepen. De meeste vitamine D-onderzoeken hebben een supplementconcentratie van 1000 IE gebruikt en geen nadelige effecten bij de deelnemers gemeld. Sommige onderzoeken hebben hogere doses van 1600 of 4000 IE gebruikt zonder bijwerkingen bij de deelnemers.

De deelnemers worden willekeurig verdeeld over 2 groepen:

1. Fe-groep (met ijzer verrijkte ontbijtgranen en placebo)
2. Vitamine D-groep (met ijzer verrijkte ontbijtgranen en vitamine D3).

Elke deelnemer consumeert 60 gram met ijzer verrijkte ontbijtgranen die in totaal 9 mg ijzer per dag bevatten gedurende 8 weken met ofwel vitamine D3-placebo of vitamine D3 (1500 IE) volgens hun toegewezen groep. Gedurende 8 weken consumeren de deelnemers 's morgens de met ijzer verrijkte ontbijtgranen met dagelijks 200 ml halfvolle melk. De deelnemers nemen de vitamine D of placebo 's avonds in met 200 ml water. Deelnemers wordt gevraagd om tijdens de studie hun voedingsgewoonten en lichaamsbeweging te behouden. Deelnemers wordt ook gevraagd om tijdens de studie geen bloed te doneren. De resterende supplementen worden teruggegeven bij de laatste kliniek (week 8) en de therapietrouw wordt geschat.

Deelnemers moeten in totaal 3 clinics bijwonen over een periode van 8 weken, en ze zullen worden beoordeeld bij aanvang (dag 0), tussentijds (week 4) en na de interventie (week 8). Deelnemers wordt verzocht om voor alle clinics ongeveer 8 uur 's nachts te vasten. Bij elke kliniek wordt een bloedmonster van 30 ml genomen en wordt zowel de lengte (cm) als het gewicht (kg) gemeten. Voor de start en het einde van het onderzoek moeten de deelnemers een driedaags voedingsdagboek bijhouden dat 2 doordeweekse dagen en 1 weekenddag omvat om de gebruikelijke inname via de voeding van de deelnemer weer te geven. Bloedmonsters zullen aan het einde van de interventie batchgewijs worden geanalyseerd om alle biomarkers van de ijzerstatus en het vitamine D-metabolisme te beoordelen.

Steekproefomvang en rechtvaardiging:

De steekproefomvang werd geschat met behulp van ijzersuppletiegegevens uit een studie uitgevoerd door Scholz-Ahrens et al. (2004) waarin een serum-ferritineconcentratie na interventie na 8 weken (gemiddelde ± S.D) van 17,7 ± 11,8 ug/l (Fe-verrijkte melkgroep) en 10,6 ± 8,1 ug/l (niet-verrijkte melkgroep) werd gerapporteerd. Met een effectgrootte van 0,7015447 is de totale vereiste steekproefgrootte voor elke groep in het voorgestelde onderzoek 26. Rekening houdend met een uitvalpercentage van 20%, is de totale benodigde steekproefomvang 31 (Power = 0,80). Daarom is de totale steekproefomvang die nodig is voor het hele onderzoek 62. De steekproefomvang werd geschat met behulp van G Power-softwareversie 3.1.7.

Statistische analyse:

Alle statistische analyses worden uitgevoerd met International Business Machines (IBM) Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) Statistic Data Editor Software (versie 21). Ervan uitgaande dat de gegevens normaal verdeeld zijn na het uitvoeren van een Shapiro Wilks normaliteitstest, zal een eenzijdige variantieanalyse (ANOVA) met herhaalde metingen worden uitgevoerd om de gemiddelde verschillen voor alle gemeten parameters binnen elke groep bij aanvang, tussentijds en na de interventie te vergelijken. De veranderingen in de gemeten parameters tussen de periodes van de studie zullen worden geanalyseerd met behulp van gepaarde t-test. De correlatietest van Pearson zal worden uitgevoerd om de relatie tussen het hepcidineprofiel en biomarkers voor de ijzerstatus te onderzoeken. Een niet-parametrische benadering wordt toegepast als de gegevens niet voor alle analyses normaal verdeeld zijn. Verschillen worden als significant beschouwd bij een p-waarde ≤ 0,05.