Orgány poškozené sepsí – dvojité markery Identifikace selhání orgánů pomocí fluorescenční analýzy sledování nanočástic
Nemocnice Taipei Tzu Chi, buddhistická lékařská nadace Tzu Chi, Institucionální kontrolní rada
Přehled studie
Postavení
Detailní popis
Východiska: Sepse, definovaná jako život ohrožující orgánová dysfunkce způsobená dysregulovanou reakcí hostitele na infekci, je i nadále zdrojem značné morbidity a mortality. Na celém světě je každý rok zaznamenáno 19 milionů případů. Mnoho modelů zvířecí sepse zjistilo, že sepse vyvolala selhání více orgánů. Ubikvitinace, autofagie, apoptóza mohou zahrnovat proces sepse souvisejícího se selháním více orgánů. Proteomické studie založené na hmotnostní spektrometrii v klinických populacích a na zvířecích modelech hlodavců a savců začaly objevením mnoha nových biomarkerů sepse. Esoxomy nalezené v krvi nebo moči představovaly signál autofagie a apoptózy. Nedávno byla jako nová metoda pro přímou analýzu exozomů a v reálném čase použita analýza sledování nanočástic (NTA). Ty umožňují studovat exosomové biomarkery k analýze septických pacientů s mnohočetným selháním orgánů.
Cíle studie: Tento výzkum bude první studií, která nejenže vytvoří makrofágy společně kultivované s modely buněk lidských orgánů pro sekreci exozomů, ale také shromáždí purifikované exozomy v krvi a moči od septických pacientů. Proteomické studie v exozomech z buněčné kultury a klinických vzorků. Analyzujte biomarkery exozomů související s ubikvitinací, autofágy a apoptózou pomocí bioinformatiky. Použijte NTA k nastavení nových diagnostických metod, k posouzení specifického orgánového poškození septického pacienta exozomovými biomarkery autofagie-apoptózy.
Materiály a metody: V 1. roce bude založen LPS (lipopolysacharidem) stimulovaný makrofág kokultivovaný s buňkami lidských orgánů. Exosomy budou izolovány a purifikovány z různých skupin. ScFv (jednořetězcové fragmenty protilátky) budou vybrány pro blokování přenosu exosomu souvisejícího s infekcí. Do 2. ročníku bude zařazeno celkem 60 pacientů s infekcí a pozitivními kultivačními výsledky, z toho u 30 septických pacientů došlo k selhání alespoň jednoho orgánu, ostatní budou mít pouze infekci. Všichni pacienti byli zahrnuti a klasifikováni podle kritérií sepse-3. Klinické vzorky budou odebírány od srpna 2017 do července 2019. Exosom bude izolován a purifikován. Purifikace magnetickými kuličkami, 2D gelová elektroforéza, MALDI-TOF a bioinformatika budou použity k analýze proteomiky exozomů a asociace orgánově specifických markerů, autofagie a markerů apoptózy. K prokázání proteinů nalezených proteomikou bude proveden Western blotting. Cytokinové pole v krvi také potvrzuje a koreluje s autofagií. Nakonec použijeme analýzu sledování nanočástic s identifikací dvojitých markerů k pochopení exosomových subpopulací specifických biomarkerů orgánů a autofagie-apoptózy.
Možný účinek: Bude prováděno systematické zavádění exosomové proteomiky v kokultivačním médiu a vzorcích klinické sepse. Studie in vitro, zkoumání ScFv pomůže blokovat vychytávání exzomů jako možná terapeutická metoda. Biomarkery ubikvitinace-autofagie-apoptóza v exozomech budou detekovány a korelovány se specifickým orgánovým selháním v sepsi. Zánětlivý proces bude také ověřen analýzou cytokinů. Identifikace dvojitých markerů NTA bude chytrou metodou k pochopení subpopulací exosomů.
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Taipei, Tchaj-wan
- Wen-Lin Su
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Popis
Kritéria pro zařazení:
Septičtí pacienti budou mít „akutní změnu celkového skóre SOFA ≥ 2 body v důsledku infekce“ Sepse se selháním orgánů Sepse bez selhání orgánů
Kritéria vyloučení:
pacientů, kteří měli chronické respirační selhání se závislostí na ventilátoru chronické selhání ledvin s pravidelnou hemodialýzou
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
Kohorty a intervence
Skupina / kohorta |
|---|
|
Sepse se selháním orgánů
Pacienti mají orgánové selhání
|
|
Sepse bez selhání orgánů
Pacienti nemají žádné orgánové selhání
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Ubikvitinace-autofagie-apoptóza biomarkery v exozomech budou detekovány a korelovány se specifickým orgánovým selháním při sepsi
Časové okno: do 24 hodin.
|
Ubikvitinace-autofagie-apoptóza biomarkery v exozomech budou detekovány a korelovány se specifickým orgánovým selháním při sepsi
|
do 24 hodin.
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Zánětlivý proces bude také ověřen analýzou cytokinů.
Časové okno: do 24 hodin.
|
Zánětlivý proces bude také ověřen analýzou cytokinů.
|
do 24 hodin.
|
|
Identifikace dvojitých markerů NTA bude chytrou metodou k pochopení subpopulací exosomů.
Časové okno: do 24 hodin.
|
Identifikace dvojitých markerů NTA bude chytrou metodou k pochopení exosomu
|
do 24 hodin.
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Vyšetřovatelé
- Ředitel studie: Wen-Lin Su, PhD, Taipei Tzu Chi Hospital, Buddhist Tzu Chi Medical Foundation
Publikace a užitečné odkazy
Obecné publikace
- 1. Dombrovskiy, V.Y., et al., Rapid increase in hospitalization and mortality rates for severe sepsis in the United States: a trend analysis from 1993 to 2003. Crit Care Med, 2007. 35(5): p. 1244-50. 2. Angus, D.C., et al., Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care. Crit Care Med, 2001. 29(7): p. 1303-10. 3. Martin, G.S., et al., The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000. N Engl J Med, 2003. 348(16): p. 1546-54. 4. van Zanten, A.R., The golden hour of antibiotic administration in severe sepsis: avoid a false start striving for gold*. Crit Care Med, 2014. 42(8): p. 1931-2. 5. Duran-Bedolla, J., et al., Sepsis, mitochondrial failure and multiple organ dysfunction. Clin Invest Med, 2014. 37(2): p. E58-69.
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (AKTUÁLNÍ)
Primární dokončení (AKTUÁLNÍ)
Dokončení studie (AKTUÁLNÍ)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (AKTUÁLNÍ)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (AKTUÁLNÍ)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- 04-XD37-104
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .