Podwójne znaczniki narządów uszkodzonych przez sepsę Identyfikacja niewydolności narządów za pomocą analizy śledzenia nanocząstek fluorescencyjnych
Szpital Taipei Tzu Chi, Instytucjonalna Rada Rewizyjna Buddyjskiej Fundacji Medycznej Tzu Chi
Przegląd badań
Status
Szczegółowy opis
Wstęp: Sepsa, definiowana jako zagrażająca życiu dysfunkcja narządów spowodowana rozregulowaną odpowiedzią gospodarza na infekcję, nadal jest źródłem znacznej zachorowalności i śmiertelności. Każdego roku na całym świecie obserwuje się 19 milionów przypadków. Wiele zwierzęcych modeli sepsy wykazało, że sepsa wywołuje niewydolność wielonarządową. Ubikwitynacja, autofagia, apoptoza mogą obejmować proces niewydolności wielonarządowej związanej z sepsą. Badania proteomiczne oparte na spektrometrii mas w populacjach klinicznych oraz na modelach zwierzęcych gryzoni i ssaków rozpoczęły się od odkrycia wielu nowych biomarkerów sepsy. Ezoksomy wykryte we krwi lub moczu wykazywały sygnał autofagii i apoptozy. Niedawno zastosowano analizę śledzenia nanocząstek (NTA) jako nową metodę bezpośredniej analizy egzosomów w czasie rzeczywistym. Umożliwiają one badanie biomarkerów egzosomów w celu analizy pacjentów z sepsą i niewydolnością wielonarządową.
Cele badania: Badania te będą pierwszymi, które nie tylko stworzą makrofagi współhodowane z modelami komórek narządów ludzkich do wydzielania egzosomów, ale także pobiorą oczyszczone egzosomy z krwi i moczu pacjentów z sepsą. Badania proteomiczne egzosomów z hodowli komórkowych i próbek klinicznych. Analiza biomarkerów egzosomów związanych z ubikwitynacją, autofagami i apoptozą za pomocą bioinformatyki. Użyj NTA, aby ustanowić nowe metody diagnostyczne, aby ocenić uszkodzenie konkretnego narządu pacjenta z sepsą za pomocą biomarkerów autofagii-apoptozy egzosomów.
Materiały i metody: W pierwszym roku zostaną założone makrofagi stymulowane LPS (lipopolisacharydem) hodowane wspólnie z komórkami narządów ludzkich. Egzosomy zostaną wyizolowane i oczyszczone z różnych grup. ScFv (fragmenty jednołańcuchowe przeciwciała) zostaną wybrane do blokowania transmisji egzosomu związanego z infekcją. W drugim roku uwzględnionych zostanie łącznie 60 pacjentów z infekcją i dodatnimi wynikami posiewów, z których 30 pacjentów z sepsą miało co najmniej jedną niewydolność narządową, inni będą mieli tylko infekcję. Wszyscy pacjenci zostali włączeni i sklasyfikowani zgodnie z kryteriami sepsy-3. Próbki kliniczne będą pobierane od sierpnia 2017 do lipca 2019. Egzosom zostanie wyizolowany i oczyszczony. Oczyszczanie kulek magnetycznych, elektroforeza żelowa 2D, MALDI-TOF i bioinformatyka zostaną wykorzystane do analizy proteomiki egzosomów i asocjacji markerów specyficznych dla narządu, markerów autofagii i apoptozy. Wykonane zostanie badanie Western blotting, aby udowodnić białka znalezione za pomocą proteomiki. Szereg cytokin we krwi również potwierdza i koreluje z autofagią. Na koniec wykorzystamy analizę śledzenia nanocząstek z identyfikacją podwójnych markerów, aby zrozumieć subpopulacje egzosomów określonych biomarkerów narządów i autofagii-apoptozy.
Możliwy efekt: Zostanie przeprowadzone systematyczne ustalanie proteomiki egzosomów w pożywce do wspólnej hodowli i próbkach klinicznych posocznicy. Badanie in vitro, eksploracja ScFv pomoże zablokować wychwyt ekssomów jako możliwą metodę terapeutyczną. Biomarkery ubikwitynacji-autofagii-apoptozy w egzosomach zostaną wykryte i skorelowane z niewydolnością określonego narządu w sepsie. Proces zapalny zostanie również zweryfikowany przez analizę cytokin. Identyfikacja podwójnych markerów NTA będzie inteligentną metodą zrozumienia subpopulacji egzosomów.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
-
Taipei, Tajwan
- Wen-Lin Su
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Płeć kwalifikująca się do nauki
Metoda próbkowania
Badana populacja
Opis
Kryteria przyjęcia:
Pacjenci z sepsą będą mieli „ostrą zmianę w całkowitym wyniku SOFA ≥ 2 punkty w następstwie infekcji” Sepsa z niewydolnością narządową Sepsa bez niewydolności narządowej
Kryteria wyłączenia:
pacjentów z przewlekłą niewydolnością oddechową uzależnioną od respiratora z przewlekłą niewydolnością nerek z regularną hemodializą
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
Kohorty i interwencje
Grupa / Kohorta |
|---|
|
Sepsa z niewydolnością narządów
Pacjenci mają niewydolność narządów
|
|
Sepsa bez niewydolności narządu
Pacjenci nie mają niewydolności narządowej
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Biomarkery ubikwitynacji-autofagii-apoptozy w egzosomach zostaną wykryte i skorelowane z niewydolnością określonego narządu w sepsie
Ramy czasowe: w ciągu 24 godzin.
|
Biomarkery ubikwitynacji-autofagii-apoptozy w egzosomach zostaną wykryte i skorelowane z niewydolnością określonego narządu w sepsie
|
w ciągu 24 godzin.
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Proces zapalny zostanie również zweryfikowany przez analizę cytokin.
Ramy czasowe: w ciągu 24 godzin.
|
Proces zapalny zostanie również zweryfikowany przez analizę cytokin.
|
w ciągu 24 godzin.
|
|
Identyfikacja podwójnych markerów NTA będzie inteligentną metodą zrozumienia subpopulacji egzosomów.
Ramy czasowe: w ciągu 24 godzin.
|
Identyfikacja podwójnych markerów NTA będzie inteligentną metodą zrozumienia egzosomu
|
w ciągu 24 godzin.
|
Współpracownicy i badacze
Śledczy
- Dyrektor Studium: Wen-Lin Su, PhD, Taipei Tzu Chi Hospital, Buddhist Tzu Chi Medical Foundation
Publikacje i pomocne linki
Publikacje ogólne
- 1. Dombrovskiy, V.Y., et al., Rapid increase in hospitalization and mortality rates for severe sepsis in the United States: a trend analysis from 1993 to 2003. Crit Care Med, 2007. 35(5): p. 1244-50. 2. Angus, D.C., et al., Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care. Crit Care Med, 2001. 29(7): p. 1303-10. 3. Martin, G.S., et al., The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000. N Engl J Med, 2003. 348(16): p. 1546-54. 4. van Zanten, A.R., The golden hour of antibiotic administration in severe sepsis: avoid a false start striving for gold*. Crit Care Med, 2014. 42(8): p. 1931-2. 5. Duran-Bedolla, J., et al., Sepsis, mitochondrial failure and multiple organ dysfunction. Clin Invest Med, 2014. 37(2): p. E58-69.
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (RZECZYWISTY)
Zakończenie podstawowe (RZECZYWISTY)
Ukończenie studiów (RZECZYWISTY)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (RZECZYWISTY)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (RZECZYWISTY)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- 04-XD37-104
Plan dla danych uczestnika indywidualnego (IPD)
Planujesz udostępniać dane poszczególnych uczestników (IPD)?
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .