Sepsiksen vaurioittamat elimet - kaksoismarkkerit Elinten vajaatoiminnan tunnistaminen fluoresoivien nanopartikkelien seuranta-analyysillä
Taipei Tzu Chi -sairaala, buddhalainen Tzu Chi Medical Foundationin institutionaalinen arviointilautakunta
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Yksityiskohtainen kuvaus
Tausta: Sepsis, joka määritellään henkeä uhkaavaksi elinten toimintahäiriöksi, joka johtuu isännän epäsäännöllisestä vasteesta infektioon, on edelleen huomattavan sairastuvuuden ja kuolleisuuden lähde. Maailmassa havaitaan vuosittain 19 miljoonaa tapausta. Monet eläinsepsismallit olivat havainneet, että sepsis aiheutti useiden elinten vajaatoiminnan. Ubiquitinaatio, autofagia, apoptoosi voivat sisältää sepsikseen liittyvän useiden elinten vajaatoiminnan. Massaspektrometriaan perustuvat proteomiikkatutkimukset kliinisissä populaatioissa sekä jyrsijä- ja nisäkäseläinmalleissa olivat alkaneet löytää monia uusia sepsiksen biomarkkereita. Verestä tai virtsasta oli löydetty esoksomeja, jotka esittivät signaalin autofagiasta ja apoptoosista. Äskettäin nanohiukkasten seuranta-analyysiä (NTA) käytettiin uutena menetelmänä eksosomien suorassa ja reaaliaikaisessa analysoinnissa. Nämä antavat mahdollisuuden tutkia eksosomien biomarkkereita analysoimaan septisiä potilaita, joilla on monielinten vajaatoiminta.
Tutkimuksen tavoitteet: Tämä tutkimus on ensimmäinen tutkimus, jossa ei ainoastaan pystytä makrofageja, joita viljellään yhdessä ihmisen elinsolumallien kanssa eksosomien erityksiä varten, vaan myös kerätään puhdistettuja eksosomeja septisten potilaiden verestä ja virtsasta. Proteomiikkatutkimukset soluviljelmistä ja kliinisistä näytteistä peräisin olevissa eksosomeissa. Analysoi eksosomien ubikvitinaatioon, autofaagiin ja apoptoosiin liittyviä biomarkkereita bioinformatiikan avulla. Käytä NTA:ta uusien diagnostisten menetelmien luomiseen, arvioidaksesi septisen potilaan spesifisiä elinvaurioita eksosomien autofagia-apoptoosin biomarkkereiden avulla.
Materiaalit ja menetelmät: Ensimmäisenä vuonna perustetaan LPS:llä (lipopolysakkaridilla) stimuloituja makrofageja, joita viljellään yhdessä ihmisen elinsolujen kanssa. Eksosomit eristetään ja puhdistetaan eri ryhmistä. ScFv (vasta-aineen yksiketjuiset fragmentit) valitaan estämään infektioon liittyvä eksosomien siirtyminen. 2. vuonna mukaan otetaan yhteensä 60 potilasta, joilla on infektio ja viljelytulokset positiiviset, joista 30 septisellä potilaalla oli vähintään yksi elinvajaus, muilla vain infektio. Kaikki potilaat sisällytettiin ja luokiteltiin sepsis-3-kriteerin mukaan. Kliiniset näytteet kerätään elokuusta 2017 heinäkuuhun 2019. Eksosomi eristetään ja puhdistetaan. Magneettihelmien puhdistusta, 2D-geelielektroforeesia, MALDI-TOF:ia ja bioinformatiikkaa käytetään analysoimaan eksosomien proteomiikkaa ja elinspesifisten markkerien, autofagian ja apoptoosin markkerien yhdistämistä. Western blottaus tehdään proteomiikan löytämien proteiinien osoittamiseksi. Sytokiiniryhmä veressä myös vahvistaa ja korreloi autofagiaa. Lopuksi käytämme nanopartikkelien seuranta-analyysiä kaksoismarkkerien tunnistamisella ymmärtääksemme spesifisten elinten ja autofagia-apoptoosin biomarkkerien eksosomialapopulaatioita.
Mahdollinen vaikutus: Eksosomiproteomiikan järjestelmällinen määrittäminen yhteisviljelyalusta- ja kliinisissä sepsisnäytteissä tehdään. In vitro -tutkimus, ScFv-tutkimus auttaa estämään ekssomien sisäänottoa mahdollisena terapeuttisena menetelmänä. Ubiquitination-autofagia-apoptoosi biomarkkerit eksosomeissa havaitaan ja korreloidaan spesifiseen elimen vajaatoimintaan sepsiksessä. Tulehdusprosessi validoidaan myös sytokiinianalyysillä. NTA-kaksoismerkkien tunnistaminen on fiksu tapa ymmärtää eksosomien alapopulaatioita.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Taipei, Taiwan
- Wen-Lin Su
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
Septisilla potilailla on "akuutti muutos SOFA:n kokonaispistemäärässä ≥ 2 pistettä infektion seurauksena" Sepsis, johon liittyy elimen vajaatoiminta Sepsis ilman elinten vajaatoimintaa
Poissulkemiskriteerit:
potilaat, joilla oli krooninen hengitysvajaus ja hengityslaiteriippuvainen krooninen munuaisten vajaatoiminta säännöllisessä hemodialyysissä
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
|---|
|
Sepsis, johon liittyy elinten vajaatoiminta
Potilailla on elinten vajaatoiminta
|
|
Sepsis ilman elinten vajaatoimintaa
Potilailla ei ole elinten vajaatoimintaa
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Ubiquitinaatio-autofagia-apoptoosi biomarkkerit eksosomeissa havaitaan ja korreloidaan spesifiseen elimen vajaatoimintaan sepsiksessä
Aikaikkuna: 24 tunnin sisällä.
|
Ubiquitinaatio-autofagia-apoptoosi biomarkkerit eksosomeissa havaitaan ja korreloidaan spesifiseen elimen vajaatoimintaan sepsiksessä
|
24 tunnin sisällä.
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Tulehdusprosessi validoidaan myös sytokiinianalyysillä.
Aikaikkuna: 24 tunnin sisällä.
|
Tulehdusprosessi validoidaan myös sytokiinianalyysillä.
|
24 tunnin sisällä.
|
|
NTA-kaksoismerkkien tunnistaminen on fiksu tapa ymmärtää eksosomien alapopulaatioita.
Aikaikkuna: 24 tunnin sisällä.
|
NTA-kaksoismerkkien tunnistaminen on älykäs menetelmä eksosomin ymmärtämiseen
|
24 tunnin sisällä.
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Tutkijat
- Opintojohtaja: Wen-Lin Su, PhD, Taipei Tzu Chi Hospital, Buddhist Tzu Chi Medical Foundation
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- 1. Dombrovskiy, V.Y., et al., Rapid increase in hospitalization and mortality rates for severe sepsis in the United States: a trend analysis from 1993 to 2003. Crit Care Med, 2007. 35(5): p. 1244-50. 2. Angus, D.C., et al., Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care. Crit Care Med, 2001. 29(7): p. 1303-10. 3. Martin, G.S., et al., The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000. N Engl J Med, 2003. 348(16): p. 1546-54. 4. van Zanten, A.R., The golden hour of antibiotic administration in severe sepsis: avoid a false start striving for gold*. Crit Care Med, 2014. 42(8): p. 1931-2. 5. Duran-Bedolla, J., et al., Sepsis, mitochondrial failure and multiple organ dysfunction. Clin Invest Med, 2014. 37(2): p. E58-69.
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (TODELLINEN)
Ensisijainen valmistuminen (TODELLINEN)
Opintojen valmistuminen (TODELLINEN)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (TODELLINEN)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (TODELLINEN)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 04-XD37-104
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .