Účinky kyseliny močové na endotel a oxidační stres

Cílem výzkumného protokolu je jasně oddělit příslušné role dráhy kyseliny močové (UA) a xanthinoxidoreduktázy (XOR) na endoteliální funkci a oxidační stres u lidí.

UA představuje konečný produkt metabolismu purinů v důsledku ztráty urikázy před 15 miliony let u lidí. Selektivní výhodou této mutace by mohl být silný antioxidační účinek UA (který představuje více než 60 % antioxidační plazmatické kapacity). Mnoho nedávných epidemiologických studií prokázalo souvislost tvaru J mezi hladinami UA a kardiovaskulárním rizikem. Hladina UA nižší než 3 mg/dl by mohla být poškozena v důsledku ztráty antioxidačních vlastností UA. Naproti tomu hyperurikémie je spojena se zvýšeným zánětem, inzulinovou rezistencí, ED, agregací krevních destiček, hypertrofií levé komory, poškozením arteriální vazodilatace, ztuhlostí aorty a tloušťkou intima-medie. Nicméně souvislost mezi UA a kardiovaskulárním onemocněním zůstává kontroverzní, protože není jasné, zda je UA nezávislým rizikovým faktorem pro tato onemocnění.

Intervenční studie:

Protože výše uvedené souvislosti neprokazují příčinnou souvislost, několik autorů navrhlo intervenční studie s cílem modifikovat hladiny UA a určit, zda to ovlivnilo endoteliální funkci a oxidační stres. Hlavním omezením těchto studií je, že nebyly schopny rozvázat účinky syntézy UA, samotného UA a aktivity XOR, na produkci ROS a endoteliální funkci u lidí.

To je proto, že:

1. sérum UA je silný plazmatický antioxidant,
2. ale transformace hypoxanthinu na xanthin a xanthinu na UA pomocí XO vytváří intracelulární ROS,
3. navíc v endoteliálních buňkách UA snižuje biologickou dostupnost NO mnoha způsoby (blokáda a degradace L-argininu, zvýšená produkce superoxidových aniontů, inhibice NOS, snížená exprese genů NOS a přímé vychytávání NO),
4. navíc UA tvoří krystaly ve stěně endotelu, které vytvářejí prozánětlivý a trombotický stav, zvyšují proliferaci buněk hladkého svalstva a také inzulínovou rezistenci a zánět v adipocytech,
5. konečně, a to je nejdůležitější, XO je inhibován fyziologickými hladinami UA (který působí jako nekompetitivní inhibitor XO).

Stručně řečeno, tento protokol má za cíl otestovat následující hypotézu:

1. Experimentální variace UA v séru korelují s endoteliální funkcí a markery oxidačního stresu: extrémně nízká hladina po podání urikázy indukuje ED a oxidační stres,
2. Specifický inhibitor XO (FX) omezuje nepříznivé účinky snížení sérového UA vyvolaného podáváním urikázy, protože to bude bránit zpětné aktivaci XO nízkou hladinou UA,
3. Endoteliální funkce a oxidační stres jsou s FX dále zlepšeny ve srovnání s placebem, protože první experimentální stav vede k blokádě XO,
4. Všechna tato pozorování jsou výraznější u pacientů s hypertenzí než u starších účastníků než u mladých zdravých subjektů.

Sběr dat

Sběr dat od účastníků bude shromažďován informativně prostřednictvím formuláře kazuistiky. Jména a osobní údaje pacientů budou uchovávány na tajném místě nebo v souboru chráněném heslem. Všechna data budou na konci studie zničena (včetně vzorků krve a moči).

Statistická analýza

Statistická analýza bude provedena pomocí SPSS. Základní charakteristiky budou porovnány pomocí Studentova t testu. K detekci významných změn mezi relacemi a skupinami budou použity dvoucestné ANOVA s opakovanými měřeními. Statistická významnost se předpokládá, když p je <0,05. Velikost vzorku není možná kvůli nedostatku údajů o účinku akutní hypourikemie. Odhadujeme minimálně 15 účastníků v každé skupině.

Pro negaussovské proměnné bude použit specifický test. V případě potřeby bude použit korelační test podle výsledků prvního testu.

Použity budou také hodnoty korigované placebem a srovnání delta.

Pro studii populace 2 a 3 (zapsané společně) budou provedeny analýzy podskupin.