Využití editace epigenomu u Kabukiho syndromu: nová cesta ke genové terapii vzácných genetických poruch (Epi-KAB)

Hlavní a vedlejší cíle:

Hlavním cílem je studium patologické role ML mutací v KS s cílem usnadnit identifikaci a charakterizaci terapeutických strategií ke zlepšení symptomů pacientů s KS. Vzhledem k chybějící léčbě v KS je cílem vyvinout model tohoto onemocnění z fibroblastů pacientů a přeprogramovat je na mezenchymální kmenové buňky. Tento přístup vytvoří biobanku kmenových buněk specifickou pro KS, která umožní identifikaci běžných poruch způsobených ztrátou funkce (LoF) KMT2D. Bude popsán vliv KMT2D LoF na transkripci, ale také epigenetické mechanismy aktivované během diferenciace MSC. Nakonec bude vyhodnocen terapeutický potenciál přístupu "editace" epigenomu ke zvýšení exprese divoké alely KMT2D pro obnovení funkční aktivity MLL4 v léčených MSC.

Sekundárním cílem je vyhodnotit schopnost návratu k normálu po léčbě genovou terapií CRISPR/Case9 na buňkách pacientů

Metodologie (design studie, populace, popis skupin (pokud je to vhodné), kritéria pro zařazení, nezařazení, hlavní a vedlejší kritéria hodnocení, počet subjektů, které mají být zahrnuty, statistická analýza...) :

Počínaje primárními buňkami izolovanými od postižených pacientů bude vyvinut in vitro model onemocnění. Bude přijat integrativní, ale alternativní strategický přístup k získání mezenchymálních kmenových buněk odvozených od pacientů k definování normální a abnormální transkripce a epigenetických okruhů během KMT2D LoF. Kombinací autonomního obnovovacího potenciálu MSC s technologií CRISPR/Cas9 bude vyvinut přístup k „úpravě“ epigenomu pro terapeutické účely s cílem obnovit aktivitu MLL4.

Tento projekt bude představovat krok vpřed v pochopení molekulárních mechanismů odpovědných za KS. Model in vitro poskytne vědecké komunitě experimentální systém pro studium KS. Nakonec je cílem definovat molekulární základ KS a vyvinout terapeutickou strategii ke zlepšení určitých symptomů u pacientů s KS.

Proces (počet návštěv, délka zařazení, délka sledování):

Bude zahrnuto 8 osob: 4 pacienti s Kabuki syndromem ověření molekulárně genetickou studií genu KMT2D.

4 rodiče stejného pohlaví jako pacient

Proveditelnost:

Na oddělení klinické genetiky Fakultní nemocnice v Montpellier je sledováno více než 40 pacientů s Kabuki syndromem.

Dopady / vyhlídky :

Identifikace důsledků mutací v genu KMT2D na změny epigenetických znamének a změny buněčné struktury, stejně jako pokus o genovou korekci pomocí CRISPR/Cas9, poskytne lepší pochopení onemocnění (a genů, které jsou deregulovány post-KMT2D epigenetické změny) a také otevře slibnou cestu pro genovou terapii metodou CRISPR/Cas9.