Explotación de la edición del epigenoma en el síndrome de Kabuki: una nueva ruta hacia la terapia génica para trastornos genéticos raros (Epi-KAB)

Objetivos principales y secundarios:

El objetivo principal es estudiar el papel patológico de las mutaciones de ML en el KS para facilitar la identificación y caracterización de estrategias terapéuticas para mejorar los síntomas de los pacientes con KS. Debido a la falta de tratamiento en el SK, el objetivo es desarrollar un modelo de esta enfermedad a partir de fibroblastos de pacientes y reprogramarlos en células madre mesenquimales. Este enfoque generará un biobanco de células madre específico de KS, lo que permitirá la identificación de alteraciones comunes causadas por la pérdida de función (LoF) de KMT2D. Se describirá el impacto de KMT2D LoF en la transcripción, pero también los mecanismos epigenéticos activados durante la diferenciación de MSC. Finalmente, se evaluará el potencial terapéutico de un enfoque de "edición" del epigenoma para aumentar la expresión del alelo KMT2D salvaje para restaurar la actividad funcional de MLL4 en las CMM tratadas.

El objetivo secundario es evaluar la capacidad de volver a la normalidad después del tratamiento de terapia génica CRISPR/Case9 en las células de los pacientes

Metodología (diseño del estudio, población, descripción de grupos (si procede), criterios de inclusión, no inclusión, criterios de juicio principales y secundarios, número de sujetos a incluir, análisis estadístico...) :

Partiendo de células primarias aisladas de pacientes afectados, se desarrollará un modelo in vitro de la enfermedad. Se adoptará un enfoque estratégico integrador pero alternativo para obtener células madre mesenquimales derivadas de pacientes para definir la transcripción normal y anormal y los circuitos epigenéticos durante KMT2D LoF. Al combinar el potencial de renovación autónoma de las MSC con la tecnología CRISPR/Cas9, se desarrollará un enfoque para "editar" el epigenoma con fines terapéuticos para restaurar la actividad de MLL4.

Este proyecto representará un paso adelante en la comprensión de los mecanismos moleculares responsables del KS. El modelo in vitro proporcionará a la comunidad científica un sistema experimental para estudiar el KS. Finalmente, el objetivo es definir las bases moleculares del KS y desarrollar una estrategia terapéutica para mejorar ciertos síntomas en pacientes con KS.

Proceso (número de visitas, duración de las inclusiones, duración del seguimiento):

Se incluirán 8 personas: 4 pacientes con síndrome de Kabuki autentificados por el estudio de genética molecular del gen KMT2D.

4 padres del mismo sexo que el paciente

Factibilidad :

En el departamento de genética clínica del Hospital Universitario de Montpellier se siguen más de 40 pacientes con síndrome de Kabuki.

Impactos / perspectivas:

La identificación de las consecuencias de las mutaciones en el gen KMT2D sobre los cambios en las marcas epigenéticas y los cambios estructurales celulares, así como el intento de corrección génica por CRISPR/Cas9, proporcionarán una mejor comprensión de la enfermedad (y de los genes que se desregulan por post-KMT2D). cambios epigenéticos) y también abrirá un camino prometedor para la terapia génica por el método CRISPR/Cas9.