Explorando a edição do epigenoma na síndrome de Kabuki: uma nova rota para a terapia genética para distúrbios genéticos raros (Epi-KAB)

Objetivos principais e secundários:

O objetivo principal é estudar o papel patológico das mutações ML no SK para facilitar a identificação e caracterização de estratégias terapêuticas para melhorar os sintomas dos pacientes com SK. Devido à falta de tratamento no SK, o objetivo é desenvolver um modelo dessa doença a partir de fibroblastos de pacientes e reprogramá-los em células-tronco mesenquimais. Essa abordagem gerará um biobanco de células-tronco específicas para KS, permitindo a identificação de distúrbios comuns causados ​​pela perda de função (LoF) de KMT2D. O impacto do KMT2D LoF na transcrição, mas também os mecanismos epigenéticos ativados durante a diferenciação MSC serão descritos. Finalmente, será avaliado o potencial terapêutico de uma abordagem de "edição" do epigenoma para aumentar a expressão do alelo selvagem KMT2D para restaurar a atividade funcional do MLL4 em MSCs tratadas.

O objetivo secundário é avaliar a capacidade de retornar ao normal após o tratamento com terapia gênica CRISPR/Case9 nas células dos pacientes

Metodologia (estudo de desenho, população, descrição dos grupos (se aplicável), critérios de inclusão, não inclusão, critérios de julgamento principais e secundários, número de sujeitos a serem incluídos, análise estatística...):

A partir de células primárias isoladas de pacientes afetados, será desenvolvido um modelo in vitro da doença. Será adotada uma abordagem de estratégia integrativa, mas alternativa, para obter células-tronco mesenquimais derivadas de pacientes para definir transcrição normal e anormal e circuitos epigenéticos durante KMT2D LoF. Ao combinar o potencial de renovação autônoma das MSCs com a tecnologia CRISPR/Cas9, será desenvolvida uma abordagem para "editar" o epigenoma para fins terapêuticos para restaurar a atividade do MLL4.

Este projeto representará um passo adiante na compreensão dos mecanismos moleculares responsáveis ​​pelo SK. O modelo in vitro fornecerá à comunidade científica um sistema experimental para estudar o SK. Finalmente, o objetivo é definir a base molecular do SK e desenvolver uma estratégia terapêutica para melhorar alguns sintomas em pacientes com SK.

Processo (número de visitas, duração das inclusões, duração do acompanhamento):

Serão incluídas 8 pessoas: 4 pacientes com síndrome de Kabuki autenticados pelo estudo de genética molecular do gene KMT2D.

4 pais do mesmo sexo do paciente

Viabilidade:

No departamento de genética clínica do Hospital Universitário de Montpellier, mais de 40 pacientes com síndrome de Kabuki são acompanhados.

Impactos/perspectivas:

A identificação das consequências das mutações no gene KMT2D nas alterações de marcas epigenéticas e alterações estruturais celulares, bem como a tentativa de correção gênica por CRISPR/Cas9 proporcionará um melhor entendimento da doença (e dos genes desregulados pela pós-KMT2D mudanças epigenéticas) e também abrirá um caminho promissor para a terapia gênica pelo método CRISPR/Cas9.