Использование редактирования эпигенома при синдроме Кабуки: новый путь к генной терапии редких генетических нарушений (Epi-KAB)

Основные и второстепенные цели:

Основная цель состоит в том, чтобы изучить патологическую роль мутаций ML при СК, чтобы облегчить идентификацию и характеристику терапевтических стратегий для улучшения симптомов пациентов с СК. В связи с отсутствием лечения СК ставится цель разработать модель этого заболевания из фибробластов больных и перепрограммировать их в мезенхимальные стволовые клетки. Этот подход позволит создать биобанк стволовых клеток, специфичный для KS, что позволит идентифицировать общие нарушения, вызванные потерей функции (LoF) KMT2D. Будет описано влияние KMT2D LoF на транскрипцию, а также на эпигенетические механизмы, активируемые во время дифференцировки MSC. Наконец, будет оценен терапевтический потенциал подхода «редактирования» эпигенома для увеличения экспрессии дикого аллеля KMT2D для восстановления функциональной активности MLL4 в обработанных МСК.

Вторичная цель — оценить способность возвращаться к норме после лечения генной терапией CRISPR/Case9 на клетках пациентов.

Методология (дизайн исследования, популяция, описание групп (если применимо), критерии включения, невключение, основные и второстепенные критерии суждения, количество субъектов, которые должны быть включены, статистический анализ...):

Начиная с первичных клеток, выделенных от больных пациентов, будет разработана модель заболевания in vitro. Будет принят интегративный, но альтернативный стратегический подход к получению мезенхимальных стволовых клеток, полученных от пациентов, для определения нормальной и аномальной транскрипции и эпигенетических цепей во время KMT2D LoF. Путем объединения потенциала автономного обновления МСК с технологией CRISPR/Cas9 будет разработан подход к «редактированию» эпигенома в терапевтических целях для восстановления активности MLL4.

Этот проект станет шагом вперед в понимании молекулярных механизмов, ответственных за саркому. Модель in vitro предоставит научному сообществу экспериментальную систему для изучения СК. Наконец, цель состоит в том, чтобы определить молекулярную основу СК и разработать терапевтическую стратегию для улучшения некоторых симптомов у пациентов с СК.

Процесс (количество посещений, продолжительность включений, продолжительность наблюдения):

Будут включены 8 человек: 4 пациента с синдромом Кабуки, подтвержденным молекулярно-генетическим исследованием гена KMT2D.

4 родителя того же пола, что и пациент

Выполнимость:

В отделении клинической генетики университетской больницы Монпелье наблюдается более 40 пациентов с синдромом Кабуки.

Воздействие/перспективы:

Выявление последствий мутаций в гене KMT2D для изменений эпигенетических меток и клеточных структурных изменений, а также попытка коррекции генов с помощью CRISPR/Cas9 позволит лучше понять заболевание (и гены, которые дерегулируются пост-KMT2D). эпигенетические изменения), а также откроет перспективный путь для генной терапии методом CRISPR/Cas9.