Az epigenom szerkesztés kihasználása Kabuki-szindrómában: új út a ritka genetikai rendellenességek génterápiája felé (Epi-KAB)

Fő és másodlagos célok:

A fő cél az ML-mutációk KS-ben betöltött patológiás szerepének tanulmányozása, hogy megkönnyítsék a KS-ben szenvedő betegek tüneteinek javítását célzó terápiás stratégiák azonosítását és jellemzését. A kezelés hiánya miatt a KS-ben a cél az, hogy a betegek fibroblasztjaiból modellt dolgozzanak ki a betegségre, és átprogramozzák őket mesenchymális őssejtekké. Ez a megközelítés egy KS-specifikus őssejt biobankot hoz létre, amely lehetővé teszi a KMT2D funkcióvesztése (LoF) által okozott gyakori zavarok azonosítását. Leírjuk a KMT2D LoF hatását a transzkripcióra, valamint az MSC differenciálódás során aktiválódó epigenetikai mechanizmusokat. Végül értékelni fogják egy epigenom "szerkesztési" megközelítés terápiás potenciálját a vad KMT2D allél expressziójának növelésére az MLL4 funkcionális aktivitásának helyreállítása érdekében a kezelt MSC-kben.

A másodlagos cél annak értékelése, hogy a betegek sejtjein a CRISPR/Case9 génterápiás kezelés után képesek-e visszatérni a normális szintre.

Módszertan (tervezési tanulmány, sokaság, csoportok leírása (adott esetben), felvételi kritériumok, be nem vétel, fő és másodlagos megítélési kritériumok, a bevonandó alanyok száma, statisztikai elemzés...):

Az érintett betegekből izolált primer sejtekből kiindulva a betegség in vitro modelljét fejlesztik ki. Integratív, de alternatív stratégiai megközelítést alkalmaznak a betegekből származó mezenchimális őssejtek beszerzésére, hogy meghatározzák a normál és abnormális transzkripciót és epigenetikai áramköröket a KMT2D LoF során. Az MSC-k autonóm megújulási potenciáljának és a CRISPR/Cas9 technológiának a kombinálásával az epigenom terápiás célú "szerkesztésének" megközelítése az MLL4 aktivitás helyreállítása érdekében.

Ez a projekt előrelépést jelent a KS-ért felelős molekuláris mechanizmusok megértésében. Az in vitro modell kísérleti rendszert biztosít a tudományos közösség számára a KS tanulmányozására. Végül a cél a KS molekuláris alapjainak meghatározása és terápiás stratégia kidolgozása a KS-ben szenvedő betegek bizonyos tüneteinek javítására.

Folyamat (látogatások száma, befogadások időtartama, nyomon követés időtartama):

8 fő kerül bele: 4 Kabuki-szindrómás beteg, akit a KMT2D gén molekuláris genetikai vizsgálata hitelesített.

4, a beteggel azonos nemű szülő

Megvalósíthatóság:

A Montpellier Egyetemi Kórház klinikai genetikai osztályán több mint 40 Kabuki-szindrómás beteget követnek nyomon.

Hatások / kilátások:

A KMT2D gén mutációinak az epigenetikai jelek változásaira és a sejtszerkezeti változásokra gyakorolt ​​következményeinek azonosítása, valamint a CRISPR/Cas9 általi génkorrekciós kísérlet jobb megértést tesz lehetővé a betegségről (és a poszt-KMT2D által deregulált génekről). epigenetikai változások), és ígéretes utat nyit a CRISPR/Cas9 módszerrel végzett génterápia számára is.