Sfruttare l'editing dell'epigenoma nella sindrome di Kabuki: un nuovo percorso verso la terapia genica per i disturbi genetici rari (Epi-KAB)

Obiettivi principali e secondari:

L'obiettivo principale è studiare il ruolo patologico delle mutazioni ML in KS per facilitare l'identificazione e la caratterizzazione di strategie terapeutiche per migliorare i sintomi dei pazienti con KS. A causa della mancanza di trattamento nel KS, l'obiettivo è sviluppare un modello di questa malattia dai fibroblasti dei pazienti e riprogrammarli in cellule staminali mesenchimali. Questo approccio genererà una biobanca di cellule staminali specifica per KS, consentendo l'identificazione di disturbi comuni causati dalla perdita di funzione (LoF) di KMT2D. Verrà descritto l'impatto del KMT2D LoF sulla trascrizione ma anche i meccanismi epigenetici attivati ​​durante il differenziamento delle MSC. Infine, sarà valutato il potenziale terapeutico di un approccio di "editing" dell'epigenoma per aumentare l'espressione dell'allele selvaggio KMT2D per ripristinare l'attività funzionale di MLL4 nelle MSC trattate.

L'obiettivo secondario è valutare la capacità di tornare alla normalità dopo il trattamento di terapia genica CRISPR/Case9 sulle cellule dei pazienti

Metodologia (studio di progettazione, popolazione, descrizione dei gruppi (se applicabile), criteri di inclusione, non inclusione, criteri di giudizio principali e secondari, numero di soggetti da includere, analisi statistica...) :

Partendo da cellule primarie isolate da pazienti affetti, verrà sviluppato un modello in vitro della malattia. Verrà adottato un approccio strategico integrativo ma alternativo per ottenere cellule staminali mesenchimali derivate da pazienti per definire trascrizione normale e anormale e circuiti epigenetici durante KMT2D LoF. Combinando il potenziale di rinnovamento autonomo delle MSC con la tecnologia CRISPR/Cas9, sarà sviluppato un approccio alla "modifica" dell'epigenoma a fini terapeutici per ripristinare l'attività MLL4.

Questo progetto rappresenterà un passo avanti nella comprensione dei meccanismi molecolari responsabili del KS. Il modello in vitro fornirà alla comunità scientifica un sistema sperimentale per studiare il KS. Infine, l'obiettivo è definire le basi molecolari del SK e sviluppare una strategia terapeutica per migliorare alcuni sintomi nei pazienti con SK.

Processo (numero di visite, durata delle inclusioni, durata del follow-up):

Saranno incluse 8 persone: 4 pazienti con sindrome di Kabuki autenticati dallo studio di genetica molecolare del gene KMT2D.

4 genitori dello stesso sesso del paziente

Fattibilità :

Nel dipartimento di genetica clinica dell'Ospedale Universitario di Montpellier vengono seguiti più di 40 pazienti con sindrome di Kabuki.

Impatti / prospettive:

L'identificazione delle conseguenze delle mutazioni nel gene KMT2D sui cambiamenti del segno epigenetico e sui cambiamenti strutturali cellulari, nonché il tentativo di correzione genica da parte di CRISPR/Cas9 forniranno una migliore comprensione della malattia (e dei geni che sono deregolati dal post-KMT2D cambiamenti epigenetici) e aprirà anche una strada promettente per la terapia genica mediante il metodo CRISPR/Cas9.