Exploiting Epigenome Editing in Kabuki Syndrome: a New Route Towards Gen Therapy for Rare Genetic Disorders (Epi-KAB)

Haupt- und Nebenziele:

Das Hauptziel ist die Untersuchung der pathologischen Rolle von ML-Mutationen bei KS, um die Identifizierung und Charakterisierung von therapeutischen Strategien zur Verbesserung der Symptome von Patienten mit KS zu erleichtern. Aufgrund der fehlenden Behandlung in der KS soll aus Fibroblasten von Patienten ein Modell dieser Erkrankung entwickelt und in mesenchymale Stammzellen umprogrammiert werden. Dieser Ansatz wird eine KS-spezifische Stammzellen-Biobank generieren, die die Identifizierung häufiger Störungen ermöglicht, die durch den Funktionsverlust (LoF) von KMT2D verursacht werden. Der Einfluss des KMT2D LoF auf die Transkription, aber auch die epigenetischen Mechanismen, die während der MSC-Differenzierung aktiviert werden, werden beschrieben. Schließlich wird das therapeutische Potenzial eines „Epigenom-Editing“-Ansatzes zur Erhöhung der Expression des wilden KMT2D-Allels zur Wiederherstellung der funktionellen Aktivität von MLL4 in behandelten MSCs bewertet.

Das sekundäre Ziel ist die Bewertung der Fähigkeit, nach einer CRISPR/Case9-Gentherapiebehandlung an Patientenzellen zur Normalität zurückzukehren

Methodik (Studiendesign, Population, Beschreibung der Gruppen (falls zutreffend), Einschlusskriterien, Nichteinschluss, Haupt- und sekundäre Beurteilungskriterien, Anzahl der einzuschließenden Probanden, statistische Analyse...):

Ausgehend von Primärzellen, die von betroffenen Patienten isoliert wurden, wird ein In-vitro-Modell der Krankheit entwickelt. Ein integrativer, aber alternativer Strategieansatz zur Gewinnung von mesenchymalen Stammzellen, die von Patienten stammen, um normale und abnormale Transkription und epigenetische Schaltkreise während KMT2D LoF zu definieren, wird angenommen. Durch die Kombination des autonomen Erneuerungspotenzials von MSCs mit der CRISPR/Cas9-Technologie wird ein Ansatz zur „Bearbeitung“ des Epigenoms für therapeutische Zwecke zur Wiederherstellung der MLL4-Aktivität entwickelt.

Dieses Projekt wird einen Schritt nach vorn beim Verständnis der für KS verantwortlichen molekularen Mechanismen darstellen. Das In-vitro-Modell wird der wissenschaftlichen Gemeinschaft ein experimentelles System zur Untersuchung von KS zur Verfügung stellen. Schließlich ist das Ziel, die molekularen Grundlagen von KS zu definieren und eine therapeutische Strategie zu entwickeln, um bestimmte Symptome bei Patienten mit KS zu verbessern.

Prozess (Anzahl der Besuche, Dauer der Einschlüsse, Dauer der Nachbereitung):

8 Personen werden eingeschlossen: 4 Patienten mit Kabuki-Syndrom, die durch die molekulargenetische Untersuchung des KMT2D-Gens authentifiziert wurden.

4 Eltern des gleichen Geschlechts wie der Patient

Durchführbarkeit :

In der Abteilung für klinische Genetik des Universitätskrankenhauses Montpellier werden mehr als 40 Patienten mit Kabuki-Syndrom nachbeobachtet.

Auswirkungen / Perspektiven :

Die Identifizierung der Folgen von Mutationen im KMT2D-Gen auf epigenetische Markierungsveränderungen und zelluläre Strukturveränderungen sowie der Versuch einer Genkorrektur durch CRISPR/Cas9 werden ein besseres Verständnis der Krankheit (und der Gene, die durch Post-KMT2D dereguliert werden) liefern epigenetische Veränderungen) und wird auch einen vielversprechenden Weg für die Gentherapie durch die CRISPR/Cas9-Methode eröffnen.