Udnyttelse af epigenomredigering i Kabuki-syndrom: en ny vej mod genterapi for sjældne genetiske lidelser (Epi-KAB)

Hoved- og sekundære mål:

Hovedformålet er at studere den patologiske rolle af ML-mutationer i KS for at lette identifikation og karakterisering af terapeutiske strategier til at forbedre symptomerne hos patienter med KS. På grund af den manglende behandling i KS er målet at udvikle en model af denne sygdom ud fra fibroblaster fra patienter og omprogrammere dem til mesenkymale stamceller. Denne tilgang vil generere en KS-specifik stamcellebiobank, der muliggør identifikation af almindelige forstyrrelser forårsaget af funktionstab (LoF) af KMT2D. Virkningen af ​​KMT2D LoF på transkription, men også de epigenetiske mekanismer aktiveret under MSC differentiering vil blive beskrevet. Endelig vil det terapeutiske potentiale af en epigenom "redigering" tilgang til at øge ekspressionen af ​​den vilde KMT2D allel for at genoprette den funktionelle aktivitet af MLL4 i behandlede MSC'er blive evalueret.

Det sekundære mål er at evaluere evnen til at vende tilbage til normal efter CRISPR/Case9 genterapibehandling på patienters celler

Metode (designundersøgelse, population, beskrivelse af grupper (hvis relevant), inklusionskriterier, ikke-inkludering, primære og sekundære vurderingskriterier, antal emner, der skal inkluderes, statistisk analyse...):

Med udgangspunkt i primære celler isoleret fra berørte patienter vil der blive udviklet en in vitro-model af sygdommen. En integrativ, men alternativ strategitilgang til at opnå mesenkymale stamceller afledt fra patienter for at definere normal og unormal transkription og epigenetiske kredsløb under KMT2D LoF vil blive vedtaget. Ved at kombinere MSC'ers autonome fornyelsespotentiale med CRISPR/Cas9-teknologi vil der blive udviklet en tilgang til at "redigere" epigenomet til terapeutiske formål for at genoprette MLL4-aktivitet.

Dette projekt vil repræsentere et skridt fremad i forståelsen af ​​de molekylære mekanismer, der er ansvarlige for KS. In vitro-modellen vil give det videnskabelige samfund et eksperimentelt system til at studere KS. Endelig er målet at definere det molekylære grundlag for KS og udvikle en terapeutisk strategi til at forbedre visse symptomer hos patienter med KS.

Proces (antal besøg, varighed af inklusioner, varighed af opfølgning):

8 personer vil blive inkluderet: 4 patienter med Kabuki syndrom autentificeret af den molekylære genetik undersøgelse af KMT2D genet.

4 forældre af samme køn som patienten

Gennemførlighed:

I den kliniske genetikafdeling på Montpellier Universitetshospital følges mere end 40 patienter med Kabuki syndrom.

Påvirkninger / udsigter:

Identifikationen af ​​konsekvenserne af mutationer i KMT2D-genet på epigenetiske mærkeændringer og cellulære strukturelle ændringer samt forsøget på genkorrektion med CRISPR/Cas9 vil give en bedre forståelse af sygdommen (og de gener, der er dereguleret af post-KMT2D epigenetiske ændringer) og vil også åbne en lovende vej for genterapi ved CRISPR/Cas9-metoden.