Stanovení DNA bez cirkulace jako nástroj k predikci kolorektálního karcinomu u subjektů s pozitivním fekálním imunotestem. (DEPLR)

Kolorektální karcinom (CRC): je jedním z nejčastějších nádorů s téměř 42 152 novými případy odhadovanými ve Francii pro rok 2012. Incidence je tak ve Francii 30 nových případů ročně na 100 000 obyvatel. Je také významnou příčinou úmrtí, s 10 úmrtími ročně na 100 000 obyvatel. Více než 8 pacientů z 10 je vyléčeno pouze chirurgickým zákrokem v případě odhalení časné formy s extenzí tumoru omezenou na stěnu tlustého střeva a bez invaze proximálních lymfatických uzlin. Protože většině invazivních rakovin předchází benigní prekancerózní léze zvaná adenom, je dobře známo, že detekce těchto adenomů (a zejména těch s vysokým rizikem vzniku rakoviny: adenomy větší než 10 mm nebo adenomy u těžké dysplazie) následuje jejich endoskopickou excizí (polypektomie cestou kolonoskopie) mohou zabránit rozvoji invazivního CRC a v konečném důsledku zlepšit přežití takto zjištěné populace. Právě možnost zasáhnout na této sekvenci adenomakanceru v asymptomatické fázi onemocnění je základem nabídky screeningu KRK. Screening CRC: Existují 3 úrovně rizika rozvoje CRC: střední, vysoké nebo velmi vysoké. Pro každou úroveň rizika jsou učiněna vhodná následná doporučení střední riziko rozvoje CRC, subjekty starší 50 let. Tito ohrožení pacienti jsou také nejpočetnější. Právě oni se podílejí na screeningu na okultní krev ve stolici. U středně rizikových subjektů byly doporučeny dvě metody screeningu, levostranná rektosigmoidoskopie a opakované testy na okultní krvácení ve stolici metodou Gaiac. Tato druhá metoda se rychle stala v Evropě referenční metodou pro screening CRC z důvodu nákladů a dostupnosti péče. Zdá se však, že jde o metodu, která není pacienty příliš oceňována (manipulace s několika vzorky stolice) a která není příliš citlivá a která může interagovat i s hemoglobinem živočišného původu. Tyto nevýhody vedly k zájmu o další metody screeningu okultní krve ve stolici, jako jsou imunologické metody. Imunologické testy pro testy na okultní krvácení ve stolici se objevily v posledních letech a rychle se etablovaly jako srovnávací testy v Evropě a poté ve Francii (OC Sensor test) jako součást hromadného screeningu. Stručně řečeno, 2 holandské randomizované studie ukázaly, že imunoanalýza OC Sensor má lepší screeningový výkon a přijatelnost než test Gaiac. Celkově různé studie ukázaly, že imunologické testy vedou k většímu počtu CRC a pokročilejší neoplazii než test Gaiac. Podle studií se míra pozitivity u imunotestů pohybovala od 3 % do 6 %, pozitivní prediktivní hodnota pokročilé neoplazie byla u OC Sensor asi 45 % a u invazivního karcinomu 7 %. Fekální imunotest OC Sensor je tedy referenčním screeningovým testem jako součást organizovaného screeningu subjektů se středním rizikem CRC. V případě pozitivního imunologického testu je nutné systematicky zorganizovat diagnostickou kolonoskopii, aby bylo možné charakterizovat možnou rektokolickou příčinu takto pozorovaného trávicího krvácení. Kolonoskopie identifikuje lézi a provedené biopsie přesně identifikují pokročilou povahu neoplazie (adenom > 10 mm nebo adenom u těžké dysplazie nebo invazivního karcinomu) či nikoli. Kolonoskopie je dokonale kontrolovaný lékařský výkon prováděný v anestezii.

Může však výjimečně způsobit krvácení, perforaci tlustého střeva, silné bolesti břicha, zvláště pokud je endoskopický výkon spojen s intervenčním výkonem, jako je biopsie nebo polypektomie. Praxe kolonoskopie je ročně zodpovědná za 3 nehody na 1000 provedených kolonoskopií, což vede k 1 operaci na 1000 kolonoskopií a bohužel k 1 úmrtí na každých 10 000 kolonoskopií. Protože se kolonoskopie provádí v narkóze, nutí to pacienta jeden den nepřítomnost v práci a vyzvat třetí osobu k návratu domů. A konečně, i když je kolonoskopie nejcitlivějším a nejspecifičtějším testem pro diagnostiku adenomů a CRC, její diagnostický výkon není absolutní: kompletní vyšetření tlustého střeva je možné pouze v 95 % případů. Kolonoskopii chybí zejména 5 % adenomů větších než 1 cm a 4 % karcinomů tlustého střeva pravého tlustého střeva. Kolonoskopie také něco stojí. Jakýkoli neinvazivní test schopný stanovit diagnózu invazivní rakoviny nebo vyřadit stejnou diagnózu rakoviny po pozitivním imunologickém fekálním screeningovém testu by tedy byl schopen snížit použití diagnostické kolonoskopie a tím i rizika a související omezení. Měření DNA přítomné v cirkulující krvi (cirkulující DNA nebo cfDNA): umožnilo významný pokrok v personalizované léčbě rakoviny jako neinvazivní test schopný produkovat diagnostický, prognostický, teranostický a terapeutický typ následného sledování. Týmy IRCM v Montpellier vyvinuly test nazvaný IntPlex®, který je schopen umožnit multiparametrickou analýzu této cfDNA.

Tato inovativní technologie byla patentována a technicky a klinicky ověřena na velké skupině pacientů s různými typy rakoviny a pro několik typů genetických mutací. Stručně řečeno, tato technologie Intplex® umožňuje současné stanovení pěti parametrů měření a charakterizace cfDNA: celková koncentrace cfDNA, fragmentace, detekce bodové mutace, koncentrace mutantní cfDNA a mutační zátěž.

Plazmatické koncentrace cfDNA u pacientů s CRC jsou významně vyšší než u zdravých jedinců. Tyto koncentrace se progresivně snižují u pacientů v remisi, zatímco u pacientů se zvyšují evolučně nebo v případě recidivy. Toto opatření se také ukazuje jako vynikající nástroj k rozlišení pacientů s metastatickým CRC od pacientů s pejorativnější prognózou. Cílem práce je měření koncentrace cfDNA u osob podstupujících kolonoskopii z důvodu pozitivního imunologického fekálního testu.