Ocena DNA wolnego od krążenia jako narzędzie do przewidywania raka jelita grubego u osób z pozytywnym testem immunologicznym w kale. (DEPLR)

Rak jelita grubego (CRC): jest jednym z najczęstszych nowotworów, z niemal 42152 nowymi przypadkami we Francji szacowanymi na 2012 rok. Zapadalność wynosi zatem 30 nowych przypadków rocznie na 100 000 mieszkańców we Francji. Jest to również istotna przyczyna zgonów, z 10 zgonami rocznie na 100 000 mieszkańców. Ponad 8 na 10 pacjentów zostaje wyleczonych wyłącznie chirurgicznie w przypadku wykrycia wczesnej postaci z naciekaniem guza ograniczonego do ściany okrężnicy i brakiem naciekania proksymalnych węzłów chłonnych. Ponieważ większość raków inwazyjnych poprzedzona jest łagodną zmianą przedrakową zwaną gruczolakiem, dobrze wiadomo, że wykrycie tych gruczolaków (a zwłaszcza gruczolaków o wysokim ryzyku zachorowania na raka: gruczolaków większych niż 10 mm lub gruczolaków w ciężkiej dysplazji) następuje po poprzez ich endoskopowe wycięcie (polipektomia przez kolonoskopię) może zapobiec rozwojowi inwazyjnego CRC i ostatecznie poprawić przeżywalność wykrytej w ten sposób populacji. Właśnie możliwość interwencji w tej sekwencji gruczolakoraka w bezobjawowej fazie choroby jest podstawą oferty badań przesiewowych w kierunku CRC. Badanie przesiewowe CRC: Istnieją 3 poziomy ryzyka rozwoju CRC: umiarkowane, wysokie lub bardzo wysokie. Dla każdego poziomu ryzyka opracowywane są odpowiednie zalecenia dotyczące dalszych działań umiarkowane ryzyko rozwoju CRC, osoby w wieku powyżej 50 lat. Ci zagrożeni pacjenci są również najliczniejsi. To oni są zaangażowani w badania przesiewowe na obecność krwi utajonej w kale. Osobom o umiarkowanym ryzyku zalecono dwie metody skriningu: lewostronną recto-sigmoidoskopię oraz powtórne badanie kału na krew utajoną metodą Gaiac. Ta ostatnia metoda szybko stała się w Europie metodą referencyjną w badaniach przesiewowych CRC ze względu na koszty i dostęp do opieki. Wydaje się jednak, że jest to metoda mało doceniana przez pacjentów (manipulowanie kilkoma próbkami kału) i mało czuła, a także mogąca wchodzić w interakcje z hemoglobiną pochodzenia zwierzęcego. Te wady spowodowały zainteresowanie innymi metodami skriningu krwi utajonej w kale, takimi jak metody immunologiczne. Testy immunologiczne na krew utajoną w kale pojawiły się w ostatnich latach i szybko stały się testami wzorcowymi w Europie, a następnie we Francji (test OC Sensor) jako część masowych badań przesiewowych. W skrócie, 2 holenderskie randomizowane badania wykazały, że test immunologiczny OC Sensor miał lepszą skuteczność przesiewową i akceptowalność niż test Gaiac. Ogólnie rzecz biorąc, różne badania wykazały, że testy immunologiczne prowadzą do większej liczby CRC i bardziej zaawansowanej neoplazji niż test Gaiac. Zgodnie z badaniami wskaźnik dodatnich wyników w testach immunologicznych wynosił od 3% do 6%, dodatnia wartość predykcyjna zaawansowanej neoplazji wynosiła około 45% w przypadku czujnika OC, a inwazyjnego raka 7%. Zatem test immunologiczny kału OC Sensor jest referencyjnym testem przesiewowym, jako część zorganizowanego badania przesiewowego osób z umiarkowanym ryzykiem CRC. W przypadku pozytywnego wyniku testu immunologicznego należy systematycznie wykonywać kolonoskopię diagnostyczną w celu scharakteryzowania możliwej przyczyny odbytniczo-okrężniczej obserwowanego w ten sposób krwawienia z przewodu pokarmowego. Kolonoskopia identyfikuje zmianę, a następnie wykonane biopsje dokładnie określają zaawansowany charakter (gruczolak > 10 mm lub gruczolak w ciężkiej dysplazji lub raku inwazyjnym) lub nie. Kolonoskopia to doskonale kontrolowany zabieg medyczny wykonywany w znieczuleniu.

Może jednak wyjątkowo spowodować krwawienie, perforację jelita grubego, silny ból brzucha, zwłaszcza gdy czynność endoskopowa jest połączona z czynnością interwencyjną, taką jak biopsja lub polipektomia. Praktyka kolonoskopii rocznie odpowiada za 3 wypadki na 1000 wykonanych kolonoskopii, co prowadzi do 1 operacji na 1000 kolonoskopii i niestety do 1 śmierci na 10 000 kolonoskopii. Ponieważ kolonoskopia wykonywana jest w znieczuleniu, zmusza to pacjenta do nieobecności w pracy na jeden dzień, wezwania osoby trzeciej do powrotu do domu. Wreszcie, chociaż kolonoskopia jest najbardziej czułym i swoistym badaniem w diagnostyce gruczolaków i CRC, jej skuteczność diagnostyczna nie jest absolutna: pełna eksploracja jelita grubego jest możliwa tylko w 95% przypadków. Kolonoskopii brakuje w szczególności 5% gruczolaków powyżej 1 cm i 4% raków okrężnicy prawej. Kolonoskopia też kosztuje. Zatem każdy nieinwazyjny test zdolny do postawienia diagnozy raka inwazyjnego lub odrzucenia tej samej diagnozy raka po pozytywnym immunologicznym teście przesiewowym kału byłby w stanie zmniejszyć zastosowanie diagnostycznej kolonoskopii, a tym samym ryzyko i związane z tym ograniczenia. Pomiar DNA obecnego we krwi krążącej (krążącego DNA lub cfDNA): umożliwił znaczący postęp w spersonalizowanym leczeniu nowotworów, jako nieinwazyjny test zdolny do uzyskania diagnostycznych, prognostycznych, teranostycznych i terapeutycznych obserwacji. Zespoły IRCM z Montpellier opracowały test o nazwie IntPlex®, który umożliwia wieloparametryczną analizę tego cfDNA.

Ta innowacyjna technologia została opatentowana i sprawdzona pod względem technicznym i klinicznym na dużych kohortach pacjentów z różnymi typami raka i kilkoma rodzajami mutacji genetycznych. W skrócie, ta technologia Intplex® umożliwia jednoczesne określenie pięciu parametrów pomiaru i charakteryzacji cfDNA: całkowite stężenie cfDNA, fragmentacja, wykrywanie mutacji punktowych, stężenie zmutowanego cfDNA i ładunek mutacji.

Stężenia cfDNA w osoczu u pacjentów z CRC są istotnie wyższe niż u osób zdrowych. Stężenia te zmniejszają się stopniowo u pacjentów w remisji, podczas gdy u pacjentów zwiększają się ewolucyjnie lub w przypadku nawrotu. Miara ta okazuje się również doskonałym narzędziem do odróżnienia pacjentów z przerzutowym CRC od pacjentów z bardziej pejoratywnym rokowaniem. Celem pracy jest oznaczenie stężenia cfDNA u osób poddawanych kolonoskopii z powodu dodatniego wyniku testu immunologicznego w kale.