ERT u Pompeho choroby: objasnění molekulárních struktur přispívajících k vychytávání enzymů a imunoreaktivitě

Enzymová substituční terapie (ERT) s rekombinantní lidskou GAA (rhGAA = alglukosidáza alfa) je dostupná od roku 2006 a byla prokázána jako účinná u IOPD a LOPD; odpověď na léčbu je však proměnlivá a nedokonalá. To podnítilo vývoj rhGAA nové generace se zvýšenou glykosylací a zlepšeným vychytáváním svalovými buňkami (avalglukosidáza alfa). Účinnost ERT významně závisí na stavu glykosylace enzymu určujícího vychytávání svalovými buňkami přes receptor manóza-6-fosfátu (M6P) a na tvorbě protilátek namířených proti rekombinantnímu enzymu. Vliv imunologických faktorů na účinnost je zvýrazněn výskytem vysokých trvalých titrů protilátek (HSAT) u pacientů s IOPD, kteří neprodukují vůbec žádnou GAA (CRIM-negativní), což vede k horšímu výsledku podobnému jako u neléčených pacientů, pokud nemají imunomodulační účinek. podává se lék. Taková HSAT se také může objevit u pacientů s IOPD syntetizujících nefunkční GAA (CRIM-pozitivní) au některých pacientů s Pompeho chorobou s pozdním nástupem (LOPD).

V první části této studie se výzkumníci zaměřují na charakterizaci molekulární struktury divokého typu GAA a zejména mutovaných variant GAA s HSAT a bez HSAT, aby zjistili, jak mutace zhoršuje příjem GAA do buňky prostřednictvím receptoru M6P. . Aby toho bylo dosaženo, bude studováno 5 zdravých subjektů a 45 pacientů s Pompeho chorobou (15 IOPD a 30 LOPD). Výzkumníci budou identifikovat protilátkové epitopy v séru pacientů s rhGAA protilátkami a určovat a kvantitativně porovnávat jejich vazebné afinity pomocí kombinace proteolytické afinitní-hmotnostní spektrometrie a povrchové plazmonové rezonanční biosenzorové analýzy. Výzkumníci se domnívají, že specifické mutace mohou ovlivnit stav epitopu odlišně. V souvislosti s tím výzkumníci také spekulují, že glykosylace a zbytky M6P by mohly modifikovat epitopy v jejich těsné blízkosti. Tyto výsledky pomohou pochopit, kde se nacházejí epitopy vázající protilátky.

Ve druhé části studie se výzkumníci snaží zjistit, na které epitopy se protilátky vážou a na které ne. K dosažení tohoto budou epitopové peptidy syntetizovány a chemicky modifikovány, aby účinně blokovaly protilátky namířené proti terapeutickému enzymu. Očekává se, že aplikace peptidů epitopu GAA s vysokou afinitou schopných vázat neutralizační protilátky potenciálně zlepší účinnost a bezpečnost ERT, a tím poskytne nový cílený a personalizovaný imunotoleranční přístup.