TRE na Doença de Pompe: Elucidação de Estruturas Moleculares que Contribuem para a Captação de Enzimas e Imunorreatividade

A terapia de reposição enzimática (TRE) com GAA humano recombinante (rhGAA = alglucosidase alfa) está disponível desde 2006 e tem se mostrado eficaz em IOPD e LOPD; no entanto, a resposta ao tratamento é variável e imperfeita. Isso levou ao desenvolvimento de um rhGAA de última geração com maior glicosilação e melhor captação de células musculares (avalglucosidase alfa). A eficácia da TRE depende significativamente do estado de glicosilação da enzima que determina a captação das células musculares através do receptor de manose-6-fosfato (M6P) e da formação de anticorpos dirigidos contra a enzima recombinante. O impacto dos fatores imunológicos na eficácia é destacado pela ocorrência de altos títulos sustentados de anticorpos (HSAT) em pacientes com IOPD que não produzem GAA (CRIM-negativo), que resultam em um resultado pior semelhante ao de pacientes não tratados, se não houver imunomodulação medicação é dada. Tal HSAT também pode ocorrer em pacientes com IOPD sintetizando um GAA não funcional (CRIM-positivo) e em alguns pacientes com doença de Pompe de início tardio (LOPD).

Na primeira parte deste estudo, os investigadores pretendem caracterizar a estrutura molecular do GAA do tipo selvagem e, em particular, das variantes do GAA mutado com e sem HSAT, a fim de aprender como a mutação prejudica a captação do GAA na célula através do receptor M6P . Para isso, serão estudados 5 indivíduos saudáveis ​​e 45 pacientes com doença de Pompe (15 IOPD e 30 LOPD). Os investigadores identificarão epítopos de anticorpos nos soros de pacientes com anticorpos rhGAA e determinarão e compararão quantitativamente suas afinidades de ligação, usando uma combinação de espectrometria de massa de afinidade proteolítica e análise de biossensor de ressonância de plasmon de superfície. Os investigadores argumentam que mutações específicas podem afetar o status do epítopo de maneira diferente. Relacionado a isso, os pesquisadores também especulam que glicosilações e resíduos M6P poderiam modificar epítopos em sua vizinhança próxima. Esses resultados ajudarão a entender onde os epítopos de ligação do anticorpo estão localizados.

Na segunda parte do estudo, os investigadores pretendem saber a que epítopos os anticorpos se ligam e a quais não. Para isso, os peptídeos epítopos serão sintetizados e modificados quimicamente, a fim de bloquear efetivamente os anticorpos direcionados contra a enzima terapêutica. Espera-se que a aplicação de peptídeos de epítopo GAA de alta afinidade capazes de se ligar a anticorpos neutralizantes melhore potencialmente a eficácia e a segurança da ERT, fornecendo assim uma nova abordagem de imunotolerância direcionada e personalizada.