ERT nella malattia di Pompe: chiarimento delle strutture molecolari che contribuiscono all'assorbimento degli enzimi e all'immunoreattività

La terapia enzimatica sostitutiva (ERT) con GAA umano ricombinante (rhGAA = alglucosidasi alfa) è disponibile dal 2006 e si è dimostrata efficace nella IOP e nella LOPD; tuttavia la risposta al trattamento è variabile e imperfetta. Ciò ha portato allo sviluppo di un rhGAA di nuova generazione con una maggiore glicosilazione e un migliore assorbimento da parte delle cellule muscolari (avalglucosidasi alfa). L'efficacia dell'ERT dipende in modo significativo dallo stato di glicosilazione dell'enzima che determina l'assorbimento da parte delle cellule muscolari attraverso il recettore del mannosio-6-fosfato (M6P) e dalla formazione di anticorpi diretti contro l'enzima ricombinante. L'impatto dei fattori immunologici sull'efficacia è evidenziato dalla presenza di elevati titoli anticorpali sostenuti (HSAT) nei pazienti con IOPD che non producono affatto GAA (CRIM-negativi), che si traducono in un esito peggiore simile a quello dei pazienti non trattati, se non immunomodulanti viene somministrato il farmaco. Tale HSAT può verificarsi anche nei pazienti con IOPD che sintetizzano un GAA non funzionale (CRIM-positivo) e in alcuni pazienti con Malattia di Pompe a esordio tardivo (LOPD).

Nella prima parte di questo studio, i ricercatori mirano a caratterizzare la struttura molecolare del GAA wildtype e, in particolare, delle varianti GAA mutate con e senza HSAT, al fine di apprendere come la mutazione comprometta l'assorbimento di GAA nella cellula tramite il recettore M6P . Per raggiungere questo obiettivo, saranno studiati 5 soggetti sani e 45 pazienti con malattia di Pompe (15 IOPD e 30 LOPD). I ricercatori identificheranno gli epitopi anticorpali nei sieri di pazienti con anticorpi rhGAA e determineranno e confronteranno quantitativamente le loro affinità di legame, utilizzando una combinazione di spettrometria di massa di affinità proteolitica e analisi del biosensore di risonanza plasmonica di superficie. Gli investigatori sostengono che specifiche mutazioni possono influenzare lo stato dell'epitopo in modo diverso. In relazione a questo, i ricercatori ipotizzano anche che le glicosilazioni e i residui di M6P potrebbero modificare gli epitopi nelle loro immediate vicinanze. Questi risultati aiuteranno a capire dove si trovano gli epitopi di legame degli anticorpi.

Nella seconda parte dello studio i ricercatori mirano a sapere a quali epitopi gli anticorpi si legano ea quali no. Per fare questo i peptidi epitopi saranno sintetizzati e modificati chimicamente, in modo da bloccare efficacemente gli anticorpi diretti contro l'enzima terapeutico. L'applicazione di peptidi epitopi GAA ad alta affinità in grado di legare gli anticorpi neutralizzanti dovrebbe potenzialmente migliorare l'efficacia e la sicurezza dell'ERT, fornendo così un nuovo approccio di immunotolleranza mirato e personalizzato.