ERT en la enfermedad de Pompe: elucidación de las estructuras moleculares que contribuyen a la captación de enzimas y la inmunorreactividad

La terapia de reemplazo enzimático (ERT) con GAA humana recombinante (rhGAA = alglucosidasa alfa) está disponible desde 2006 y ha demostrado ser eficaz en IOPD y LOPD; sin embargo, la respuesta al tratamiento es variable e imperfecta. Esto ha impulsado el desarrollo de una rhGAA de próxima generación con mayor glicosilación y mejor captación de células musculares (avalglucosidasa alfa). La eficacia de ERT depende significativamente del estado de glicosilación de la enzima que determina la captación de células musculares a través del receptor de manosa-6-fosfato (M6P) y de la formación de anticuerpos dirigidos contra la enzima recombinante. El impacto de los factores inmunológicos sobre la eficacia se destaca por la aparición de títulos de anticuerpos sostenidos elevados (HSAT) en pacientes con IOPD que no producen GAA en absoluto (CRIM-negativos), que dan como resultado un peor resultado similar al de los pacientes no tratados, si no hay inmunomoduladores. se da medicamento. Tal HSAT también puede ocurrir en pacientes con IOPD que sintetizan un GAA no funcional (CRIM-positivo) y en algunos pacientes con enfermedad de Pompe de aparición tardía (LOPD).

En la primera parte de este estudio, los investigadores tienen como objetivo caracterizar la estructura molecular de GAA de tipo salvaje y, en particular, de las variantes de GAA mutadas con y sin HSAT, para aprender cómo la mutación afecta la absorción de GAA en la célula a través del receptor M6P. . Para ello se estudiarán 5 sujetos sanos y 45 pacientes con enfermedad de Pompe (15 IOPD y 30 LOPD). Los investigadores identificarán epítopos de anticuerpos en el suero de pacientes con anticuerpos rhGAA y determinarán y compararán cuantitativamente sus afinidades de unión mediante el uso de una combinación de espectrometría de masas de afinidad proteolítica y análisis de biosensores de resonancia de plasmones de superficie. Los investigadores razonan que mutaciones específicas pueden afectar el estado del epítopo de manera diferente. En relación con esto, los investigadores también especulan que las glicosilaciones y los residuos de M6P podrían modificar los epítopos en sus inmediaciones. Estos resultados ayudarán a comprender dónde se encuentran los epítopos de unión a anticuerpos.

En la segunda parte del estudio, los investigadores pretenden saber a qué epítopos se unen los anticuerpos y a cuáles no. Para lograr esto, los péptidos del epítopo se sintetizarán y modificarán químicamente para bloquear eficazmente los anticuerpos dirigidos contra la enzima terapéutica. Se espera que la aplicación de péptidos de epítopo GAA de alta afinidad capaces de unirse a anticuerpos neutralizantes mejore potencialmente la eficacia y la seguridad de ERT, proporcionando así un nuevo enfoque de inmunotolerancia dirigido y personalizado.