Účinky LiveSpo X-secret v podpůrné léčbě pohlavně přenosných chorob

Sexuálně přenosné infekce (STI) jsou běžné gynekologické infekce po celém světě, zejména v tropických a nerozvinutých zemích, kde až tři čtvrtiny populace trpí pohlavně přenosnými chorobami, zejména v reprodukčním věku. Míra infekce v regionech a zemích je různá, míra infekce v rozvojových zemích je 20krát vyšší než ve vyspělých zemích. Jen jihovýchodní Asie má asi 150,5 milionu lidí s těmito nemocemi. Vietnam se nachází v tropech a horké a vlhké podnebí jsou příznivé faktory pro rozvoj mikrobiálních patogenů. Podle zpráv z dermatologických jednotek provincií je každý rok nakaženo pohlavně přenosnými chorobami asi 300 000 lidí...Existuje mnoho mikrobiálních patogenů způsobujících infekce včetně bakterií, virů, hub a prvoků...Pacient může být infikován více patogenů současně. To je ve veřejné zdravotní péči velmi znepokojující, protože STI mají často mírné nebo žádné příznaky, takže je lze snadno přehlédnout. Zatímco antibiotika nebo antifungální léky se typicky používají k léčbě STI způsobených bakteriálními nebo plísňovými agens, jako jsou chlamydie, kapavka a kandida, pro většinu virových STI neexistuje žádná specifická léčba. Použití širokospektrých antibiotik však může vést k vedlejším účinkům, jako je ztráta chuti k jídlu, únava a sexuální problémy, zatímco opakovaná léčba může vést ke vzniku rezistence na antibiotika, což představuje významnou výzvu pro léčbu STI na celém světě. Probiotika jsou mikroorganismy, které jsou prospěšné našemu zdraví, jsou-li konzumovány v přiměřeném množství a hrají zásadní roli při udržování zdravé rovnováhy bakterií v našem těle, zejména ve střevech a vaginálních oblastech. Studie zjistily, že probiotika mohou pomoci snížit výskyt a závažnost vaginálních infekcí, včetně bakteriální vaginózy a kvasinkových infekcí. V současné době jsou studována perorální nebo vaginální čípková probiotika obsahující kmeny Bifidobacterium nebo Lactobacillus jako potenciální doplňková terapie pro léčbu vaginálních infekcí. Tyto kmeny však mají nízkou schopnost přežití a jsou citlivé na světlo, vlhkost a úroveň pH, ​​což ztěžuje uchování. Jejich účinnost tedy závisí na konkrétních použitých kmenech a dávce potřebné k dosažení kolonizace ve vaginálním traktu. Bacillus je dobře prostudovaný probiotický kmen s více než 350 000 výzkumnými publikacemi po celém světě a jeho bezpečnost byla rozsáhle zkoumána. Bacillus subtilis, B. clausii a B. coagulans jsou všechny aerobní nebo fakultativní anaerobní bakterie schopné tvorby spor a mohou tolerovat drsné podmínky, jako je nedostatek živin, anoxie, sucho a dokonce antibiotika. Zde výzkumníci navrhují, že vaginální sprejová probiotika obsahující kmeny Bacillus by mohla být bezpečnou a účinnou symptomatickou léčbou STI způsobených virovými, houbovými nebo bakteriálními patogeny, což představuje slibnou alternativu k tradiční antibiotické terapii.

Cílem bylo prozkoumat symptomatické léčebné účinky probiotického přípravku LiveSpo X-secret jako tekuté suspenzní formy obsahující spory Bacillus bezpečných kmenů B. subtilis ANA4, B. clausii ANA39, B. coagulans ANA 40 u pohlavně přenosných žen. infekce a výzkumníci vyhodnocení zlepšené účinnosti a zkrácení doby léčby klinických příznaků a měření změn v zátěži patogeny ve vaginálních vzorcích před léčbou (den 0) a po 3, 7, 14 a 28 dnech pomocí LiveSpo X-secret.

Metody: Provádí se randomizovaná, slepá a kontrolovaná klinická studie. Po informovaném souhlasu budou pacienti vyšetřeni na devět běžných patogenů STI ve Vietnamu, včetně Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Human alphaherpesvirus typu 1 a 2, Candida albicans, Trichomonas vaginalis. Celkem 100 pacientů pozitivních na alespoň jednu z devíti STI bude randomizováno do 2 skupin (n = 50/skupina): kontrolní skupina (nazvaná "kontrolní" skupina) používá 0,9% NaCl fyziologický roztok a experimentální skupina (nazvaná "X" skupina -secret") užívat probiotika LiveSpo X-secret. Pacientovi je podán kódovaný sprej ve formě slepého vzorku, aby byla zajištěna objektivita studie. Klinické sledování bude v časovém bodě 0, 3, 7, 14 a 28 dnů, vaginální vzorky budou odebrány ve dnech 0, 3, 7, 14 a 28, aby se vyhodnotilo potenciální snížení zátěže patogeny a změnit mikrobiom ve vaginální flóře.

PCR v reálném čase pro detekci mikroorganismů ve vaginálních vzorcích: semikvantitativní testy pro měření změn v zátěži patogeny se provádějí pomocí testu PCR v reálném čase, který byl optimalizován a vyvinut výzkumným týmem (Bui et al., 2023). Detekce užitečných kmenů Bacillus náležejících k B. subtilis, B. clausii a B. coagulans se provádí pomocí testu PCR SYBR Green v reálném čase, který se běžně provádí také ve Spobiotic Research Center, Hanoi, Vietnam.

Analýza vaginálního mikrobiomu 16S rRNA pomocí sekvenování nové generace (NGS) v Macrogene (Seoul, Korea) na Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA) s použitím konfigurace běhu 2 × 250 bp.

Během léčby jsou pacientky sledovány na typické klinické příznaky gynekologických infekcí, včetně svědění, zápachu, vaginální barvy a pH z vaginálních vzorků kontrolních a X-secret skupin v časových bodech 3., 7., 14. a 28. den. Zdravotní stav pacientů sledují lékaři a sestry a jejich údaje jsou vyplněny do zdravotnické dokumentace při následných návštěvách pacienta nebo telefonických pohovorech.

Sběr dat a statistická analýza: shromažďují se jednotlivé lékařské záznamy a poté se shromažďují a systematizují informace o pacientovi do souboru dat. Bezpečnost a účinnost LiveSpo X-secret jsou hodnoceny a porovnávány s 0,9% NaCl fyziologickým roztokem na základě následujících klinických a subklinických kritérií získaných v X-secret a kontrolních skupinách: (i) den zmírňující příznaky a úroveň symptomů úleva; (ii) úrovně snížení (2^△Ct) zátěže patogeny △Ct pro cílové geny se vypočítá jako Ct (prahový cyklus) v den 3/7/14/28 - Ct v den 0, zatímco Ct vnitřní kontroly je upraveno na být stejné mezi všemi vzorky; (iii) změnit mikrobiom ve vaginální flóře.

Tabulková analýza se provádí na dichotomických proměnných pomocí χ2 testu nebo Fisherova exaktního testu, když je očekávaná hodnota kterékoli buňky nižší než pět. Spojité proměnné se porovnávají buď pomocí Wilcoxonova testu, t-testu nebo Mann-Whitneyho testu, pokud data nejsou normálně distribuována. Statistické a grafické analýzy se provádějí na softwaru GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Hladina významnosti všech analýz je nastavena na p < 0,05. P-hodnoty.

Očekávané výsledky: (i) LiveSpo X-secret zmírňuje příznaky chřipkové infekce asi o 30 % účinněji, jak uvádí 90 % pacientů používajících LiveSpo X-secret (skupina X-secret) je bez příznaků v den 3-28 intervence v závislosti na symptomech ve srovnání s 60 % pacientů v kontrolní skupině; (ii) Pacienti ve skupině X-secret mají významnější snížení zátěže patogeny (>10krát) než pacienti v kontrolní skupině v časovém bodě 3., 7., 14., 28. dne intervence.