Effekter af LiveSpo X-secret til støtte for behandling af seksuelt overførte sygdomme

Seksuelt overførte infektioner (STI'er) er almindelige gynækologiske infektioner verden over, især i tropiske og underudviklede lande, hvor op til tre fjerdedele af befolkningen har kønssygdomme, hovedsageligt i den reproduktive alder. Infektionsraten i regioner og lande er anderledes, infektionsraten i udviklingslande er 20 gange højere end i udviklede lande. Alene Sydøstasien har omkring 150,5 millioner mennesker med disse sygdomme. Vietnam ligger i troperne, og varmt og fugtigt klima er gunstige faktorer for udvikling af mikrobielle patogener. Ifølge rapporter fra de dermatologiske enheder i provinserne bliver omkring 300.000 mennesker hvert år smittet med seksuelt overførte sygdomme...Der er mange mikrobielle patogener, der forårsager infektioner, herunder bakterier, vira, svampe og protozoer...Patienten kan blive inficeret med flere patogener på samme tid. Dette er et spørgsmål til stor bekymring i det offentlige sundhedsvæsen, fordi kønssygdomme ofte har milde eller ingen symptomer, så de let overses. Mens antibiotika eller svampedræbende lægemidler typisk bruges til at behandle STI'er forårsaget af bakterielle eller svampemidler som Chlamydia, Gonoré og Candida, findes der ingen specifik behandling for de fleste virale STI'er. Brugen af ​​bredspektrede antibiotika kan dog resultere i bivirkninger som tab af appetit, træthed og seksuelle problemer, mens gentagne behandlinger kan føre til fremkomsten af ​​antibiotikaresistens, hvilket udgør en betydelig udfordring for STI-behandling på verdensplan. Probiotika er mikroorganismer, der er gavnlige for vores helbred, når de indtages i tilstrækkelige mængder, og spiller en afgørende rolle i at opretholde en sund balance mellem bakterier i vores krop, især i tarm- og vaginalområder. Undersøgelser har fundet ud af, at probiotika kan hjælpe med at reducere forekomsten og sværhedsgraden af ​​vaginale infektioner, herunder bakteriel vaginose og gærinfektioner. I øjeblikket undersøges orale eller vaginale stikpillersprobiotika indeholdende stammer af Bifidobacterium eller Lactobacillus som en potentiel komplementær terapi til behandling af vaginale infektioner. Disse stammer har imidlertid lav overlevelsesevne og er følsomme over for lys, fugt og pH-niveauer, hvilket gør konservering udfordrende. Deres effektivitet afhænger således af de specifikke anvendte stammer og den dosis, der kræves for at opnå kolonisering i vaginalkanalen. Bacillus er en velundersøgt probiotisk stamme med over 350.000 forskningspublikationer verden over, og dens sikkerhed er blevet grundigt undersøgt. Bacillus subtilis, B. clausii og B. coagulans er alle aerobe eller fakultative anaerobe bakterier, der er i stand til sporedannelse og kan tolerere barske tilstande såsom mangel på næringsstoffer, anoxi, tørke og endda antibiotika. Her foreslår efterforskere, at vaginal-spraying af probiotika indeholdende Bacillus-stammer kunne være en sikker og effektiv symptomatisk behandling af seksuelt overførte sygdomme forårsaget af virale, svampe eller bakterielle patogener, hvilket giver et lovende alternativ til traditionel antibiotikabehandling.

Formålet var at undersøge de symptomatiske behandlingseffekter af det probiotiske produkt LiveSpo X-secret som en flydende suspensionsform indeholdende Bacillus-sporer af sikre B. subtilis ANA4-, B. clausii ANA39-, B. coagulans ANA 40-stammer hos kvinder med seksuelt overførte infektion og efterforskers evaluering af forbedret effekt og reducerede kliniske symptomer behandlingstid og måling af ændringer i patogenbelastning i vaginale prøver før behandling (dag 0) og efter 3, 7, 14 og 28 dage ved brug af LiveSpo X-secret.

Metoder: Der udføres et randomiseret, blindt og kontrolleret klinisk forsøg. Efter informeret samtykke vil patienter blive screenet for almindelige ni STI-patogener i Vietnam, herunder Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Human alphaherpesvirus type 1 og 2, Candida albicans, Trichomonas vaginalis. I alt 100 patienter, der er positive med mindst en af ​​ni STI'er, vil blive randomiseret i 2 grupper (n = 50/gruppe): kontrolgruppen (kaldet "Kontrol"-gruppen) bruger 0,9 % NaCl fysiologisk saltvand og en eksperimentel gruppe (navnet "X" -secret" gruppe) bruge probiotika LiveSpo X-secret. Patienten får en kodet spray i form af en blindprøve for at sikre undersøgelsens objektivitet. Den kliniske opfølgning vil være på tidspunktet 0, 3, 7, 14 og 28 dage, vaginale prøver vil blive indsamlet på dag 0, 3, 7, 14 og dag 28 for at evaluere potentielle reduktioner i patogenbelastning og ændre mikrobiomet i skedefloraen.

Real-time PCR til påvisning af mikroorganismer i vaginale prøver: semikvantitative assays til måling af ændringer i patogenbelastning udføres af real-time PCR-assayet, som er blevet optimeret og udviklet af forskerholdet (Bui et al., 2023). Påvisning af nyttige Bacillus-stammer, der tilhører B. subtilis, B. clausii og B. coagulans, udføres ved real-time PCR SYBR Green-assay, der rutinemæssigt også udføres på Spobiotic Research Center, Hanoi, Vietnam

Analyse af vaginalt mikrobiom 16S rRNA ved hjælp af næste generations sekventering (NGS) ved Macrogene (Seoul, Korea) på Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA) ved hjælp af en 2 × 250 bp kørselskonfiguration.

Under behandlingen overvåges patienterne for typiske kliniske symptomer på gynækologiske infektioner, herunder kløe, lugt, vaginal farve og pH fra vaginale prøver af kontrol- og X-secret-grupper på tidspunkterne dag 3, 7, 14 og dag 28. Patienternes helbredsforhold observeres af læger og sygeplejersker, og deres oplysninger udfyldes i journaler ved patientens opfølgningsbesøg eller telefonsamtaler.

Dataindsamling og statistisk analyse: individuelle journaler indsamles, og patientens informationer samles derefter og systematiseres i et datasæt. Sikkerheden og effekten af ​​LiveSpo X-secret evalueres og sammenlignes med 0,9 % NaCl fysiologisk saltvand baseret på følgende kliniske og subkliniske kriterier opnået i X-secret- og kontrolgrupper: (i) den symptomatisk lindrende dag og symptomniveau lettelse; (ii) reduktionsniveauerne (2^△Ct) af patogenbelastning △Ct for målgener beregnes som Ct (tærskelcyklus) på dag 3/7/14/28 - Ct på ​​dag 0, mens Ct for intern kontrol justeres til være ens blandt alle prøver; (iii) ændre mikrobiomet i vaginal flora.

Den tabelformede analyse udføres på dikotome variable ved hjælp af χ2-testen eller Fishers eksakte test, når den forventede værdi af en celle er under fem. Kontinuerlige variable sammenlignes ved hjælp af enten Wilcoxon-testen, t-testen eller Mann-Whitney-testen, når data ikke er normalfordelt. Statistiske og grafiske analyser udføres på GraphPad Prism v8.4.3 software (GraphPad Software, CA, USA). Signifikansniveauet for alle analyser er sat til p < 0,05. P-værdier.

Forventede resultater: (i) LiveSpo X-secret lindrer influenzainfektionssymptomer omkring 30 % mere effektivt, som angivet af 90 % af patienter, der bruger LiveSpo X-secret (X-secret-gruppe), er symptomfrie på dag 3-28 af interventionen afhængig af symptomer sammenlignet med 60 % af patienterne i kontrolgruppen; (ii) Patienter i X-hemmelig gruppe har mere signifikante reduktioner i patogenbelastningen (>10 gange) end patienter i kontrolgruppen på tidspunktet for dag 3, 7, 14, 28 for intervention.