Efeitos do LiveSpo X-secret no apoio ao tratamento de doenças sexualmente transmissíveis

As Infecções Sexualmente Transmissíveis (ISTs) são infecções ginecológicas comuns em todo o mundo, especialmente em países tropicais e subdesenvolvidos, onde até três quartos da população tem ISTs, principalmente na idade reprodutiva. A taxa de infecção em regiões e países é diferente, a taxa de infecção nos países em desenvolvimento é 20 vezes maior do que nos países desenvolvidos. Somente o Sudeste Asiático tem cerca de 150,5 milhões de pessoas com essas doenças. O Vietnã está localizado nos trópicos e os climas quentes e úmidos são fatores favoráveis ​​para o desenvolvimento de patógenos microbianos. De acordo com relatórios das unidades de dermatologia das províncias, todos os anos cerca de 300.000 pessoas são infectadas com doenças sexualmente transmissíveis... Existem muitos patógenos microbianos que causam infecções, incluindo bactérias, vírus, fungos e protozoários... O paciente pode ser infectado com vários patógenos ao mesmo tempo. Esta é uma questão de grande preocupação na saúde pública porque as DSTs geralmente apresentam sintomas leves ou inexistentes, portanto, são facilmente ignoradas. Embora antibióticos ou antifúngicos sejam normalmente usados ​​para tratar DSTs causadas por agentes bacterianos ou fúngicos, como clamídia, gonorreia e Candida, não existe tratamento específico para a maioria das DSTs virais. No entanto, o uso de antibióticos de amplo espectro pode resultar em efeitos colaterais como perda de apetite, fadiga e problemas sexuais, enquanto tratamentos repetidos podem levar ao surgimento de resistência a antibióticos, representando um desafio significativo para o tratamento de IST em todo o mundo. Os probióticos são microrganismos benéficos para a nossa saúde quando consumidos em quantidades adequadas, desempenhando um papel vital na manutenção de um equilíbrio saudável de bactérias no nosso corpo, especialmente nas áreas intestinal e vaginal. Estudos descobriram que os probióticos podem ajudar a reduzir a incidência e a gravidade das infecções vaginais, incluindo vaginose bacteriana e infecções fúngicas. Atualmente, probióticos supositórios orais ou vaginais contendo cepas de Bifidobacterium ou Lactobacillus estão sendo estudados como uma potencial terapia complementar para o tratamento de infecções vaginais. No entanto, essas cepas têm baixa capacidade de sobrevivência e são sensíveis à luz, umidade e níveis de pH, tornando a preservação um desafio. Assim, sua eficácia depende das cepas específicas utilizadas e da dose necessária para atingir a colonização no trato vaginal. Bacillus é uma cepa probiótica bem estudada com mais de 350.000 publicações de pesquisa em todo o mundo, e sua segurança foi extensivamente investigada. Bacillus subtilis, B. clausii e B. coagulans são bactérias aeróbicas ou anaeróbicas facultativas capazes de formar esporos e tolerar condições adversas, como privação de nutrientes, anóxia, seca e até mesmo antibióticos. Aqui, os investigadores propõem que os probióticos de pulverização vaginal contendo cepas de Bacillus podem ser um tratamento sintomático seguro e eficaz para DSTs causadas por patógenos virais, fúngicos ou bacterianos, fornecendo uma alternativa promissora à terapia antibiótica tradicional.

O objetivo foi investigar os efeitos do tratamento sintomático do produto probiótico LiveSpo X-secret como uma forma de suspensão líquida contendo esporos de Bacillus das cepas seguras de B. subtilis ANA4, B. clausii ANA39, B. coagulans ANA 40, em mulheres com transmissão sexual infecção e avaliação dos investigadores da eficácia aprimorada e redução dos sintomas clínicos, tempo de tratamento e medição das alterações na carga de patógenos nas amostras vaginais antes do tratamento (dia 0) e após 3, 7, 14 e 28 dias usando LiveSpo X-secret.

Métodos: É realizado um ensaio clínico randomizado, cego e controlado. Após o consentimento informado, os pacientes serão rastreados para nove patógenos de DST comuns no Vietnã, incluindo Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Alphaherpesvirus humano tipo 1 e 2, Candida albicans, Trichomonas vaginalis. Totalmente 100 pacientes positivos com pelo menos uma das nove DSTs serão randomizados em 2 grupos (n = 50/grupo): o grupo controle (chamado de grupo "Controle") usa 0,9% de solução salina NaCl fisiológica e um grupo experimental (chamado de "X -secret") use os probióticos LiveSpo X-secret. O paciente recebe um spray codificado na forma de uma amostra cega para garantir a objetividade do estudo. O acompanhamento clínico será no ponto de tempo de 0, 3, 7, 14 e 28 dias, amostras vaginais serão coletadas nos dias 0, 3, 7, 14 e dia 28 para avaliar possíveis reduções na carga de patógenos e alterar o microbioma da flora vaginal.

PCR em tempo real para detecção de microorganismos em amostras vaginais: ensaios semiquantitativos para medir mudanças na carga de patógenos são conduzidos pelo ensaio de PCR em tempo real que foi otimizado e desenvolvido pela equipe de pesquisa (Bui et al., 2023). A detecção de cepas úteis de Bacillus pertencentes a B. subtilis, B. clausii e B. coagulans é realizada por PCR em tempo real SYBR Green ensaio que é executado rotineiramente também conduzido no Spobiotic Research Center, Hanói, Vietnã

Análise do rRNA 16S do microbioma vaginal usando sequenciamento de próxima geração (NGS) na Macrogene (Seul, Coréia) no Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, EUA) usando uma configuração de execução de 2 × 250 pb.

Durante o tratamento, as pacientes são monitoradas quanto a sintomas clínicos típicos de infecções ginecológicas, incluindo coceira, odor, cor vaginal e pH de amostras vaginais dos grupos Controle e Segredo-X nos dias 3, 7, 14 e 28. As condições de saúde dos pacientes são observadas por médicos e enfermeiras, e suas informações são registradas em prontuários nas consultas de acompanhamento ou por telefone.

Coleta de dados e análise estatística: são coletados prontuários individuais e as informações do paciente são reunidas e sistematizadas em um banco de dados. A segurança e a eficácia do LiveSpo X-secret são avaliadas e comparadas com solução salina fisiológica de NaCl a 0,9% com base nos seguintes critérios clínicos e subclínicos obtidos nos grupos X-secret e Controle: (i) o dia de alívio sintomático e o nível dos sintomas alívio; (ii) os níveis de redução (2^△Ct) da carga de patógenos △Ct para genes alvo são calculados como Ct (ciclo limiar) no dia 3/7/14/28 - Ct no dia 0 enquanto o Ct do controle interno é ajustado para ser igual entre todas as amostras; (iii) alterar o microbioma da flora vaginal.

A análise tabular é realizada em variáveis ​​dicotômicas usando o teste χ2 ou o teste exato de Fisher quando o valor esperado de qualquer célula é inferior a cinco. As variáveis ​​contínuas são comparadas usando o teste de Wilcoxon, teste t ou o teste de Mann-Whitney quando os dados não são normalmente distribuídos. As análises estatísticas e gráficas são realizadas no software GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, EUA). O nível de significância de todas as análises é definido em p < 0,05. Valores P.

Resultados esperados: (i) LiveSpo X-secret alivia os sintomas de infecção por influenza com cerca de 30% mais eficácia, conforme indicado por 90% dos pacientes que usam LiveSpo X-secret (grupo X-secret) sem sintomas no dia 3-28 da intervenção dependendo dos sintomas, em comparação com 60% dos pacientes do grupo Controle; (ii) Os pacientes no grupo X-secret têm reduções mais significativas na carga de patógenos (> 10 vezes) do que os pacientes no grupo Controle no ponto temporal do dia 3, 7, 14, 28 da intervenção.