Efectos de LiveSpo X-secret en el apoyo al tratamiento de enfermedades de transmisión sexual

Las Infecciones de Transmisión Sexual (ITS) son infecciones ginecológicas comunes en todo el mundo, especialmente en países tropicales y subdesarrollados donde hasta las tres cuartas partes de la población tiene ITS, principalmente en edad reproductiva. La tasa de infección en regiones y países es diferente, la tasa de infección en los países en desarrollo es 20 veces mayor que en los países desarrollados. Solo el sudeste asiático tiene alrededor de 150,5 millones de personas con estas enfermedades. Vietnam está ubicado en los trópicos, y los climas cálidos y húmedos son factores favorables para el desarrollo de patógenos microbianos. Según los informes de las unidades de dermatología de las provincias, cada año cerca de 300.000 personas se infectan con enfermedades de transmisión sexual... Hay muchos patógenos microbianos que causan infecciones como bacterias, virus, hongos y protozoos... El paciente puede infectarse con múltiples patógenos al mismo tiempo. Este es un tema de gran preocupación en la atención de la salud pública porque las ITS a menudo tienen síntomas leves o no presentan síntomas, por lo que se pasan por alto fácilmente. Si bien los antibióticos o los medicamentos antimicóticos se usan típicamente para tratar las ITS causadas por agentes bacterianos o fúngicos como la clamidia, la gonorrea y la cándida, no existe un tratamiento específico para la mayoría de las ITS virales. Sin embargo, el uso de antibióticos de amplio espectro puede provocar efectos secundarios como pérdida de apetito, fatiga y problemas sexuales, mientras que los tratamientos repetidos pueden provocar la aparición de resistencia a los antibióticos, lo que representa un desafío importante para el tratamiento de las ITS en todo el mundo. Los probióticos son microorganismos que son beneficiosos para nuestra salud cuando se consumen en cantidades adecuadas, desempeñando un papel vital en el mantenimiento de un equilibrio saludable de bacterias en nuestro cuerpo, especialmente en el intestino y la zona vaginal. Los estudios han encontrado que los probióticos pueden ayudar a reducir la incidencia y la gravedad de las infecciones vaginales, incluidas la vaginosis bacteriana y las infecciones por hongos. En la actualidad, se están estudiando probióticos de ovulos orales o vaginales que contienen cepas de Bifidobacterium o Lactobacillus como una posible terapia complementaria para el tratamiento de infecciones vaginales. Sin embargo, estas cepas tienen una baja capacidad de supervivencia y son sensibles a la luz, la humedad y los niveles de pH, lo que dificulta la conservación. Por lo tanto, su eficacia depende de las cepas específicas utilizadas y la dosis requerida para lograr la colonización en el tracto vaginal. Bacillus es una cepa probiótica bien estudiada con más de 350 000 publicaciones de investigación en todo el mundo, y su seguridad ha sido ampliamente investigada. Bacillus subtilis, B. clausii y B. coagulans son bacterias aeróbicas o anaeróbicas facultativas capaces de formar esporas y pueden tolerar condiciones adversas como la privación de nutrientes, la anoxia, la sequía e incluso los antibióticos. Aquí, los investigadores proponen que los probióticos de pulverización vaginal que contienen cepas de Bacillus podrían ser un tratamiento sintomático seguro y eficaz para las ITS causadas por patógenos virales, fúngicos o bacterianos, proporcionando una alternativa prometedora a la terapia antibiótica tradicional.

El objetivo fue investigar los efectos del tratamiento sintomático del producto probiótico LiveSpo X-secret en forma de suspensión líquida que contiene esporas de Bacillus de las cepas seguras B. subtilis ANA4, B. clausii ANA39, B. coagulans ANA 40, en mujeres con transmisión sexual. infección y evaluación de los investigadores de la eficacia mejorada y la reducción de los síntomas clínicos tiempo de tratamiento y medición de los cambios en la carga de patógenos en las muestras vaginales antes del tratamiento (día 0) y después de 3, 7, 14 y 28 días usando LiveSpo X-secret.

Métodos: Se realiza un ensayo clínico aleatorizado, ciego y controlado. Después del consentimiento informado, los pacientes serán examinados para detectar nueve patógenos comunes de ITS en Vietnam, incluidos Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Alfaherpesvirus humano tipo 1 y 2, Candida albicans, Trichomonas vaginalis. Un total de 100 pacientes positivos con al menos una de las nueve ITS se distribuirán aleatoriamente en 2 grupos (n = 50/grupo): el grupo de control (denominado grupo "Control") usa solución salina fisiológica NaCl al 0,9 % y un grupo experimental (denominado "X -secret") utilizan los probióticos LiveSpo X-secret. El paciente recibe un spray codificado en forma de muestra ciega para garantizar la objetividad del estudio. El seguimiento clínico será en el punto de tiempo de 0, 3, 7, 14 y 28 días, las muestras vaginales se recolectarán en los días 0, 3, 7, 14 y 28 para evaluar las posibles reducciones en la carga de patógenos y cambiar el microbioma en la flora vaginal.

PCR en tiempo real para la detección de microorganismos en muestras vaginales: los ensayos semicuantitativos para medir los cambios en la carga de patógenos se realizan mediante el ensayo de PCR en tiempo real que ha sido optimizado y desarrollado por el equipo de investigación (Bui et al., 2023). La detección de cepas útiles de Bacillus que pertenecen a B. subtilis, B. clausii y B. coagulans se realiza mediante el ensayo PCR SYBR Green en tiempo real que se ejecuta de forma rutinaria y también se realiza en el Spobiotic Research Center, Hanoi, Vietnam.

Análisis del ARNr 16S del microbioma vaginal usando secuenciación de próxima generación (NGS) en Macrogene (Seúl, Corea) en Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, EE. UU.) usando una configuración de ejecución de 2 × 250 pb.

Durante el tratamiento, se monitorea a las pacientes para detectar síntomas clínicos típicos de infecciones ginecológicas, que incluyen picazón, olor, color vaginal y pH de muestras vaginales de los grupos Control y X-secret en los puntos de tiempo de los días 3, 7, 14 y 28. Las condiciones de salud de los pacientes son observadas por médicos y enfermeras, y sus datos se ingresan en los registros médicos en las visitas de seguimiento del paciente o en las entrevistas telefónicas.

Recopilación de datos y análisis estadístico: se recopilan las historias clínicas individuales y luego se recopila la información del paciente y se sistematiza en un conjunto de datos. La seguridad y la eficacia de LiveSpo X-secret se evalúan y comparan con la solución salina fisiológica de NaCl al 0,9 % según los siguientes criterios clínicos y subclínicos obtenidos en los grupos X-secret y Control: (i) el día de alivio sintomático y el nivel de los síntomas alivio; (ii) los niveles de reducción (2^△Ct) de la carga de patógenos △Ct para los genes diana se calculan como Ct (ciclo de umbral) en el día 3/7/14/28 - Ct en el día 0 mientras que el Ct del control interno se ajusta a ser igual entre todas las muestras; (iii) cambiar el microbioma en la flora vaginal.

El análisis tabular se realiza sobre variables dicotómicas utilizando la prueba de χ2 o la prueba exacta de Fisher cuando el valor esperado de cualquier celda es inferior a cinco. Las variables continuas se comparan mediante la prueba de Wilcoxon, la prueba t o la prueba de Mann-Whitney cuando los datos no tienen una distribución normal. Los análisis estadísticos y gráficos se realizan en el software GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, EE. UU.). El nivel de significación de todos los análisis se establece en p < 0,05. valores de p.

Resultados esperados: (i) LiveSpo X-secret alivia los síntomas de la infección por influenza con un 30 % más de eficacia, según lo indicado por el 90 % de los pacientes que usan LiveSpo X-secret (grupo X-secret) no presentan síntomas entre los días 3 y 28 de la intervención dependiendo de los síntomas, en comparación con el 60% de los pacientes en el grupo Control; (ii) Los pacientes en el grupo X-secret tienen reducciones más significativas en la carga de patógenos (>10 veces) que los pacientes en el grupo de control en el punto de tiempo de los días 3, 7, 14, 28 de la intervención.