Effekter av LiveSpo X-secret för att stödja behandling av sexuellt överförbara sjukdomar

Sexuellt överförbara infektioner (STI) är vanliga gynekologiska infektioner över hela världen, särskilt i tropiska och underutvecklade länder där upp till tre fjärdedelar av befolkningen har sexuellt överförbara sjukdomar, främst i reproduktiv ålder. Smittfrekvensen i regioner och länder är annorlunda, infektionsfrekvensen i utvecklingsländer är 20 gånger högre än i utvecklade länder. Bara Sydostasien har cirka 150,5 miljoner människor med dessa sjukdomar. Vietnam ligger i tropikerna och varma och fuktiga klimat är gynnsamma faktorer för att mikrobiella patogener ska utvecklas. Enligt rapporter från de dermatologiska enheterna i provinserna infekteras varje år cirka 300 000 människor av sexuellt överförbara sjukdomar...Det finns många mikrobiella patogener som orsakar infektioner inklusive bakterier, virus, svampar och protozoer...Patienten kan bli infekterad med flera patogener samtidigt. Detta är en fråga av stor oro inom den offentliga hälso- och sjukvården eftersom sexuellt överförbara sjukdomar ofta har lindriga eller inga symtom, så de är lätta att förbise. Medan antibiotika eller svampdödande läkemedel vanligtvis används för att behandla sexuellt överförbara sjukdomar orsakade av bakterier eller svampmedel som klamydia, gonorré och candida, finns ingen specifik behandling för de flesta virala sexuellt överförbara sjukdomar. Användning av bredspektrumantibiotika kan dock resultera i biverkningar som aptitlöshet, trötthet och sexuella problem, medan upprepade behandlingar kan leda till uppkomsten av antibiotikaresistens, vilket utgör en betydande utmaning för STI-behandling över hela världen. Probiotika är mikroorganismer som är fördelaktiga för vår hälsa när de konsumeras i tillräckliga mängder, och som spelar en avgörande roll för att upprätthålla en hälsosam balans av bakterier i vår kropp, särskilt i tarmen och vaginalområdena. Studier har visat att probiotika kan hjälpa till att minska förekomsten och svårighetsgraden av vaginalinfektioner, inklusive bakteriell vaginos och svampinfektioner. För närvarande studeras orala eller vaginala suppositorieprobiotika innehållande stammar av Bifidobacterium eller Lactobacillus som en potentiell kompletterande terapi för att behandla vaginalinfektioner. Dessa stammar har dock låg överlevnadsförmåga och är känsliga för ljus, fukt och pH-nivåer, vilket gör bevarandet utmanande. Sålunda beror deras effektivitet på de specifika stammar som används och den dos som krävs för att uppnå kolonisering i vaginalkanalen. Bacillus är en väl studerad probiotisk stam med över 350 000 forskningspublikationer världen över, och dess säkerhet har undersökts omfattande. Bacillus subtilis, B. clausii och B. coagulans är alla aeroba eller fakultativa anaeroba bakterier som kan sporbildas och kan tolerera svåra tillstånd som näringsbrist, anoxi, torka och till och med antibiotika. Här föreslår utredare att vaginalsprayande probiotika som innehåller Bacillus-stammar kan vara en säker och effektiv symtomatisk behandling för sexuellt överförbara sjukdomar orsakade av virala, svampar eller bakteriella patogener, vilket ger ett lovande alternativ till traditionell antibiotikabehandling.

Syftet var att undersöka de symtomatiska behandlingseffekterna av den probiotiska produkten LiveSpo X-secret som en flytande suspensionsform innehållande Bacillus-sporer av säkra stammar B. subtilis ANA4, B. clausii ANA39, B. coagulans ANA 40, hos kvinnor som har sexuellt överförda infektion och utredares utvärdering av förbättrad effekt och minskade kliniska symtom behandlingstid och mätning av förändringar i patogenbelastning i vaginalproverna före behandling (dag 0) och efter 3, 7, 14 och 28 dagar med LiveSpo X-secret.

Metoder: En randomiserad, blind och kontrollerad klinisk prövning genomförs. Efter informerat samtycke kommer patienter att screenas för vanliga nio STI-patogener i Vietnam, inklusive Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Humant alphaherpesvirus typ 1 och 2, Candida albicans, Trichomonas vaginalis. Totalt 100 patienter positiva med minst en av nio sexuellt överförbara sjukdomar kommer att randomiseras i 2 grupper (n = 50/grupp): kontrollgruppen (som kallas "Kontroll"-gruppen) använder 0,9 % NaCl fysiologisk saltlösning och en experimentgrupp (benämnd "X" -secret"-gruppen) använd probiotikan LiveSpo X-secret. Patienten får en kodad spray i form av ett blindprov för att säkerställa studiens objektivitet. Den kliniska uppföljningen kommer att ske vid tidpunkten 0, 3, 7, 14 och 28 dagar, vaginalprover kommer att samlas in på dagarna 0, 3, 7, 14 och dag 28 för att utvärdera potentiella minskningar av patogenbelastning och förändra mikrobiomet i vaginalfloran.

Realtids-PCR för detektion av mikroorganismer i vaginalprover: semikvantitativa analyser för att mäta förändringar i patogenbelastningen utförs av realtids-PCR-analysen som har optimerats och utvecklats av forskargruppen (Bui et al., 2023). Detektion av användbara Bacillus-stammar som tillhör B. subtilis, B. clausii och B. coagulans utförs med realtids-PCR SYBR Green-analys som körs rutinmässigt också vid Spobiotic Research Center, Hanoi, Vietnam

Analys av vaginal mikrobiom 16S rRNA med hjälp av nästa generations sekvensering (NGS) vid Macrogene (Seoul, Korea) på Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA) med en 2 × 250 bp körkonfiguration.

Under behandlingen övervakas patienterna för typiska kliniska symtom på gynekologiska infektioner, inklusive klåda, lukt, vaginal färg och pH från vaginalprover av kontroll- och X-hemlighetsgrupper vid tidpunkterna dag 3, 7, 14 och dag 28. Patienternas hälsotillstånd observeras av läkare och sjuksköterskor och deras uppgifter fylls i journaler vid patientens uppföljningsbesök eller telefonintervjuer.

Datainsamling och statistisk analys: individuella journaler samlas in, och patientens information samlas sedan in och systematiseras i en datamängd. Säkerheten och effekten av LiveSpo X-secret utvärderas och jämförs med 0,9 % NaCl fysiologisk saltlösning baserat på följande kliniska och subkliniska kriterier som erhållits i X-secret- och kontrollgrupper: (i) den symtomlindrande dagen och symtomnivån. lättnad; (ii) reduktionsnivåerna (2^△Ct) av patogenlast △Ct för målgener beräknas som Ct (tröskelcykel) på dag 3/7/14/28 - Ct på ​​dag 0 medan Ct för intern kontroll justeras till vara lika bland alla prover; (iii) ändra mikrobiomet i vaginalfloran.

Tabellanalysen utförs på dikotoma variabler med χ2-testet eller Fishers exakta test när det förväntade värdet för en cell är under fem. Kontinuerliga variabler jämförs med antingen Wilcoxon-testet, t-testet eller Mann-Whitney-testet när data inte är normalfördelade. Statistiska och grafiska analyser utförs på programvaran GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Signifikansnivån för alla analyser är satt till p < 0,05. P-värden.

Förväntade resultat: (i) LiveSpo X-secret lindrar influensainfektionssymtom cirka 30 % mer effektivt, vilket indikeras av att 90 % av patienterna som använder LiveSpo X-secret (X-secret-grupp) är symtomfria dag 3-28 av interventionen beroende på symtom, jämfört med 60 % av patienterna i kontrollgruppen; (ii) Patienter i X-hemlig grupp har mer signifikant minskning av patogenbelastningen (>10 gånger) än patienter i kontrollgruppen vid tidpunkten för dag 3, 7, 14, 28 av interventionen.