Effetti di LiveSpo X-secret nel supporto del trattamento delle malattie sessualmente trasmissibili

Le infezioni sessualmente trasmissibili (IST) sono comuni infezioni ginecologiche in tutto il mondo, specialmente nei paesi tropicali e sottosviluppati dove fino a tre quarti della popolazione ha IST, soprattutto in età riproduttiva. Il tasso di infezione nelle regioni e nei paesi è diverso, il tasso di infezione nei paesi in via di sviluppo è 20 volte superiore rispetto ai paesi sviluppati. Il solo sud-est asiatico ha circa 150,5 milioni di persone affette da queste malattie. Il Vietnam si trova ai tropici e i climi caldi e umidi sono fattori favorevoli allo sviluppo di agenti patogeni microbici. Secondo i rapporti delle unità di dermatologia delle province, ogni anno circa 300.000 persone vengono infettate da malattie sessualmente trasmesse... Ci sono molti agenti patogeni microbici che causano infezioni tra cui batteri, virus, funghi e protozoi... Il paziente può essere infettato da più agenti patogeni contemporaneamente. Questa è una questione di grande preoccupazione nell'assistenza sanitaria pubblica perché le IST spesso hanno sintomi lievi o assenti, quindi sono facilmente trascurate. Mentre gli antibiotici o i farmaci antimicotici sono generalmente usati per trattare le IST causate da agenti batterici o fungini come la clamidia, la gonorrea e la candida, non esiste alcun trattamento specifico per la maggior parte delle IST virali. Tuttavia, l'uso di antibiotici ad ampio spettro può provocare effetti collaterali come perdita di appetito, affaticamento e problemi sessuali, mentre trattamenti ripetuti possono portare all'emergere di resistenza agli antibiotici, ponendo una sfida significativa per il trattamento delle IST in tutto il mondo. I probiotici sono microrganismi benefici per la nostra salute se consumati in quantità adeguate, svolgendo un ruolo fondamentale nel mantenere un sano equilibrio di batteri nel nostro corpo, specialmente nell'intestino e nelle aree vaginali. Gli studi hanno scoperto che i probiotici possono aiutare a ridurre l'incidenza e la gravità delle infezioni vaginali, tra cui la vaginosi batterica e le infezioni da lieviti. Attualmente, i probiotici per supposte orali o vaginali contenenti ceppi di Bifidobacterium o Lactobacillus sono allo studio come potenziale terapia complementare per il trattamento delle infezioni vaginali. Tuttavia, questi ceppi hanno una bassa capacità di sopravvivenza e sono sensibili alla luce, all'umidità e ai livelli di pH, rendendone difficile la conservazione. Pertanto, la loro efficacia dipende dai ceppi specifici utilizzati e dalla dose richiesta per ottenere la colonizzazione nel tratto vaginale. Bacillus è un ceppo probiotico ben studiato con oltre 350.000 pubblicazioni di ricerca in tutto il mondo e la sua sicurezza è stata ampiamente studiata. Bacillus subtilis, B. clausii e B. coagulans sono tutti batteri aerobi o anaerobi facoltativi in ​​grado di formare spore e possono tollerare condizioni difficili come privazione di nutrienti, anossia, siccità e persino antibiotici. Qui, i ricercatori propongono che i probiotici spray vaginali contenenti ceppi di Bacillus potrebbero essere un trattamento sintomatico sicuro ed efficace per le IST causate da agenti patogeni virali, fungini o batterici, fornendo un'alternativa promettente alla tradizionale terapia antibiotica.

L'obiettivo era quello di studiare gli effetti del trattamento sintomatico del prodotto probiotico LiveSpo X-secret come forma di sospensione liquida contenente spore di Bacillus di ceppi sicuri di B. subtilis ANA4, B. clausii ANA39, B. coagulans ANA 40, in donne con trasmissione sessuale infezione e valutazione da parte degli investigatori del miglioramento dell'efficacia e della riduzione dei sintomi clinici, tempo di trattamento e misurazione delle variazioni del carico patogeno nei campioni vaginali prima del trattamento (giorno 0) e dopo 3, 7, 14 e 28 giorni utilizzando LiveSpo X-secret.

Metodi: viene condotto uno studio clinico randomizzato, cieco e controllato. Dopo il consenso informato, i pazienti saranno sottoposti a screening per nove patogeni IST comuni in Vietnam, tra cui Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Human alphaherpesvirus di tipo 1 e 2, Candida albicans, Trichomonas vaginalis. Totalmente 100 pazienti positivi con almeno una delle nove IST saranno randomizzati in 2 gruppi (n = 50/gruppo): il gruppo di controllo (denominato gruppo "Controllo") utilizza soluzione fisiologica NaCl allo 0,9% e un gruppo sperimentale (denominato "X -secret") utilizzano i probiotici LiveSpo X-secret. Al paziente viene somministrato uno spray codificato sotto forma di campione cieco per garantire l'obiettività dello studio. Il follow-up clinico sarà al punto temporale di 0, 3, 7, 14 e 28 giorni, i campioni vaginali saranno raccolti ai giorni 0, 3, 7, 14 e 28 per valutare le potenziali riduzioni del carico di agenti patogeni e modificare il microbioma nella flora vaginale.

PCR in tempo reale per il rilevamento di microrganismi nei campioni vaginali: i test semiquantitativi per misurare i cambiamenti nel carico di agenti patogeni sono condotti dal test PCR in tempo reale che è stato ottimizzato e sviluppato dal gruppo di ricerca (Bui et al., 2023). Il rilevamento di ceppi di Bacillus utili appartenenti a B. subtilis, B. clausii e B. coagulans è condotto mediante analisi PCR SYBR Green in tempo reale che viene regolarmente eseguita anche presso il Centro di ricerca Spobiotic, Hanoi, Vietnam

Analisi del microbioma vaginale 16S rRNA utilizzando il sequenziamento di nuova generazione (NGS) presso Macrogene (Seoul, Corea) su Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA) utilizzando una configurazione di esecuzione 2 × 250 bp.

Durante il trattamento, le pazienti vengono monitorate per i sintomi clinici tipici delle infezioni ginecologiche, tra cui prurito, odore, colore vaginale e pH dai campioni vaginali dei gruppi di controllo e X-secret nei punti temporali del giorno 3, 7, 14 e giorno 28. Le condizioni di salute dei pazienti sono osservate da medici e infermieri e le loro informazioni vengono inserite nelle cartelle cliniche durante le visite di follow-up del paziente o le interviste telefoniche.

Raccolta dati e analisi statistica: vengono raccolte le cartelle cliniche individuali e le informazioni del paziente vengono quindi raccolte e sistematizzate in un set di dati. La sicurezza e l'efficacia di LiveSpo X-secret vengono valutate e confrontate con una soluzione fisiologica NaCl allo 0,9% sulla base dei seguenti criteri clinici e subclinici ottenuti nei gruppi X-secret e di controllo: (i) il giorno di sollievo dai sintomi e il livello dei sintomi sollievo; (ii) i livelli di riduzione (2^△Ct) dei patogeni caricano △Ct per i geni bersaglio è calcolato come Ct (ciclo di soglia) al giorno 3/7/14/28 - Ct al giorno 0 mentre il Ct del controllo interno è aggiustato a essere uguale tra tutti i campioni; (iii) modificare il microbioma nella flora vaginale.

L'analisi tabulare viene eseguita su variabili dicotomiche utilizzando il test χ2 o il test esatto di Fisher quando il valore atteso di qualsiasi cella è inferiore a cinque. Le variabili continue vengono confrontate utilizzando il test di Wilcoxon, il test t o il test di Mann-Whitney quando i dati non sono distribuiti normalmente. Le analisi statistiche e grafiche vengono eseguite sul software GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Il livello di significatività di tutte le analisi è fissato a p <0,05. Valori P.

Risultati attesi: (i) LiveSpo X-secret allevia i sintomi dell'infezione influenzale con circa il 30% in modo più efficace, come indicato dal 90% dei pazienti che utilizzano LiveSpo X-secret (gruppo X-secret) sono asintomatici al giorno 3-28 dell'intervento a seconda dei sintomi, rispetto al 60% dei pazienti nel gruppo di controllo; (ii) I pazienti nel gruppo X-secret hanno riduzioni più significative del carico di agenti patogeni (> 10 volte) rispetto ai pazienti nel gruppo di controllo al momento del giorno 3, 7, 14, 28 dell'intervento.