Vliv kouření na chemokiny související s makrofágem před a po nechirurgické léčbě počáteční peimplantitidy (PICF)

1. Schválení etiky a stanovení velikosti vzorku

   Studie byla schválena Komisí pro etiku klinického výzkumu na Başkent University, Ankara, Türkiye (číslo protokolu studie: D-KD24/01) v souladu s Helsinskou prohlášením z roku 1975, jak je revidováno v roce 2013.

   Analýza výkonu byla provedena pomocí softwaru GPOWER. Na základě předchozího výzkumu porovnávajícího hladiny MIP-la po ošetření před a po ošetření ve vzorcích PICF bylo požadované minimální velikost vzorku vypočteno jako 52 účastníků, s 26 účastníky v každé skupině, aby se dosáhlo síly 80% (velikost efektu F (velikost účinku F (velikost efektu F (účinek F (velikost efektu F (velikost efektu F = 0,2; Tato studie odhaduje míru předčasného ukončování školní docházky, cílem bylo najmout 63 pacientů.

2. Návrh studie

   Plánování studie, nábor pacientů, léčba a sběr vzorků byly provedeny na klinikách oddělení periodontologie, stomatologické fakulty, univerzity Gazi, Türkiye, mezi lednem 2024 a říjnem 2024. Všichni jedinci, kterým byla diagnostikována peimplantitida (krvácení pei-implantátu při sondování (BOP+) a/nebo doplňku, PPD ≥ 6 mm a radiografická úbytku kostního kostního úbytku ≥ 3 mm apikálně nejvíce koronální části intraosseózní části z Zubní implantát při jejich počáteční návštěvě na periodontologických klinikách fakulty zubní fakulty Gazi University byl vyzván, aby se studie zúčastnil.

3. Kritéria pro zařazení a vyloučení

   Kritéria pro zařazení byla: 1) ochota účastnit se studie, 2) mít dentální implantát, který byl naložen nejméně jeden rok před zahájením studie, která byla diagnostikována s peimplantitidou a která má PD 6-7 mm , 3) implantáty byly ve funkci po dobu nejméně 1 let. Kritéria pro vyloučení byla: 1) po podání periodontální terapie nebo jakékoli orální dekontaminační léčby nebo přijetí antibiotik nebo steroidů za posledních šest měsíců před zahájením studie, 2) těhotná nebo kojení, 3) je diagnostikována s revmatoidní artritidou, lupus erythematosus, lupus erythematosus, Špatně kontrolovaná systémová onemocnění (jako je diabetes nebo hypertenze), 4) s lékařskou anamnézou radiačního nebo rakovinného terapie.

4. Studijní populace

   Pro všechny účastníky na začátku byly provedeny komplexní periodontální a radiografické vyšetření zubů a dentálních implantátů. Klinické parametry na úrovni místa byly měřeny na čtyřech místech každého implantátu (mesiální, bukální, distální a lingální/palatální). Měření zahrnovala PPD (MM), BOP, viditelný index plaků (VPI) a šířka peri-implantátní keratinizované tkáně (≥ 2 mm nebo <2 mm). Byly získány peri-apikální rentgenové snímky pro měření radiografické hladiny pei-implantátu. Všechna klinická měření byla provedena pomocí periodontální sondy. Všechna měření byla provedena stejným vyšetřovatelem. Ze studie byli vyloučeni pacienti, kteří měli PPD ≥ 8 mm kolem jejich implantátů.

   Pro studii bylo přijato celkem 63 pacientů s peimplantitidou, kteří splnili kritéria pro inkluzi a vyloučení. Všichni účastníci byly poskytnuty ústní a písemné informace o povaze studie a od každého účastníka byl získán písemný informovaný souhlas. Populace studie byla později rozdělena do dvou skupin založených na kouření cigaret, které si sami hlásily. Kuřáci byli jedinci, kteří hlásili kouření alespoň jedné cigarety denně po dobu nejméně jednoho roku (pacienti s kouřením peimplantitidy (SPI), n = 30), zatímco nikdy kuřáci byli jednotlivci, kteří nikdy nepoužívali tabák v žádné formě (nekuřák Pacienti s peimplantitidou (NSPI), n = 33).

5. Peri-implantátní a periodontální léčba

   Všichni pacienti v obou skupinách dostávali nechirurgické periodontální ošetření plné ústy pomocí sterilních ultrazvukových scarerů (ultrazvukový škálový násada Woodpecker Piezo Cavitron (HW-5L), EMS, Švýcarsko)), Currets (LSH6-H7, Osung MND, Korea) a Sterilní zavlažování fyziologického roztoku. Nepurgická léčba pei-implantitidy zahrnovala debridement tvrdých a měkkých akumulací na površích implantátu pomocí titanových kyret (titanový implantát Scaler 204SD, Hu-Friedy) po dobu 15 minut, následované zavlažováním se sterilním solným roztokem. Infiltrační anestezie byla použita, pokud je pacienta vyžádána. Přizpůsobené pokyny pro ústní hygienu byly poskytnuty všem účastníkům po léčbě. Po 2 měsících (8 týdnů) dostali pacienti výzvu k kontrolní návštěvě, včetně supragigiviálního debridementu a pokynů pro ústní hygienu. Všechna klinická a radiografická měření byla opakována 4 měsíce po dokončení jejich nechirurgické léčby peimimplantátem.

6. Vzorky sběru vzorků PICF byly odebrány od všech účastníků dříve (T0) a 4 měsíce po (T1) peiMplantátovi neprurgické ošetření. Byl použit 30sekundový vzorkovací protokol. Před odběrem vzorkování byla plocha vzorku izolována bavlněnými rohlíky a sušena pomocí jemného proudu vzduchu. Z každé kapsy implantátu byl shromážděn jediný vzorek PICF pomocí periopaperových proužků (Oralflow Inc., New York, USA). Tyto papírové proužky byly umístěny 1-2 mm pod štěrbinou kapsy a udržovány přesně 30 sekund. Pro minimalizaci odpařování bylo provedeno kvantifikace objemu ihned po odběru vzorkování pomocí zařízení Periotron 8000 (Oralflow Inc., New York, USA). Periotron 8000 byl kalibrován před zahájením studie a pravidelně rekalibrován. Po kvantifikaci objemu PICF byl každý papírový pás umístěn do suché trubice Eppendorf. Vzorky byly skladovány při -80 ° C, dokud nebyly přeneseny v suchém ledu na University of Turku, institut pro stomatologii ve Finsku pro biochemické analýzy.
7. Analýza biomarkerů

Každý vzorek PICF byl eluován ve 200 ul fosfátově pufrovaného fyziologického roztoku (PBS) obsahujícího 0,5% hovězího sérového albuminu. Trubky byly poté odstředěny při 10 000 g při 4 ° C po dobu 10 minut. Koncentrace CCL-2, CCL-8, CCL-3 a CXCL-9 byly detekovány pomocí Luminex® 200 ™ pomocí souprav pro multiplexní imunoanalýzu (Bio-Plex Pro ™ Human Chemokine Testys, Bio-Rad Laboratories, Kalifornie, USA) podle doporučení výrobce. Koncentrace (PG/ml) byly převedeny na množství mediátoru shromážděného po 30 sekundách (PG/30 s). Dolní limity kvantifikace (LLOQ) pro každý chemokin byly následující: 0,3 pg/ml pro CCL-2, 0,03 pg/ml pro CCL-8, 0,4 pg/ml pro CCL-3 a 1,8 pg/ml pro CXCL-- 9.

8. Statistická analýza

Analýza dat byla provedena pomocí statistik IBM SPSS (verze 29.0 pro Windows; IBM Corp). Normalita výsledků byla vyhodnocena testem Shapiro-Wilk. Skupinové rozdíly v kategorických proměnných byly hodnoceny pomocí Pearsonova testu chí-kvadrátu, zatímco věkové rozdělení mezi skupinami bylo porovnáno pomocí nezávislého t-testu vzorků. Test Mann-Whitney U byl použit pro porovnání klinických a biochemických výsledků mezi skupinami. Pro porovnání základní linie (T0) a 4měsíční pooperační (T1) výsledky biochemických a klinických proměnných v každé skupině byl použit test podpisovaného hodnoty Wilcoxon. Analýza opakovaných měření testu rozptylu (kontrolovaná na věk) byla použita k určení, zda existuje rozdíl v účinnosti léčby v průběhu času. Logaritmické konverze (log10) byly aplikovány na hladiny chemokinů (PG/30 s) před analýzou opakovaných měření testu rozptylu. Hodnota p <0,05 byla považována za statisticky významnou pro všechny parametry. Pro výpočet koncentrací chemokinů v PICF byl použit čtyřparametrový logistický regresní model. CCL-2 byl detekován ve všech vzorcích, zatímco CCL-8 byl pod hranicí detekce (LOD) v 77 vzorcích (T0: 55%, T1: 85%), CCL-3 ve 30 vzorcích (T0: 15%, T1 : 40%) a CXCL-9 ve 26 vzorcích (T0: 15%, T1: 34%). V popisných analýzách byl CCL-8 z důvodu vysokého počtu chybějících údajů vyloučen ze statistických srovnání, zatímco koncentrace CCL-3 a CXCL-9 pod regresní křivkou byly nahrazeny hodnotou rovnající se polovině jejich nejnižšího omezení kvantifikace (( LOD/2)