Effekt af rygning på makrofagrelaterede kemokiner før og efter ikke-kirurgisk behandling af indledende peri-implantitis (PICF)

1. Etikgodkendelse og bestemmelse af prøvestørrelse

   Undersøgelsen blev godkendt af Clinical Research Ethics Committee fra Başkent University, Ankara, Türkiye (studieprotokolnummer: D-KD24/01) i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen i 1975, som revideret i 2013.

   Strømanalysen blev udført ved hjælp af GPOWER -software. Baseret på tidligere forskning, der sammenligner MIP-1a-niveauer før og efter behandling i PICF-prøver, blev den krævede minimumsprøvestørrelse beregnet til at være 52 deltagere, med 26 deltagere i hver gruppe for at opnå en effekt på 80% (effektstørrelse F = 0,2; Estimering af en drop-out-sats på 20%havde den nuværende undersøgelse til formål at rekruttere 63 patienter.

2. Undersøgelsesdesign

   Undersøgelsesplanlægning, rekruttering af patient, behandlinger og stikprøveopsamling blev udført på klinikkerne på Institut for Periodontologi, Fakultet for Tandlæge, Gazi -universitet, Türkiye, mellem januar 2024 og oktober 2024. Alle personer, der blev diagnosticeret med peri-implantitis (peri-implantatblødning på sondering (BOP+) og/eller suppuration, PPD på ≥ 6 mm, og radiografisk crestal knogletab på ≥ 3 mm apikalt af den mest koronale del af den intraosseøse del af Tandimplantatet ved deres første besøg på Periodontology Clinics of Gazi University Fakultet for tandlæge blev opfordret til at deltage i undersøgelsen.

3. Inkludering og ekskluderingskriterier

   Inkluderingskriterier var: 1) Vilje til at deltage i undersøgelsen, 2) med et tandimplantat, der blev indlæst mindst et år før påbegyndelsen af ​​undersøgelsen, der blev diagnosticeret med peri-implantitis, og som har PD på 6-7 mm , 3) Implantaterne havde været i funktion i mindst 1 år. Ekskluderingskriterier var: 1) Efter at have modtaget periodontal terapi eller enhver oral dekontamineringsbehandling eller modtaget antibiotika eller steroider i de sidste seks måneder før påbegyndelsen af ​​undersøgelsen, 2) blev gravid eller amning, 3) blev diagnosticeret med reumatoid arthritis, lupus erythematosus, Dårligt kontrollerede systemiske sygdomme (såsom diabetes eller hypertension), 4) har en medicinsk historie med stråling eller kræftbehandling.

4. Undersøgelsespopulation

   Omfattende periodontale og radiografiske undersøgelser af tænderne og tandimplantaterne blev udført for alle deltagere ved baseline. Kliniske parametre på stedet-niveau blev målt på fire steder af hvert implantat (mesial, buccal, distal og lingual/palatal). Målingerne omfattede PPD (MM), BOP, synligt plakindeks (VPI) og bredden af ​​peri-implantat keratiniseret væv (≥ 2 mm eller <2 mm) vurderinger. Peri-apiske røntgenbilleder blev opnået for at måle peri-implantat radiografisk knogliveau. Alle kliniske målinger blev udført under anvendelse af en periodontal sonde. Alle målinger blev udført af den samme efterforsker. Patienter, der havde PPD ≥ 8 mm omkring deres implantater, blev udelukket fra undersøgelsen.

   I alt 63 peri-implantitis-patienter, der opfyldte inkluderings- og ekskluderingskriterierne, blev rekrutteret til undersøgelsen. Alle deltagere fik verbale og skriftlige oplysninger om undersøgelsens art, og skriftligt informeret samtykke blev opnået fra hver deltager. Undersøgelsespopulationen blev senere opdelt i to grupper baseret på selvrapporteret cigaretrygning. Rygere var personer, der rapporterede at ryge mindst en cigaret pr. Dag i mindst et år (rygning af peri-implantitis-patienter (SPI), n = 30), mens aldrig-rygere var individer, der aldrig havde brugt tobak i nogen form (ikke-ryger Peri-implantitis-patienter (NSPI), n = 33).

5. Peri-implantat og periodontal behandling

   Alle patienter i begge grupper modtog ikke-mund-ikke-kirurgisk periodontal behandling ved hjælp af steril ultralydsskiffer (Woodpecker Piezo Cavitron Ultrasonic Scale Handpiece (HW-5L), EMS, Schweiz)), Currets (LSH6-H7, Osung MND, Korea) og Sterile saltvand. Ikke-kirurgisk behandling af peri-implantitis involverede debridement af hårde og bløde akkumuleringer på implantatoverflader ved anvendelse af titanium curettes (titaniumimplantatscaler 204SD, Hu-Friedy) i 15 minutter, efterfulgt af kunstvanding med steril saltopløsning. Infiltrationsanæstesi blev anvendt, hvis patienten blev anmodet om. Tilpassede orale hygiejneinstruktioner blev givet til alle deltagere efter behandling. Efter 2 måneder (8 uger) modtog patienter et opfordring til et kontrolbesøg, herunder en overordnet debridement og mundhygiejneinstruktioner. Alle kliniske og radiografiske målinger blev gentaget 4 måneder efter afslutningen af ​​deres ikke-kirurgiske peri-implantatbehandling.

6. Prøveopsamling PICF-prøver blev opsamlet fra alle deltagere før (T0) og 4 måneder efter (T1) peri-implantat ikke-kirurgisk behandling. En 30-sekunders prøveudtagningsprotokol blev anvendt. Før prøveudtagning blev prøveområdet isoleret med bomuldsruller og tørret ved hjælp af en blid strøm af luft. En enkelt PICF -prøve blev opsamlet fra hver implantatlomme under anvendelse af periopaperstrimler (Oralflow Inc., New York, USA). Disse papirstrimler blev anbragt 1-2 mm under lommernes spalte og holdt i nøjagtigt 30 sekunder. For at minimere fordampning blev volumenkvantificering udført umiddelbart efter prøveudtagning ved anvendelse af en Perioron 8000 -enhed (Oralflow Inc., New York, USA). Periotron 8000 blev kalibreret, før undersøgelsen startede og kalibreres med jævne mellemrum. Efter kvantificering af PICF -volumen blev hver papirstrimmel anbragt i et tørt eppendorf -rør. Prøverne blev opbevaret ved -80 ° C, indtil de blev overført i tøris til University of Turku, Institute of Dentistry, Finland, til biokemiske analyser.
7. Biomarkøranalyse

Hver PICF-prøve blev elueret i 200 µl phosphatbufferet saltvand (PBS) indeholdende 0,5% bovint serumalbumin. Rørene blev derefter centrifugeret ved 10.000 g ved 4 ° C i 10 minutter. CCL-2-, CCL-8-, CCL-3- og CXCL-9-koncentrationerne blev påvist med Luminex® 200 ™ under anvendelse af Multiplex Immunoassay-sæt (Bio-Plex Pro ™ Human Chemokine Assays, Bio-Rad Laboratories, Californien, USA) ifølge Producentens anbefalinger. Koncentrationer (PG/ml) blev omdannet til den mæglermængde, der blev indsamlet ved 30 sekunder (PG/30 s). De nedre grænser for kvantificering (LLOQ) for hver kemokin var som følger: 0,3 pg/ml for CCL-2, 0,03 pg/ml for CCL-8, 0,4 pg/ml for CCL-3 og 1,8 pg/ml for CXCL- 9.

8. Statistisk analyse

Dataanalyse blev udført ved hjælp af IBM SPSS -statistik (version 29.0 til Windows; IBM Corp). Normaliteten af ​​resultaterne blev evalueret med Shapiro-Wilk-testen. Gruppeforskelle i kategoriske variabler blev vurderet under anvendelse af Pearson Chi-square-testen, mens aldersfordelingen mellem grupper blev sammenlignet ved anvendelse af de uafhængige prøver t-test. Mann-Whitney U-testen blev anvendt til at sammenligne kliniske og biokemiske resultater mellem grupper. For at sammenligne baseline (T0) og 4-måneders postoperative (T1) resultater af biokemiske og kliniske variabler inden for hver gruppe blev Wilcoxon-underskrevet-rank-testen anvendt. Gentagne målinger Analyse af varianstest (kontrolleret for alder) blev anvendt til at bestemme, om der er en forskel i effektiviteten af ​​behandlingen over tid. Logaritmiske konverteringer (log10) blev anvendt på kemokinniveauer (PG/30 s) før den gentagne måleanalyse af varianstesten. En p-værdi på <0,05 blev betragtet som statistisk signifikant for alle parametre. En fire-parameter logistisk regressionsmodel blev anvendt til at beregne kemokinkoncentrationer i PICF. CCL-2 blev påvist i alle prøver, mens CCL-8 var under detektionsgrænsen (LOD) i 77 prøver (T0: 55%, T1: 85%), CCL-3 i 30 prøver (T0: 15%, T1 : 40%) og CXCL-9 i 26 prøver (T0: 15%, T1: 34%). I beskrivende analyser på grund af et stort antal manglende data blev CCL-8 udelukket fra statistiske sammenligninger, mens CCL-3- og CXCL-9-koncentrationer under regressionskurven blev erstattet med en værdi lig med halvdelen af ​​deres laveste kvantificeringsgrænse ( LOD/2)