Effekt av røyking på makrofagrelaterte kjemokiner før og etter ikke-kirurgisk behandling av initial peri-implantitt (PICF)

1. Etikkgodkjenning og bestemmelse av prøvestørrelse

   Studien ble godkjent av Clinical Research Ethics Committee ved Başkent University, Ankara, Türkiye (studieprotokollnummer: D-KD24/01) i samsvar med Helsingfors-erklæringen fra 1975, som revidert i 2013.

   Kraftanalysen ble utført ved bruk av GPower -programvare. Basert på tidligere forskning som sammenlignet MIP-1α-nivåer før og etter behandling i PICF-prøver, ble den nødvendige minimumsprøvestørrelsen beregnet til å være 52 deltakere, med 26 deltakere i hver gruppe for å oppnå en effekt på 80% (effektstørrelse F = 0,2; Estimering av en frafall på 20%, hadde den nåværende studien som mål å rekruttere 63 pasienter.

2. Studiedesign

   Studieplanlegging, pasientrekruttering, behandlinger og prøveinnsamling ble utført ved klinikkene ved Institutt for periodontologi, Fakultet for tannbehandling, Gazi University, Türkiye, mellom januar 2024 og oktober 2024. Alle individer som fikk diagnosen peri-implantitt (blødning av peri-implantat ved sondering (BOP+) og/eller suppuration, PPD på ≥ 6 mm, og radiografisk crestal bentap på ≥ 3 mm apikal av den mest koronale delen av den intraosseøse delen av Tannimplantatet ved sitt første besøk ved periodontologiklinikkene ved Gazi University Fakultet for tannbehandling, ble invitert til å delta i studien.

3. Inkludering og eksklusjonskriterier

   Inkluderingskriterier var: 1) vilje til å delta i studien, 2) å ha et tannimplantat som ble lastet minst ett år før initieringen av studien, som ble diagnostisert med peri-implantitt, og som har PD på 6-7 mm , 3) Implantatene hadde vært i funksjon i minst 1 år. Eksklusjonskriterier var: 1) etter å ha fått periodontal terapi eller oral dekontamineringsbehandling eller mottatt antibiotika eller steroider det siste halvåret før start av studien, 2) var gravid eller amming, 3) ble diagnostisert med revmatoid artritis, lupus erythematosus, Dårlig kontrollerte systemiske sykdommer (som diabetes eller hypertensjon), 4) som har en medisinsk historie med stråling eller kreftbehandling.

4. Studiepopulasjon

   Omfattende periodontale og radiografiske undersøkelser av tennene og tannimplantatene ble utført for alle deltakere ved baseline. Kliniske parametere på stedsnivå ble målt på fire steder med hvert implantat (mesial, bukkal, distal og språklig/palatal). Målingene inkluderte PPD (mm), BOP, synlig plakkindeks (VPI) og bredde på peri-implantat keratinisert vev (≥ 2 mm eller <2 mm) vurderinger. Peri-apiske røntgenbilder ble oppnådd for å måle peri-implantat radiografisk beinnivå. Alle kliniske målinger ble utført ved bruk av en periodontal sonde. Alle målinger ble utført av samme etterforsker. Pasienter som hadde PPD ≥ 8 mm rundt implantatene deres ble ekskludert fra studien.

   Totalt 63 pasienter med peri-implantitt som oppfylte inkluderings- og eksklusjonskriteriene ble rekruttert til studien. Alle deltakerne fikk verbal og skriftlig informasjon om studiens art, og skriftlig informert samtykke ble innhentet fra hver deltaker. Studiepopulasjonen ble senere delt inn i to grupper basert på selvrapportert sigarettrøyking. Røykere var individer som rapporterte å røyke minst en sigarett per dag i minst ett år (røyking av peri-implantittpasienter (SPI), n = 30), mens aldri røykere var individer som aldri hadde brukt tobakk i noen form (ikke-røykende Peri-implantitt pasienter (NSPI), n = 33).

5. Peri-implantat og periodontal behandling

   Alle pasienter i begge grupper fikk ikke-surgisk periodontal behandling ved bruk av steril ultralydskalere (Woodpecker Piezo Cavitron Ultrasonic Scaler Handstiece (HW-5L), EMS, Sveits)), Curstrets (LSH6-H7, Osung MND, Korea) og Sterile saltvanns irrigasjoner. Ikke-kirurgisk behandling av peri-implantitt involverte debridement av harde og myke ansamlinger på implantatoverflater ved bruk av titan curetter (titanimplantatskalere 204SD, Hu-Friedy) i 15 minutter, fulgt av vanning med steril saltløsning. Infiltrasjonsanestesi ble brukt hvis pasienten ble bedt om. Tilpassede munnhygieneinstruksjoner ble gitt til alle deltakerne etter behandling. Etter 2 måneder (8 uker) fikk pasienter en samtale om kontrollbesøk, inkludert en supragingival debridement og munnhygieneinstruksjoner. Alle kliniske og radiografiske målinger ble gjentatt 4 måneder etter fullføringen av deres ikke-kirurgiske peri-implantatbehandling.

6. Eksempelinnsamling PICF-prøver ble samlet fra alle deltakere før (T0) og 4 måneder etter (T1) peri-implantat ikke-kirurgisk behandling. En 30-sekunders prøvetakingsprotokoll ble brukt. Før prøvetaking ble prøveområdet isolert med bomullsruller og tørket ved bruk av en forsiktig strøm av luft. En enkelt PICF -prøve ble samlet fra hver implantatlomme ved bruk av Periopaper -strips (OralFlow Inc., New York, USA). Disse papirstrimlene ble plassert 1-2 mm under lommens sprekk og holdt i nøyaktig 30 sekunder. For å minimere fordampning ble volumkvantifisering utført umiddelbart etter prøvetaking ved bruk av en Periotron 8000 -enhet (OralFlow Inc., New York, USA). Periotron 8000 ble kalibrert før han startet studien og kalibrert med jevne mellomrom. Etter å ha kvantifisert PICF -volumet, ble hver papirstrimmel plassert i et tørt Eppendorf -rør. Prøvene ble lagret ved -80 ° C til de ble overført i tørris til University of Turku, Institute of Dentistry, Finland, for biokjemiske analyser.
7. Biomarkøranalyse

Hver PICF-prøve ble eluert i 200 ul fosfatbuffret saltvann (PBS) inneholdende 0,5% bovint serumalbumin. Rørene ble deretter sentrifugert ved 10.000 g ved 4 ° C i 10 minutter. CCL-2, CCL-8, CCL-3 og CXCL-9 konsentrasjonene ble påvist med Luminex® 200 ™ ved bruk av multiplex immunoassay-sett (Bio-Plex Pro ™ humane kjemokinanalyser, Bio-Rad Laboratories, California, USA) ifølge produsentens anbefalinger. Konsentrasjoner (pg/ml) ble konvertert til mediatormengden samlet inn på 30 sekunder (pg/30 s). De nedre kvantifiseringsgrensene (LLOQ) for hvert kjemokin var som følger: 0,3 pg/ml for CCL-2, 0,03 pg/ml for CCL-8, 0,4 pg/ml for CCL-3 og 1,8 pg/ml for CXCL- 9.

8. Statistisk analyse

Dataanalyse ble utført ved bruk av IBM SPSS -statistikk (versjon 29.0 for Windows; IBM Corp). Normaliteten til resultatene ble evaluert med Shapiro-Wilk-testen. Gruppeforskjeller i kategoriske variabler ble vurdert ved bruk av Pearson Chi-Square-testen, mens aldersfordelingen mellom gruppene ble sammenlignet ved bruk av de uavhengige prøvene t-test. Mann-Whitney U-testen ble brukt for å sammenligne kliniske og biokjemiske utfall mellom grupper. For å sammenligne baseline (T0) og 4-måneders resultat (T1) utfall av biokjemiske og kliniske variabler i hver gruppe, ble Wilcoxon signert-rank-testen brukt. Gjentatte målingsanalyse av variansprøve (kontrollert for alder) ble brukt for å bestemme om det er en forskjell i effektiviteten av behandlingen over tid. Logaritmiske konverteringer (log10) ble brukt på kjemokinnivåer (PG/30 s) før gjentatt måleanalyse av variansetesten. En p-verdi på <0,05 ble ansett for å være statistisk signifikant for alle parametrene. En logistisk regresjonsmodell med fire parameter ble brukt til å beregne kjemokinkonsentrasjoner i PICF. CCL-2 ble påvist i alle prøver, mens CCL-8 var under deteksjonsgrensen (LOD) i 77 prøver (T0: 55%, T1: 85%), CCL-3 i 30 prøver (T0: 15%, T1 : 40%) og CXCL-9 i 26 prøver (T0: 15%, T1: 34%). I beskrivende analyser, på grunn av et høyt antall manglende data, ble CCL-8 ekskludert fra statistiske sammenligninger, mens CCL-3 og CXCL-9 konsentrasjoner under regresjonskurven ble erstattet med en verdi lik halvparten av deres laveste kvantifiseringsgrense ( LOD/2)