Влияние курения на хемокины, связанные с макрофагами, до и после нехирургического лечения первоначального перимиплантита (PICF)

1. Утверждение этики и определение размера выборки

   Исследование было одобрено Комитетом по этике клинических исследований Башкентского университета, Анкара, Тюркие (номер протокола исследования: D-KD24/01) в соответствии с Хельсинкской декларацией 1975 года, как это пересмотрено в 2013 году.

   Анализ мощности проводился с использованием программного обеспечения GPOWER. Основываясь на предыдущих исследованиях, сравнивающих уровни MIP-1α MIP-1α до и после лечения в образцах PICF, был рассчитан необходимый минимальный размер выборки 52 участника, причем 26 участников в каждой группе для достижения мощности 80% (величина эффекта F = 0,2; Оценивая показатель отсева на 20%, настоящее исследование было направлено на набор 63 пациентов.

2. Учебный дизайн

   Планирование исследования, набор пациентов, лечение и сбор образцов были выполнены в клиниках Департамента пародонтологии, факультета стоматологии, Университет Гази, Тюркие, в период с января 2024 года по октябрь 2024 года. Все люди, у которых был диагностирован перимимплантит (перимиплантационное кровотечение при зондировании (BOP+) и/или наглушении, PPD ≥ 6 мМ и рентгенографическая потерю костной ткани ≥ 3 мМ апикальной из наиболее корональной части внутриусовой части. Стоматологический имплантат во время их первого визита в пародонтологических клиниках факультета стоматологии Гази был приглашен принять участие в исследовании.

3. Критерии включения и исключения

   Критериями включения были: 1) готовность участвовать в исследовании, 2) иметь зубной имплантат, который был загружен как минимум за год до начала исследования, который был диагностирован с перимиплантитом, и у которого есть БП 6-7 мм , 3) имплантаты работали не менее 1 года. Критериями исключения были: 1) получение пародонтальной терапии или любого лечения перорального дезактивации или получения антибиотиков или стероидов за последние шесть месяцев до начала исследования, 2) беременная или грудное вскармливание, 3) диагностировано с ревматоидным артритом, люпсовой эритематозой, 3) с диагнозом ревматоидного артрита, люпсота, эритематозой, 3). Плохо контролируемые системные заболевания (такие как диабет или гипертония), 4), имеющие историю болезни лучевой или раковой терапии.

4. Исследовательская популяция

   Комплексные пародонта и рентгенографические исследования зубов и зубных имплантатов были выполнены для всех участников на исходном уровне. Клинические параметры на уровне площадки были измерены на четырех участках каждого имплантата (мезиальный, щечный, дистальный и язычный/небатальный). Измерения включали PPD (MM), BOP, индекс видимой бляшки (VPI) и ширину перимиплантационной кератинизированной ткани (≥ 2 мм или <2 мм). Пери-апикальные рентгенограммы были получены для измерения уровня рентгенографической кости перимплантации. Все клинические измерения были выполнены с использованием пародонтального зонда. Все измерения проводились одним и тем же исследователем. Пациенты, у которых был PPD ≥ 8 мм вокруг своих имплантатов, были исключены из исследования.

   В общей сложности 63 пациентов с перимиплантитом, которые соответствовали критериям включения и исключения, были набраны для исследования. Всем участникам было предоставлено устная и письменная информация о характере исследования, и у каждого участника было получено письменное информированное согласие. Позже исследуемое население была разделена на две группы на основе самооценки курящих сигарет. Курильщиками были люди, которые сообщали о курение, по крайней мере, по одной сигарете в день в течение по крайней мере одного года (курение пациентов с перимиплантитом (SPI), n = 30), в то время как никогда некурящими были люди, которые никогда не использовали табак в какой-либо форме (не-хитро Перимимплантит пациентов (NSPI), n = 33).

5. Перимплантат и пародонтальное лечение

   Все пациенты в обеих группах получали нехирургическое лечение пародонта с использованием стерильных ультразвуковых ультразвуковых снежников (дятел пьезой кавитроновый ультразвуковой хрупкий шрифт (HW-5L), EMS, Швейцария)), Currets (LSH6-H7, Osung MND, Korea) и и и Стерильные солевые орошения. Нехирургическое лечение перимиплантита включало в себя переоборудование жестких и мягких накоплений на поверхностях имплантата с использованием титановых кремов (титановый имплантат Scaler 204SD, HU-Friedy) в течение 15 минут, за которым следует орошение стерильным раствором физиологического раствора. Инфильтрационная анестезия использовалась, если его запросили пациент. Индивидуальные инструкции по гигиене полости рта были даны всем участникам после лечения. Через 2 месяца (8 недель) пациенты получили звонок для контрольного визита, включая инструкции по борьбе с надпеджением и гигиеной полости рта. Все клинические и рентгенографические измерения были повторены через 4 месяца после завершения их нехирургического лечения перимиплантатом.

6. Образцы сбора образцов PICF собирали у всех участников до (T0) и через 4 месяца после (T1) нехирургического лечения (T1). Был использован 30-секундный протокол отбора проб. Перед отбором выборки область образца была выделена хлопковыми рулонами и высушила с помощью мягкого потока воздуха. Один образец PICF был собран из каждого кармана имплантата с использованием полос периопапера (Oralflow Inc., Нью -Йорк, США). Эти бумажные полоски были размещены на 1-2 мм под щели кармана и хранились в течение 30 секунд. Чтобы минимизировать испарение, количественное определение объема была выполнена сразу после отбора проб с использованием устройства Periotron 8000 (Oralflow Inc., Нью -Йорк, США). Периорон 8000 был откалиброван до начала исследования и периодически перекалиброван. После количественной оценки объема PICF каждая бумажная полоса помещали в сухой трубку Eppendorf. Образцы хранили при -80 ° C до переноса в сухой льду в Университет Турку, Институт стоматологии, Финляндия, для биохимических анализов.
7. Анализ биомаркера

Каждый образец PICF элюировали в 200 мкл фосфатного солевого раствора (PBS), содержащего 0,5% бычьего сывороточного альбумина. Затем трубки центрифугировали при 10 000 г при 4 ° C в течение 10 минут. Концентрации CCL-2, CCL-8, CCL-3 и CXCL-9 были обнаружены с помощью LUMINEX® 200 ™ с использованием мультиплексных наборов иммуноанализа (Bio-Plex Pro ™ Human Anagessays, Bio-Rad Laboratories, Калифорния, США) рекомендации производителя. Концентрации (PG/мл) были преобразованы в количество медиатора, собранного через 30 секунд (PG/30 с). Нижние пределы количественной оценки (LLOQ) для каждого хемокина были следующими: 0,3 пг/мл для CCL-2, 0,03 пг/мл для CCL-8, 0,4 пг/мл для CCL-3 и 1,8 пг/мл для CXCL- 9

8. Статистический анализ

Анализ данных был выполнен с использованием статистики IBM SPSS (версия 29.0 для Windows; IBM Corp). Нормальность результатов была оценена с помощью теста Шапиро-Уилка. Групповые различия в категориальных переменных были оценены с использованием критерия хи-квадрат Пирсона, в то время как возрастное распределение между группами сравнивалось с использованием T-критерия независимых образцов. U-тест Манна-Уитни был применен для сравнения клинических и биохимических результатов между группами. Для сравнения исходных (T0) и 4-месячных послеоперационных (T1) результатов биохимических и клинических переменных в каждой группе использовался тест под знаком Уилкоксона. Тест на дисперсию повторных измерений (контролируемый для возраста) был использован для определения того, существует ли разница в эффективности лечения с течением времени. Логарифмические конверсии (log10) были применены к уровням хемокинов (PG/30 с) перед анализом повторных измерений теста на дисперсию. P-значение <0,05 считалось статистически значимым для всех параметров. Для расчета концентрации хемокинов в PICF использовалась четырехпараметрическая модель логистической регрессии. CCL-2 был обнаружен во всех образцах, в то время как CCL-8 был ниже предела обнаружения (LOD) в 77 образцах (T0: 55%, T1: 85%), CCL-3 в 30 образцах (T0: 15%, T1 : 40%) и CXCL-9 в 26 образцах (T0: 15%, T1: 34%). В описательном анализе, из-за большого количества отсутствующих данных, CCL-8 был исключен из статистических сравнений, в то время как концентрации CCL-3 и CXCL-9 ниже кривой регрессии были заменены значением, равным половине их самого низкого предела количественной оценки ( LOD/2)