Tupakoinnin vaikutus makrofageihin liittyviin kemokiiniin ennen alkuperäisen peri-implantiitin ei-kirurgista hoitoa ja sen jälkeen (PICF)

1. Eettinen hyväksyntä ja otoksen koon määrittäminen

   Tutkimuksen hyväksyi Başkentin yliopiston kliinisen tutkimuksen etiikkakomitea, Ankara, Türkiye (tutkimusprotokollanumero: D-KD24/01) vuoden 1975 Helsingin julistuksen mukaisesti vuonna 2013 tarkistettu.

   Tehoanalyysi suoritettiin käyttämällä Gunw -ohjelmistoa. Perustuen aikaisempaan tutkimukseen, jossa verrattiin PICF-näytteitä edeltäviä MIP-1a-tasoja ja sen jälkeen, vaadittu vähimmäisnäytteen koko laskettiin olevan 52 osallistujaa, ja kunkin ryhmän osallistujat olivat 26 80%: n saavuttamiseksi (vaikutuskoko F = 0,2; α -virhe = 0,05). Arvioidessaan 20%: n keskeyttämisastetta tämän tutkimuksen tavoitteena oli rekrytoida 63 potilasta.

2. Opintojen suunnittelu

   Tutkimussuunnittelu, potilaiden rekrytointi, hoidot ja näytteenkeruu suoritettiin periodontologian laitoksen, hammaslääketieteellisen tiedekunnan, Gazin yliopiston, Türkiye, tammikuun 2024 ja lokakuun 2024 välisenä aikana. Kaikki henkilöt, joille on diagnosoitu peri-implantiitti (peri-implantin verenvuoto koettelemisessa (BOP+) ja/tai Suppuration, PPD ≥ 6 mm, ja radiografinen luun menetys ≥ 3 mm apikaalisesti sisäisen osuuden koronaalista osaa Hammasimplantti heidän alkuperäisessä vierailussaan Gazin yliopiston hammaslääketieteellisen tiedekunnan periodontologiaklinikoilla kutsuttiin osallistumaan tutkimukseen.

3. Osallisuus- ja poissulkemiskriteerit

   Sisällyttämiskriteerit olivat: 1) halukkuus osallistua tutkimukseen, 2), jolla oli hammasimplantti, joka oli ladattu vähintään vuosi ennen tutkimuksen aloittamista, jolla oli diagnosoitu peri-implantiitti, ja jonka PD on 6-7 mm , 3) Implantit olivat toimineet vähintään yhden vuoden ajan. Poissulkemiskriteerit olivat: 1) vastaanottaessaan periodontaalista hoitoa tai minkä tahansa suun dekontaminaatiohoitoa tai saaneet antibiootteja tai steroideja viimeisen kuuden kuukauden aikana ennen tutkimuksen aloittamista, 2) raskaana olevan tai imettämisen, 3), joilla on diagnosoitu nivelreuma, lupus erythematosus, Huonosti kontrolloidut systeemiset sairaudet (kuten diabetes tai verenpaine), 4), joilla on säteily- tai syöpähoidon sairaushistoria.

4. Tutkimusväestö

   Kaikille osallistujille suoritettiin hampaiden ja hammasimplanttien kattavat periodontaaliset ja radiografiset tutkimukset. Paikkatason kliiniset parametrit mitattiin kunkin implantin neljässä paikassa (mesiaalinen, buccal, distaalinen ja kielellinen/palataali). Mittaukset sisälsivät PPD (mm), BOP, näkyvä plakkiindeksi (VPI) ja peri-implantin keratinisoidun kudoksen (≥ 2 mm tai <2 mm) leveys. Perikapiaaliset röntgenkuvat saatiin peri-implantin radiografisen luutason mittaamiseksi. Kaikki kliiniset mittaukset suoritettiin periodontaalisella koettimella. Sama tutkija suoritti kaikki mittaukset. Potilaat, joilla oli PPD ≥ 8 mm implanttiensa ympärillä, jätettiin tutkimuksen ulkopuolelle.

   Tutkimukseen rekrytoitiin yhteensä 63 peri-implantiittipotilasta, jotka täyttivät sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit. Kaikille osallistujille annettiin suullista ja kirjallista tietoa tutkimuksen luonteesta, ja jokaiselta osallistujalta saatiin kirjallinen tietoinen suostumus. Tutkimuspopulaatio jaettiin myöhemmin kahteen ryhmään, jotka perustuvat itse ilmoitettuun tupakointiin. Tupakoitsijat olivat yksilöitä, jotka ilmoittivat tupakoivan vähintään yhden savukkeen päivässä vähintään yhden vuoden ajan (tupakointi peri-implantiittipotilaat (SPI), n = 30), kun taas tupakoimattomat eivät ole henkilöitä, jotka eivät olleet koskaan käyttäneet tupakkaa missään muodossa (tupakoimattomat peri-implantiittipotilaat (NSPI), n = 33).

5. Peri-implantti- ja periodontaalinen hoito

   Molempien ryhmien kaikki potilaat saivat täysisuunista ei-kirurgista periodontaalista hoitoa steriilien ultraääni-skaalarien avulla (Woodpecker Piezo Cavitron Ultrasonic Scaler -kappale (HW-5L), EMS, Sveitsi), Curle (LSH6-H7, Osung Mnd, Korea) ja Steriiliä suolaliuoksen kastelua. Periki-implantiitin ei-kirurginen hoito sisälsi kovan ja pehmeän kertymisen purkamisen implanttipinnoille käyttämällä titaanikuretteja (titaani-implantin skaalari 204SD, Hu-Friedy) 15 minuutin ajan, mitä seurasi kastelu steriilillä suolaliuoksella. Suodatusanestesiaa käytettiin potilaan pyynnöstä. Kaikille osallistujille annettiin räätälöityjä suuhygieniaohjeita hoidon jälkeen. Kahden kuukauden (8 viikon) jälkeen potilaat saivat puhelun valvontavierailusta, mukaan lukien supragratiiviset poisto- ja suuhygieniaohjeet. Kaikki kliiniset ja radiografiset mittaukset toistettiin 4 kuukauden kuluttua niiden ei-kirurgisen peri-implantihoidon valmistumisesta.

6. Näytteenkeruu PICF-näytteet kerättiin kaikilta osallistujilta ennen (T0) ja 4 kuukautta (T1) peri-implantin ei-kirurgisen hoidon jälkeen. Käytettiin 30 sekunnin näytteenottoprotokollaa. Ennen näytteenottoa näytealue eristettiin puuvillarullalla ja kuivattiin lempeällä ilmavirralla. Jokaisesta implanttitaskusta kerättiin yksi PICF -näyte periopaperinauhoilla (OralFlow Inc., New York, USA). Nämä paperinauhat asetettiin 1-2 mm taskun raon alle ja pidettiin tarkalleen 30 sekuntia. Haihtumisen minimoimiseksi äänenvoimakkuuden kvantifiointi suoritettiin heti näytteenoton jälkeen Periotron 8000 -laitteen (OralFlow Inc., New York, USA) avulla. Periotron 8000 kalibroitiin ennen tutkimuksen aloittamista ja kalibroitiin säännöllisesti. PICF -tilavuuden kvantifioinnin jälkeen jokainen paperinauha asetettiin kuivaan Eppendorf -putkeen. Näytteet säilytettiin -80 ° C: ssa, kunnes ne siirrettiin kuivassa jäällä Turkon yliopistoon, hammaslääketieteen instituuttiin, Suomeen, biokemiallisiin analyyseihin.
7. Biomarkkeri -analyysi

Jokainen PICF-näyte eluoitiin 200 ui fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS), joka sisälsi 0,5% naudan seerumialbumiinia. Putket sentrifugoitiin sitten 10 000 g: n lämpötilassa 4 ° C: ssa 10 minuutin ajan. CCL-2-, CCL-8-, CCL-3- ja CXCL-9-pitoisuudet havaittiin Luminex® 200 ™ -sovelluksella käyttämällä multipleksisyytinsarjojen sarjoja (Bio-Plex Pro ™ -kemokiinimääritykset, Bio-Rad Laboratories, Kalifornia, USA), jotka valmistajan suositukset. Pitoisuudet (PG/ml) muunnettiin välittäjän määrään, joka kerättiin 30 sekunnissa (pg/30 s). Jokaisen kemokiinin kvantifiointi (LLOQ) alarajat olivat seuraavat: 0,3 pg/ml Ccl-2: lle, 0,03 pg/ml CCL-8: lle, 0,4 pg/ml CCL-3: lle ja 1,8 pg/ml Cxcl-kohdalle 9.

8. Tilastollinen analyysi

Tietoanalyysi suoritettiin käyttämällä IBM SPSS -tilastoja (versio 29.0 Windowsille; IBM Corp). Tulosten normaalisuus arvioitiin Shapiro-Wilk-testillä. Ryhmäerot kategorisissa muuttujissa arvioitiin käyttämällä Pearson Chi-neliötestiä, kun taas ikäjakauma ryhmien välillä verrattiin riippumattomien näytteiden t-testillä. Mann-Whitney U -testiä käytettiin kliinisten ja biokemiallisten tulosten vertaamiseen ryhmien välillä. Perustan (T0) ja 4 kuukauden leikkauksen jälkeisten (T1) tulosten vertaamiseksi biokemiallisten ja kliinisten muuttujien tulokset käytettiin Wilcoxon-allekirjoitettua langan testiä. Toistuvia mittausanalyysiä varianssikokeita (kontrolloitu ikään) käytettiin määrittämään, onko hoidon tehokkuudessa ero ajan myötä. Logaritmisia muuntamisia (LOG10) käytettiin kemokiinitasoille (pg/30 s) ennen varianssikokeen toistuvia mittausanalyysejä. P-arvoa <0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevänä kaikille parametreille. Neljän parametrin logistista regressiomallia käytettiin kemokiinipitoisuuksien laskemiseen PICF: ssä. CCL-2 havaittiin kaikissa näytteissä, kun taas CCL-8 oli alle havaitsemisrajan (LOD) 77 näytteessä (T0: 55%, T1: 85%), CCL-3 30 näytteessä (T0: 15%, T1 : 40%) ja CXCL-9 26 näytteessä (T0: 15%, T1: 34%). Kuvailevissa analyyseissä, koska puuttuvat tiedot ovat suuren määrän puuttuvia tietoja, CCL-8 jätettiin tilastollisten vertailujen ulkopuolelle, kun taas CCL-3- ja CXCL-9-pitoisuudet regressiokäyrän alapuolella korvattiin arvolla, joka oli puolet niiden alimmasta kvantifiointirajasta ( LOD/2)