Effect van roken op macrofaag-gerelateerde chemokines voor en na niet-chirurgische behandeling van initiële peri-implantitis (PICF)

1. Ethische goedkeuring en bepaling van de steekproefomvang

   De studie werd goedgekeurd door de Clinical Research Ethics Committee van Başkent University, Ankara, Türkiye (studieprotocolnummer: D-KD24/01) in overeenstemming met de Helsinki-verklaring van 1975, zoals herzien in 2013.

   De vermogensanalyse werd uitgevoerd met behulp van GPOWER -software. Gebaseerd op eerder onderzoek dat MIP-1α-niveaus voor en na de behandeling in PICF-monsters vergelijken, werd de vereiste minimale steekproefgrootte berekend als 52 deelnemers, met 26 deelnemers in elke groep om een ​​vermogen van 80% te bereiken (effectgrootte F. = 0,2; α -fout = 0,05). De huidige studie schatte een uitval van 20%en was gericht op het werven van 63 patiënten.

2. Studieontwerp

   Studieplanning, werving van patiënten, behandelingen en monsterverzameling werden uitgevoerd in de klinieken van de afdeling Periodontologie, Faculteit der tandheelkunde, Gazi University, Türkiye, tussen januari 2024 en oktober 2024. Alle personen met de diagnose peri-implantitis (peri-implantaatbloedingen op sondering (BOP+) en/of suppuratie, PPD van ≥ 6 mm en radiografisch crestaal botverlies van ≥ 3 mm apicaal van het meest coronale gedeelte van het intraosseeuze deel van Het tandheelkundige implantaat bij hun eerste bezoek aan de Periodontology Clinics van Gazi University Faculteit der Dentistry, werd uitgenodigd om deel te nemen aan de studie.

3. Inclusie- en uitsluitingscriteria

   Inclusiecriteria waren: 1) Bereidheid om deel te nemen aan het onderzoek, 2) met een tandheelkundig implantaat dat ten minste een jaar vóór de start van de studie werd geladen, dat werd gediagnosticeerd met peri-implantitis, en dat heeft PD van 6-7 mm , 3) De implantaten waren al minstens 1 jaar in functie. Uitsluitingscriteria waren: 1) Na parodontale therapie of enige orale decontaminatiebehandeling te hebben gekregen of antibiotica of steroïden te ontvangen in de afgelopen zes maanden vóór de start van het onderzoek, 2) zwanger zijn of borstvoeding geven, 3) gediagnosticeerd worden met reumatoïde artritis, lupus erythematosus, lupus erythematosus, Slecht gecontroleerde systemische ziekten (zoals diabetes of hypertensie), 4) met een medische geschiedenis van bestraling of kankertherapie.

4. Studiepopulatie

   Uitgebreide parodontale en radiografische onderzoeken van de tanden en tandheelkundige implantaten werden uitgevoerd voor alle deelnemers bij aanvang. Klinische parameters op locatieniveau werden gemeten op vier locaties van elk implantaat (mesiaal, buccaal, distaal en linguaal/palataal). De metingen omvatten PPD (mm), BOP, zichtbare plaque-index (VPI) en breedte van peri-implantaatgekeratiniseerd weefsel (≥ 2 mm of <2 mm) beoordelingen. Peri-apicale röntgenfoto's werden verkregen om peri-implantaat radiografisch botniveau te meten. Alle klinische metingen werden uitgevoerd met behulp van een parodontale sonde. Alle metingen werden uitgevoerd door dezelfde onderzoeker. Patiënten met PPD ≥ 8 mm rond hun implantaten werden uitgesloten van het onderzoek.

   In totaal werden 63 peri-implantitis patiënten die voldeden aan de inclusie- en uitsluitingscriteria voor het onderzoek geworven. Alle deelnemers kregen mondelinge en schriftelijke informatie over de aard van het onderzoek en schriftelijke geïnformeerde toestemming werd verkregen van elke deelnemer. De onderzoekspopulatie werd later verdeeld in twee groepen op basis van zelfgerapporteerde sigaretten roken. Rokers waren personen die minstens één jaar minstens één sigaret per dag meldden (Peri-Implantitis Patiënten (SPI), N = 30), terwijl nooit-rokers personen waren die nog nooit tabak hadden gebruikt in welke vorm dan ook (niet-roken Peri-implantitis patiënten (NSPI), n = 33).

5. Peri-implantaat en parodontale behandeling

   Alle patiënten in beide groepen ontvingen niet-chirurgische parodontale behandeling met behulp van steriele ultrasone scalers (Woodpecker Piezo Cavitron Ultrasonic Scaler Handpiece (HW-5L), EMS, Zwitserland)), Currets (LSH6-H7, Osung MND, Korea), en steriele zoutoplossing irrigaties. Niet-chirurgische behandeling van peri-implantitis betrof het debridement van harde en zachte accumulaties op implantaatoppervlakken met behulp van titaniumcuretten (Titanium Implant Scaler 204SD, Hu-Friedy) gedurende 15 minuten, gevolgd door irrigatie met steriele zoutoplossing. Infiltratieanesthesie werd gebruikt indien door de patiënt gevraagd. Aangepaste mondhygiëne -instructies werden na behandeling aan alle deelnemers gegeven. Na 2 maanden (8 weken) ontvingen patiënten een oproep voor een controlebezoek, waaronder een supragingival debridement en orale hygiëne -instructies. Alle klinische en radiografische metingen werden 4 maanden na de voltooiing van hun niet-chirurgische peri-implantaatbehandeling herhaald.

6. PICF-monsters van monsters werden verzameld van alle deelnemers vóór (T0) en 4 maanden na (T1) peri-implantaat niet-chirurgische behandeling. Een bemonsteringsprotocol van 30 seconden werd gebruikt. Vóór de bemonstering werd het monstergebied geïsoleerd met katoenbroodjes en gedroogd met een zachte stroom lucht. Een enkel PICF -monster werd verzameld uit elke implantaatzak met behulp van periopaper strips (Oralflow Inc., New York, VS). Deze papieren strips werden 1-2 mm onder de spleet van de zak geplaatst en precies 30 seconden bewaard. Om verdamping te minimaliseren, werd volumekwantificering onmiddellijk na bemonstering uitgevoerd met behulp van een Periotron 8000 -apparaat (Oralflow Inc., New York, VS). De Periotron 8000 werd gekalibreerd voordat de studie begon en periodiek opnieuw gekalibreerd. Na het kwantificeren van het PICF -volume werd elke papieren strip in een droge Eppendorf -buis geplaatst. De monsters werden bewaard bij -80 ° C totdat ze in droog ijs werden overgebracht naar de Universiteit van Turku, Instituut voor Dentistry, Finland, voor biochemische analyses.
7. Biomarker -analyse

Elk PICF-monster werd geëlueerd in 200 µl fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) die 0,5% runderserumalbumine bevatte. De buizen werden vervolgens 10 minuten gecentrifugeerd bij 10.000 g bij 4 ° C. De CCL-2-, CCL-8-, CCL-3- en CXCL-9-concentraties werden gedetecteerd met Luminex® 200 ™ met behulp van multiplex immunoassay-kits (Bio-Plex Pro ™ Human Chemokine Assays, Bio-Rad Laboratories, California, VS) Volgens de VS) volgens de aanbevelingen van de fabrikant. Concentraties (PG/ml) werden omgezet in de mediatorhoeveelheid die werd verzameld na 30 seconden (Pg/30 s). De ondergrenzen van kwantificeringslimieten (LLOQ) voor elke chemokine waren als volgt: 0,3 pg/ml voor CCL-2, 0,03 pg/ml voor CCL-8, 0,4 pg/ml voor CCL-3 en 1,8 pg/ml voor CXCL- 9.

8. Statistische analyse

Gegevensanalyse werd uitgevoerd met behulp van IBM SPSS -statistieken (versie 29.0 voor Windows; IBM Corp). De normaliteit van de resultaten werd geëvalueerd met de Shapiro-Wilk-test. Groepsverschillen in categorische variabelen werden beoordeeld met behulp van de Pearson Chi-square-test, terwijl leeftijdsverdeling tussen groepen werd vergeleken met behulp van de onafhankelijke monsters t-test. De Mann-Whitney U-test werd toegepast om klinische en biochemische resultaten tussen groepen te vergelijken. Om de basislijn (T0) en 4-maanden postoperatieve (T1) resultaten van biochemische en klinische variabelen binnen elke groep te vergelijken, werd de Wilcoxon ondertekende rangtest gebruikt. Herhaalde maatregelenanalyse van variantie -test (gecontroleerd voor leeftijd) werd gebruikt om te bepalen of er een verschil is in de effectiviteit van de behandeling in de tijd. Logaritmische conversies (log10) werden toegepast op chemokinesiveaus (pg/30 s) vóór de herhaalde metingenanalyse van de variantie -test. Een p-waarde van <0,05 werd als statistisch significant beschouwd voor alle parameters. Een logistiek regressiemodel met vier parameter werd gebruikt om chemokineconcentraties in PICF te berekenen. CCL-2 werd gedetecteerd in alle monsters, terwijl CCL-8 onder de detectielimiet (LOD) was in 77 monsters (T0: 55%, T1: 85%), CCL-3 in 30 monsters (T0: 15%, T1 : 40%) en CXCL-9 in 26 monsters (T0: 15%, T1: 34%). In beschrijvende analyses, vanwege een groot aantal ontbrekende gegevens, werd CCL-8 uitgesloten van statistische vergelijkingen, terwijl CCL-3- en CXCL-9-concentraties onder de regressiecurve werden vervangen met een waarde gelijk aan de helft van hun laagste kwantificatielimiet ( LOD/2)