Effekten af ​​at bryde langvarigt siddende på fedtvæv og stofskifte

Forundersøgelsesvurderinger:

Vurdering af fysisk aktivitet: en kombineret puls-/accelerometermonitor blev båret i 7 dage for at vurdere deltagerens sædvanlige fysiske aktivitetsenergiforbrug (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, UK). Dette blev fastgjort til venstre bryst via 2 klæbende EKG-puder i 24 timer om dagen undtagen under brusebad/badning/svømning.

Kropssammensætningsanalyse:

Kropsmassen blev vurderet ved hjælp af digitale vægte post-void (TANITA corp., Tokyo, Japan). Talje- og hofteomkreds blev vurderet ud fra World Health Organizations retningslinjer. Kropssammensætning blev bestemt ved at anvende dobbeltenergi røntgenabsorptiometri (Discovery, Hologic, Bedford, UK). Abdominal subkutan og visceral fedtvævsmasse blev estimeret fra en central region mellem L1-L4.

Prøvedage:

I de 72 timer forud for hvert hovedforsøg blev deltagerne bedt om at afstå fra at udføre nogen anstrengende fysisk aktivitet. I de 48 timer forud for hvert hovedforsøg var indtagelse af alkohol/koffein ikke tilladt, og i mellemtiden blev en kostjournal afsluttet 48 timer før det første hovedforsøg. Deltagerne blev bedt om at replikere denne diæt før deres andet hovedforsøg. Derudover blev deltagerne i de 48 timer forud for hvert hovedforsøg bedt om at begrænse deres skridt til under 4000 skridt om dagen for at efterligne stillesiddende livsstilsmønstre og eliminere eventuelle akutte effekter fra nylig fysisk aktivitet.

To forsøg blev udført, herunder en langvarig siddende og en afbrydelse af forlænget siddende forsøg. I pauseforsøget gik deltagerne efter at have indtaget 1. måltid 2 minutter på et løbebånd med 6,4 km/t hastighed hvert 20. minut i de følgende 180 minutter. I den resterende del af tiden sad deltagerne på stolen. Efter 180 min blev 2. måltid leveret. Efter at have afsluttet det 2. måltid, fortsatte deltagerne 2 minutter med at bryde længerevarende siddende fysisk aktivitet med samme hastighed hvert 20. minut i de følgende 120 minutter. I alt udførte deltagerne 15 to-minutters anfald af fysisk aktivitet gennem hele forsøget i i alt 30 minutter, mens de afbrød længere siddende fysisk aktivitet. I det længerevarende siddeforsøg sad deltagerne på en stol.

Udåndet luft, RPE og puls blev opsamlet i to af pausende siddende gåture for at bestemme træningsintensitet og energiforbrug. Derudover blev to 5 minutters siddetid med udåndet luft og puls taget til det beregnede samlede energiforbrug under siddende. Under hvert forsøg fik deltagerne lov til at bevæge sig fra siddende stilling til løbebåndet eller til at annullere, hvis det var nødvendigt. Mens de sad, måtte deltagerne kun læse, bruge en bærbar computer eller se fjernsyn, men de blev ellers bedt om at holde sig så stille som muligt hele vejen igennem. I det første forsøg fik deltagerne lov til at indtage vand ad libitum, og det indtagne volumen blev replikeret til det 2. forsøg

I hvert hovedforsøg blev der udtaget baseline-blodprøver før det 1. måltid og hver time i de følgende 5 timer. Yderligere blodprøver blev indsamlet hvert 15. minut efter det første og andet måltid. I alt 14 blodprøver blev indsamlet for hvert forsøg.

Fedtvævskultur og genekspression:

Efter fedtvævsbiopsi og rensning blev væv hakket til ca. 5-10 mg og anbragt direkte i sterile dyrkningsplader (Nunc, Roskilde, Danmark) med endotelcellebasalmedier (ECBM) indeholdende 0,1 % fedtsyrefrit bovint serumalbumin 100 U ml-1 penicillin og 0,1 mg ml-1 streptomycin (Sigma-Aldrich, Gillingham, UK). Fedtvæv blev inkuberet med et endeligt forhold på 100 mg væv pr. 1 ml ECBM-medie i 3 timer. En 37°C, 5 % CO2 og 95 ± 5 % relativ fugtighedsinkubator blev brugt (MCO-18A1C CO2 inkubator; Sanyo, Osaka, Japan). Medier blev overført til sterile eppendorfs og opbevaret ved -80°C efter 3 timers inkubation. Ca. 200 mg fedtvæv blev homogeniseret i 5 ml Trizol i et RNase/DNase-frit sterilt rør (Invitrogen, Paisley, UK) og opbevaret ved -80°C før yderligere analyse.

Prøvestørrelse:

En tidligere lignende undersøgelse rapporterede inkrementelt areal under kurve (iAUC) for insulin under afbrydelse af langvarig siddestilling sammenlignet med forlænget siddestilling på henholdsvis 3337 IE L-1 9h-1 og 2470 IE L-1 9h-1. Baseret på en antaget SD på 600 IE L-1 9h-1, ville vi kræve, at 9 deltagere viser en forskel i iAUC for insulin med 95 % effekt og 5 % alfa.

Statistikker:

Alle data blev præsenteret som middelværdi ± standardafvigelse af middelværdi (SEM). Incrementelt areal under kurve (iAUC) blev beregnet ved hjælp af trapezmetoden og forskelle mellem forsøg analyseret ved hjælp af parrede t-tests. Glucose, insulin, NEFA, adipokiner og cellekulturresultater blev bestemt ved hjælp af en tovejs ANOVA med gentagne målinger ved brug af SPSS version 22 (IBM, Armonk, NY, USA). Hvor signifikante interaktioner (forsøg × tid) blev fundet, blev en post hoc analyse anvendt ved hjælp af t-test med Holm-Bonferroni korrektionen. Enkelte sammenligninger brugte en t-test eller ikke-parametrisk ækvivalent. Statistisk signifikans blev sat til p ≤ 0,05.