L'effetto della rottura della seduta prolungata sul tessuto adiposo e sul metabolismo

Valutazioni preliminari:

Valutazione dell'attività fisica: un monitor combinato frequenza cardiaca/accelerometro è stato indossato per 7 giorni per valutare il dispendio energetico abituale dell'attività fisica del partecipante (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, Regno Unito). Questo è stato attaccato al petto sinistro tramite 2 elettrodi ECG adesivi per 24 ore al giorno tranne durante la doccia/bagno/nuoto.

Analisi della composizione corporea:

La massa corporea è stata valutata utilizzando bilance digitali post-minzionale (TANITA corp., Tokyo, Giappone). La circonferenza della vita e dell'anca è stata valutata sulla base delle linee guida dell'Organizzazione Mondiale della Sanità. La composizione corporea è stata determinata utilizzando l'assorbimetria a raggi X a doppia energia (Discovery, Hologic, Bedford, UK). La massa del tessuto adiposo sottocutaneo e viscerale addominale è stata stimata da una regione centrale tra L1-L4.

Giorni di prova:

Nelle 72 ore precedenti ogni prova principale, ai partecipanti è stato chiesto di astenersi dall'eseguire qualsiasi attività fisica faticosa. Nelle 48 ore precedenti ogni prova principale non era consentito il consumo di alcol/caffeina e nel frattempo è stata completata una registrazione dietetica 48 ore prima della prima prova principale. Ai partecipanti è stato chiesto di replicare questa dieta prima della seconda prova principale. Inoltre, nelle 48 ore precedenti ogni prova principale, ai partecipanti è stato chiesto di limitare i propri passi a meno di 4000 passi al giorno per imitare i modelli di stile di vita sedentario ed eliminare eventuali effetti acuti della recente attività fisica.

Sono state eseguite due prove, tra cui una seduta prolungata e una seduta prolungata di interruzione. Nella prova di rottura, dopo aver consumato il primo pasto, i partecipanti hanno camminato per 2 minuti su un tapis roulant a una velocità di 6,4 km/h ogni 20 minuti per i successivi 180 minuti. Per il resto del tempo i partecipanti si sono seduti sulla sedia. Dopo 180 minuti è stato fornito il secondo pasto. Dopo aver terminato il secondo pasto, i partecipanti hanno continuato per 2 minuti a interrompere l'attività fisica prolungata da seduti alla stessa velocità ogni 20 minuti per i successivi 120 minuti. In totale, i partecipanti hanno eseguito 15 periodi di due minuti di attività fisica durante la prova per un totale di 30 minuti interrompendo l'attività fisica prolungata da seduti. Nella prova seduta prolungata, i partecipanti si sono seduti su una sedia.

L'aria espirata, l'RPE e la frequenza cardiaca sono stati raccolti in due pause di camminata seduta per determinare l'intensità dell'esercizio e il dispendio energetico. Inoltre, due sedute di 5 minuti di aria espirata e frequenza cardiaca sono state prese per calcolare il dispendio energetico totale durante la seduta. Durante ogni prova, i partecipanti potevano passare dalla posizione seduta al tapis roulant o svuotare se necessario. Mentre erano seduti, ai partecipanti era consentito solo leggere, utilizzare un laptop o guardare la televisione, ma in caso contrario veniva chiesto di rimanere il più fermi possibile per tutto il tempo. Nella prima prova, ai partecipanti è stato permesso di consumare acqua ad libitum e il volume ingerito è stato replicato per la seconda prova

In ogni studio principale, i campioni di sangue al basale sono stati raccolti prima del primo pasto e ogni ora per le successive 5 ore. Ulteriori campioni di sangue sono stati raccolti ogni 15 minuti dopo il primo e il secondo pasto. Per ogni prova sono stati raccolti un totale di 14 campioni di sangue.

Coltura del tessuto adiposo ed espressione genica:

Dopo la biopsia e la pulizia del tessuto adiposo, il tessuto è stato tritato a circa 5-10 mg e posto direttamente in piastre di coltura sterili (Nunc, Roskilde, Danimarca) con mezzo basale di cellule endoteliali (ECBM) contenente lo 0,1% di albumina di siero bovino senza acidi grassi 100 U ml-1 di penicillina e 0,1 mg ml-1 di streptomicina (Sigma-Aldrich, Gillingham, Regno Unito). Il tessuto adiposo è stato incubato con un rapporto finale di 100 mg di tessuto per 1 ml di terreno ECBM per 3 ore. È stato utilizzato un incubatore a 37°C, 5% CO2 e 95 ± 5% di umidità relativa (incubatore MCO-18A1C CO2; Sanyo, Osaka, Giappone). Il terreno è stato trasferito in eppendorf sterili e conservato a -80°C dopo 3 ore di incubazione. Circa 200 mg di tessuto adiposo sono stati omogeneizzati in 5 ml di Trizol in una provetta sterile priva di RNasi/DNasi (Invitrogen, Paisley, Regno Unito) e conservati a -80°C prima di ulteriori analisi.

Misura di prova:

Un precedente studio simile ha riportato un aumento dell'area sotto la curva (iAUC) per l'insulina durante la pausa prolungata da seduti rispetto a una seduta prolungata di 3337 UI L-1 9h-1 e 2470 UI L-1 9h-1, rispettivamente. Sulla base di una SD presunta di 600 UI L-1 9h-1, avremmo bisogno che 9 partecipanti mostrassero una differenza nell'iAUC per l'insulina con il 95% di potenza e il 5% di alfa.

Statistiche:

Tutti i dati sono stati presentati come media ± errore standard della media (SEM). L'area incrementale sotto la curva (iAUC) è stata calcolata utilizzando il metodo trapezoidale e le differenze tra le prove analizzate utilizzando i test t accoppiati. Gli esiti di glucosio, insulina, NEFA, adipochine e colture cellulari sono stati determinati utilizzando un ANOVA a due vie con misure ripetute utilizzando SPSS versione 22 (IBM, Armonk, NY, USA). Laddove sono state rilevate interazioni significative (prova × tempo), è stata applicata un'analisi post hoc utilizzando il test t con la correzione di Holm-Bonferroni. I confronti singoli hanno utilizzato un test t o un equivalente non parametrico. La significatività statistica è stata fissata a p ≤ 0,05.