Nye biomarkører i bugspytkirtelkræft ved hjælp af EXPEL-konceptet (PANEXPEL)

Biomarkører, der let kan påvises i væskebiopsier, er af største betydning for diagnosticering og forudsigelse af terapeutisk respons hos alle cancerpatienter. Pancreatisk duktalt adenokarcinom (PDAC) er et eksempel på en dødelig malignitet, der diagnosticeres meget sent på grund af mangel på følsomme og pålidelige markører [1]. Forekomsten og dødeligheden af ​​PDAC vil fordobles i løbet af de næste 15 år, hvilket er hidtil uset blandt alle kræfttyper [2]. Sekundær kræftforebyggelse gennem tidlig diagnosticering af PDAC vil derfor være et væsentligt beredskab til at klare den enorme sundhedsbyrde.

Opdagelse af diagnostiske biomarkører afhænger i det væsentlige af tilgængeligheden af ​​patientmateriale ideelt indsamlet på forskellige tidspunkter under sygdomsprogressionen (f. tidlig læsion, før behandling og efter recidiv). Desværre er det meget vanskeligt at få adgang til friske biopsier fra præ-maligne læsioner til forskningsformål. Disse er nødvendige i deres helhed til histo-patologisk evaluering og diagnose. Evnen til at bruge flydende biopsier (f. serum, urin, spyt) gav løftet om at omgå dette problem, hvilket åbnede adgang til mange forskellige biomolekyler såsom cirkulerende DNA og proteiner. Men efter deres frigivelse fra tumoren fortyndes disse molekyler op til adskillige milliarder gange i blod med molekylære arter, der stammer fra sundt væv [3-4]. Dette hæmmer de novo opdagelse af biomarkører til diagnosticering og forståelse af sygdommen.

For at omgå disse begrænsninger har efterforskerne for nylig udviklet en ny tilgang til biomarkøropdagelse, der er ikke-destruktiv og fuldt ud kompatibel med OMICS-profilering såvel som rutinemæssige kliniske procedurer (5). Sidstnævnte tilgang - kaldet EXPEL - udvinder den interstitielle vævsvæske, der er den rigeste kilde til opløselige, ufortyndede og uforurenede biomarkører. Metoden giver især adgang til proteiner, metabolitter, RNA, DNA og exosomer, hvilket muliggør holistisk opdagelse af biomarkører. På grund af sin ikke-destruktive karakter giver EXPEL for første gang både klinikere og forskere mulighed for at analysere identisk materiale, uden at de stort set har nogen ulemper i deres respektive opgaver. Efterforskerne har for nylig vist evnen af ​​vores metode til at finde nye markører i sammenhæng med dyrebare humane kolorektal cancerprøver. Efterforskerne er således overbevist om, at EXPEL med succes kan anvendes på bugspytkirtelkræft. Ved at kende den vigtige andel af stroma i PDAC (normalt 2/3 af tumormassen), forventes sekretomet af bugspytkirtelcancer at være meget rigere på opløselige "kommunikationsfaktorer", der udveksles mellem cancerceller og værtsvæv.

I klinisk praksis gennemgår de fleste patienter endoskopisk ultralyd med finnålsaspiration/biopsi af bugspytkirtelmassen for at bekræfte diagnosen PDAC. Nålen skylles i en konserveringsvæske Cytolyt® (Methanol 30% og vand 50%) og sendes til patologerne. Mikrobiopsi fikseres i paraffin og analyseres derefter, og væske cytofiltreres for at beholde potentielle tumorceller. Den resterende Cytolyt® væske smides systematisk ud.

Nærværende undersøgelse er baseret på den hypotese, at denne væske, der tidligere var i kontakt med tumorvæv, kunne indeholde vævssekretomet og tillade en omfattende OMICS-analyse af PDAC (alle stadier forvirrede) ved at bruge en "modificeret EXPEL"-procedure. Disse er ideelle betingelser for EXPEL-tilgangen, der ud over at finde nye biomarkører også vil kaste lys over komplekse netværk af kræftcelle-stroma-interaktioner.

Til dette formål sigter efterforskerne mod at udføre proteomisk analyse af konserveringsvæsken (Cytolyt) hos patienter, der gennemgik endoskopisk ultralyd med finnålsaspiration/biopsi for mistænkelig bugspytkirtelmasse på CHU de Montpellier mellem januar 2018 og januar 2019.