Implikation af 5-HT7-receptor i inflammatoriske mekanismer ved multipel sklerose (RESEPTOR 5-HT7)
RESEPTOR 5-HT7: Interessen for 5-HT7 serotoninreceptoren som en biomarkør ved multipel sklerose
Multipel sklerose er en kronisk autoimmun sygdom forbundet med inflammatorisk respons, der er skadelig for centralnervesystemet. Immunologisk ubalance er involveret med Th1- og Th17-celler i sammenhæng med en forstyrrelse af regulatormekanismer som Treg-celler. På trods af mange års forskning er de involverede mekanismer stadig uklare.
Serotonin (5-HT) ser ud til at spille en væsentlig rolle i udviklingen af CNS-inflammatoriske sygdomme og især i MS. Faktisk har flere undersøgelser vist det antiinflammatoriske potentiale af denne neurotransmitter og også dens sårbarhed i inflammatorisk sammenhæng. Desuden har en nylig undersøgelse vist, at 5-HT kan reducere CD4 T-cellers spredning og pro-inflammatoriske cytokiner frigivet in vitro. Interessant nok viste det sig, at behandling, behandling med SSRI'er (selektiv serotoningenoptagelseshæmmer) i en dyremodel af MS, på eksperimentel autoimmun encephalomyelitis, forbedrede den kliniske score og fremmer remission af sygdommen.
Blandt serotoninreceptorer kan 5-HT7-receptoren betragtes som et interessant mål til behandling af neurologiske lidelser forbundet med inflammatorisk sammenhæng. Til stede i mennesker og mus, er denne receptor udtrykt på overfladen af et stort antal celler, såsom T-lymfocytter, makrofager, dendritiske celler såvel som på celler i CNS såsom neuroner, astrocytter og mikroglia.
I betragtning af vigtigheden af de positive celler for 5-HT7-receptoren, i den inflammatoriske kontekst, der observeres ved multipel sklerose, foreslår efterforskerne at studere receptorekspressionen i blodprøver fra multipel sklerosepatienter.
Studieoversigt
Status
Status
Betingelser
Betingelser
Intervention / Behandling
Intervention / Behandling
Detaljeret beskrivelse
I en tidligere translationel undersøgelse (5-HT SEP) blev ekspressionsmodulationen af 5-HT7-receptoren i funktion af immunologisk kontekst undersøgt i forskellige grupper af MS-patienter:
- Gruppe 1: MS-patienter med akut tilbagefald
- Gruppe 2: MS stabile patienter behandlet med Natalizumab
- Gruppe 3: Raske mennesker (fra Etablissement Français du Sang) Ud fra blodceller fra forskellige grupper af individer bestemte efterforskerne procentdelen og intensiteten af ekspression af receptoren på cirkulerende lymfocytter ved flowcytometri.
Forskerne påviste i denne første undersøgelse, at 5-HT7-receptoren hovedsageligt udtrykkes på overfladen af B-lymfocytter sammenlignet med T-lymfocytter.
Interessant nok, mens procentdelen af T-lymfocytter (CD4+, CD8+) forblev uændret mellem de 3 grupper, observerede forskerne, at ekspressionen af R5-HT7 på overfladen af T-lymfocytunderpopulationerne (Th1, Th2, Th17 og Treg) er signifikant øget i blodet hos MS-patienter behandlet med Natalizumab sammenlignet med raske personer og MS-patienter i tilbagefald.
I betragtning af litteraturdata og vores foreløbige resultater, der viser det terapeutiske potentiale af 5-HT7R-ligand i dyremodeller af MS samt opreguleringen af 5-HT7-ekspression i NTZ-behandlede patienter (5-HTSEP-undersøgelse), ønsker efterforskerne at gå videre med disse undersøgelser. Hovedformålet med denne nye translationelle undersøgelse er at demonstrere interessen for 5-HT7 serotoninreceptoren som en biomarkør i den terapeutiske overvågning af patienter, der lider af multipel sklerose.
Forskerne ønsker først at vide, om stigningen i ekspressionen af R5-HT7 på overfladen af lymfocytpopulationer hos stabile MS-patienter skyldes specifikt Natalizumab-behandling, eller om andre behandlinger også ville inducere en lignende effekt. For at besvare dette spørgsmål vil efterforskerne studere ekspressionen af receptoren ikke kun på overfladen af lymfocytceller, men også på overfladen af monocytter, NK-celler og polymorfonukleære celler (celler, der ikke blev undersøgt i det første 5-HTSEP-studie) i tre grupper af enkeltpersoner:
- Gruppe 1: Raske individer, såkaldte "kontrol"-donorer, hvis blodprøver vil blive indsamlet fra EFS (French Blood Establishment)
- Gruppe 2: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk aktivitet af sygdommen behandlet med højeffektiv behandling (Natalizumab eller Ocrelizumab)
- Gruppe 3: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk sygdomsaktivitet behandlet med moderat effektiv behandling (teriflunomid eller fumarat)
Gruppe 1 (raske frivillige) er en kontrolgruppe, der er nødvendig for en problemfri afvikling af undersøgelsen og fortolkningen af resultaterne.
For gruppe 2 er Natalizumab-behandlingen allerede blevet undersøgt under det tidligere 5-HTSEP-studie. Denne nye undersøgelse vil gøre det muligt at 1) sammenligne udtrykket/aktiviteten af receptoren i de tre grupper 2) kontrollere reproducerbarheden af resultaterne sammenlignet med det tidligere studie 3) vurdere eventuelle variationer knyttet til tidsmæssigheden af behandlingen med 2 blod prøver, en første før injektion af Natalizumab, en anden 14 dage senere. I modsætning til 5-HTSEP-studiet, hvor en enkelt prøve 1 måned efter injektion af Natalizumab blev analyseret, ønsker forskerne at tage disse to prøver for at udføre en longitudinel undersøgelse, der gør det muligt at observere udviklingen af ekspressionen af 5-HT7-receptoren som funktion af behandlingens tidsmæssighed.
Gruppe 3 vil vurdere, om andre behandlinger (teriflunomid eller fumarat) kan inducere en effekt svarende til den, der er observeret efter behandling med Natalizumab, som er forbundet med en stigning i R5-HT7-ekspression på overfladen af lymfocytpopulationer hos stabile MS-patienter.
Undersøgelsestype
Undersøgelsestype
Tilmelding (Faktiske)
Tilmelding
Kontakter og lokationer
Studiekontakt
Studiekontakt
- Navn: Maud PALLIX-GUYOT, Dr
- Telefonnummer: +33238575252
- E-mail: maud.pallix-guyot@chr-orleans.fr
Studiesteder
-
-
-
Orléans, Frankrig, 45067
- Chu Orleans
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Prøveudtagningsmetode
Studiebefolkning
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- Mænd og kvinder
- Mellem 18 og 50 år,
- Med multipel sklerose allerede diagnosticeret og opfylder de modificerede Mc Donald-kriterier
- Stabil (ingen tilbagefald inden for de sidste 6 måneder og MRI mindre end et år gammel, uden nye læsioner) og med mindst 1 års behandling med Natalizumab, Ocrelizumab, Teriflunomide eller Fumarate
- Forsøgsperson er medicinsk egnet til at give maksimalt 50 ml ekstra fuldblod
- Patienten har givet sit samtykke til at deltage i undersøgelsen
Ekskluderingskriterier:
- HIV-serologi kendt eller opdaget under denne episode
- Dement patient
- Patient behandlet med kortikosteroider inden for den sidste måned
- Ikke-tilknyttet person eller ikke-begunstiget af en social sikringsordning
- Usamarbejdsvillig patient
- Patient under retsbeskyttelse, værgemål eller kuratorskab
- Gravide eller ammende kvinder
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
Antal grupper/kohorter
Kohorter og interventioner
Gruppe / kohorteGruppe / kohorte |
Intervention / BehandlingIntervention / Behandling |
|---|---|
|
Sunde individer
Gruppe 1: Raske individer, såkaldte "kontrol"-donorer, hvis blodprøver vil blive indsamlet fra EFS (French Blood Establishment)
|
Der vil blive taget blodprøver på tre grupper: Gruppe 1: Raske frivillige, såkaldte "kontrol" donorer, hvis blodprøver vil blive bestilt fra EFS (French Blood Establishment) Gruppe 2: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk aktivitet af sygdommen behandlet med højeffektiv behandling (Natalizumab eller Ocrelizumab) Gruppe 3: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk sygdomsaktivitet behandlet med moderat effektiv behandling (teriflunomid eller fumarat) |
|
Stabile MS-patienter behandlet med højeffektiv behandling
Gruppe 2: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk aktivitet af sygdommen behandlet med højeffektiv behandling (Natalizumab eller Ocrelizumab)
|
Der vil blive taget blodprøver på tre grupper: Gruppe 1: Raske frivillige, såkaldte "kontrol" donorer, hvis blodprøver vil blive bestilt fra EFS (French Blood Establishment) Gruppe 2: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk aktivitet af sygdommen behandlet med højeffektiv behandling (Natalizumab eller Ocrelizumab) Gruppe 3: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk sygdomsaktivitet behandlet med moderat effektiv behandling (teriflunomid eller fumarat) |
|
Stabile MS-patienter behandlet med moderat effektiv behandling
Gruppe 3: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk sygdomsaktivitet behandlet med moderat effektiv behandling (teriflunomid eller fumarat)
|
Der vil blive taget blodprøver på tre grupper: Gruppe 1: Raske frivillige, såkaldte "kontrol" donorer, hvis blodprøver vil blive bestilt fra EFS (French Blood Establishment) Gruppe 2: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk aktivitet af sygdommen behandlet med højeffektiv behandling (Natalizumab eller Ocrelizumab) Gruppe 3: Stabile MS-patienter uden inflammatorisk sygdomsaktivitet behandlet med moderat effektiv behandling (teriflunomid eller fumarat) |
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
5-HT7-receptorekspression på cirkulerende celler
Tidsramme: Dag 1
|
ved hjælp af flowcytometriteknikken på fuldblod vil vi udføre immunfænotypning for at bestemme fluorescensintensiteten af celler, der er positive for receptoren (5-HT7+ celler) (B, T og NK lymfocytter, monocytter og polynukleære celler) i de forskellige grupper af individer.
|
Dag 1
|
Sekundære resultatmål
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Ekspression af 5-HT7-receptoren efter positiv selektion af forskellige cellepopulationer fra PBMC
Tidsramme: Dag 15
|
Efter Ficoll-gradienten vil en del af PBMC (perifere blodmononukleære celler) blive brugt til at studere ekspressionen af 5-HT7-receptoren ved positiv selektion af forskellige cellepopulationer (B-lymfocytter, T-lymfocytter, monocytter) ved hjælp af magnetiske perler.
Målinger af mRNA-ekspression (R5-HT7, 5-HT-synteseenzym, 5-HT-transporter samt markører for inflammation/autofagi) vil blive udført ved RT-qPCR.
|
Dag 15
|
|
Ekspression af de forskellige isoformer af 5-HT7-receptoren på PBMC
Tidsramme: Dag 15
|
Hos mennesker er der tre isoformer, opnået ved alternativ splejsning, af receptoren, 5-HT7a, 5-HT7b, 5-HT7d, som adskiller sig efter længden af deres C-terminale del.
Til dato er der ikke beskrevet nogen forskelle mellem disse isoformer fra et farmakologisk og transduktionsmæssigt punkt.
Det ville imidlertid være interessant at kvantificere dem ved RTqPCR ved hjælp af mRNA fra totale PBMC'er og derefter mRNA fra hovedpopulationerne af PBMC'er, opnået ved magnetisk sortering, for at vurdere deres andel.
|
Dag 15
|
|
Funktionel aktivitet af 5-HT7-receptoren på PBMC: proteinundersøgelser
Tidsramme: Dag 15
|
En del af PBMC'er (mononukleære celler fra perifert blod) vil blive dyrket og stimuleret under forskellige forhold: LPS-stimulering (lipopolysaccharid), PHA-stimulering (phytohæmagglutinin), både stimulering af LPS+PHA eller med agonister og antagonister, samt biased ligander af receptoren .
Efter stimulering vil cellesupernatanter blive opsamlet for at udføre proteinassays ved ELISA-teknik (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay).
Vi ønsker at måle produktionen af pro- og antiinflammatoriske cytokiner (IL-1β, IL-4, TNFα, IL6, IL-17, IFN-γ og IL-10 og andre baseret på litteraturdata) for at evaluere effekten af forskellige betingelser for stimulering af PBMC'er fra 3-gruppen af patienter
|
Dag 15
|
|
Funktionel aktivitet af 5-HT7-receptoren på PBMC: mRNA-ekspressionsundersøgelser
Tidsramme: Dag 15
|
En del af PBMC'er (mononukleære celler fra perifert blod) vil blive dyrket og stimuleret under forskellige forhold: LPS-stimulering (lipopolysaccharid), PHA-stimulering (phytohæmagglutinin), både stimulering af LPS+PHA eller med agonister og antagonister, samt biased ligander af receptoren .
Efter stimulering vil mRNA-ekspressionsmålinger (R5-HT7, 5-HT-synteseenzym, 5-HT-transporter samt markører for inflammation/autofagi) blive udført ved qPCR.
|
Dag 15
|
|
Sammenhæng mellem multipel sklerosebehandling på inflammation og serotoninproduktion i serum
Tidsramme: Dag 15
|
Efter Ficoll-gradient vil serum blive opsamlet.
Serotoninniveauer vil blive målt og forskellige pro- og antiinflammatoriske mediatorer som IL-1β, IL-4, TNFα, IL6, IL8, IL-17, IFN-γ, GM-CSF og IL-10 og andre baseret på litteraturdata, vil blive undersøgt.
|
Dag 15
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Sponsor
Sponsor
Efterforskere
Efterforskere
- Ledende efterforsker: Maud PALLIX-GUYOT, Dr, Chu Orleans
Publikationer og nyttige links
Generelle publikationer
- Sacramento PM, Monteiro C, Dias ASO, Kasahara TM, Ferreira TB, Hygino J, Wing AC, Andrade RM, Rueda F, Sales MC, Vasconcelos CC, Bento CAM. Serotonin decreases the production of Th1/Th17 cytokines and elevates the frequency of regulatory CD4+ T-cell subsets in multiple sclerosis patients. Eur J Immunol. 2018 Aug;48(8):1376-1388. doi: 10.1002/eji.201847525. Epub 2018 Jun 6.
- Yuan XQ, Qiu G, Liu XJ, Liu S, Wu Y, Wang X, Lu T. Fluoxetine promotes remission in acute experimental autoimmune encephalomyelitis in rats. Neuroimmunomodulation. 2012;19(4):201-8. doi: 10.1159/000334095. Epub 2012 Mar 21.
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart (Faktiske)
Studiestart
Primær færdiggørelse (Faktiske)
Primær færdiggørelse
Studieafslutning (Faktiske)
Studieafslutning
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (Faktiske)
Først opslået
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Faktiske)
Sidste opdatering sendt
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Yderligere relevante MeSH-vilkår
- Sygdomme i nervesystemet
- Patologiske processer
- Autoimmune sygdomme
- Sygdomme i immunsystemet
- Demyeliniserende autoimmune sygdomme, CNS
- Autoimmune sygdomme i nervesystemet
- Demyeliniserende sygdomme
- Patologiske tilstande, tegn og symptomer
- Multipel sclerose
- Betændelse
- Undersøgelsesteknikker
- Håndtering af eksemplar
- Kliniske laboratorieteknikker
- Diagnostiske teknikker og procedurer
- Diagnose
- Punkteringer
- Kirurgiske procedurer, operative
- Blodprøveopsamling
Andre undersøgelses-id-numre
Andre undersøgelses-id-numre
- CHRO-2021-07
Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter
Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt
Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .