Virkningen af ​​plasmaopløselig proreninreceptor hos overvægtige og type 2-diabetespatienter

Humane blodprøver vil blive indsamlet prospektivt fra 50 overvægtige patienter, som er indskrevet og planlægger at foretage bariatrisk kirurgi i ambulant bariatrisk kirurgisk klinik ved Tulane University, HSC (Christopher G. Ducoin, MD, MPH; formand for bariatrisk kirurgisk klinik og kirurg, og Shauna Levy, MD, specialist i bariatrisk kirurg). Typen af ​​fedmekirurgi, der anvendes i hver patient, vil blive registreret. Fordi det har vist sig, at der efter 6 måneders fedmeoperation er omkring 50-60% BW tab 15-18, planlægger vi at tage to rør med blodprøver med 5 ml blod hver. Der vil blive udtaget blod under det præoperative besøg og under 3 besøg efter den fedmekirurgiske operation: 1 uge ± 2-3 dage, 1 måned ± 2 uger og 6 måneder ± 1 - 2 måneder. Blodprøver vil blive brugt til plasmamålinger af: glykæmi, HbA1c, lipidprofil (LDL, HDL, triglycerider) og sPRR. Tidspunktet for udtagning af blodprøve vil blive registreret på grund af potentielle effekter af døgnrytme på RAS. Kvantificering af plasma sPRR ved ELISA vil blive udført i Dr. Minolfa Prietos laboratorium på Tulane University School of Medicine. Patientbiologiske prøver vil blive identificeret med en kode, der forbinder prøven med patienten. Efter afslutningen af ​​undersøgelsen vil prøver udelukkende blive brugt til forskning i fedme og T2DM-relaterede tilstande. Baggrundsfaktorer vil omfatte: køn, alder, race, etnicitet, sygesikringsstatus og personlig sygehistorie vil vurdere tilstedeværelsen af ​​en af ​​følgende tilstande: diabetes mellitus eller hypertension (inklusive enhver af følgende behandlinger: antihypertensive lægemidler -ACEi, AT1R-blokkere , diuretika eller calciumantagonister), brug af orale præventionsmidler eller hormonerstatning, tidligere operationer (type, dato), sidste menstruationsdato inklusive enhver menstruationsforstyrrelse, kongestiv hjertesvigt (CHF), perifer vaskulær sygdom (PVD), pulmonal hypertension (PHTN) ), eller iskæmisk hjertesygdom, obstruktiv søvnapnø (OSA), astma, dyb venetrombose/lungeemboli (DVT/PE), gastroøsofageal reflukssygdom (GERD), leversygdom, dyslipidæmi, polycystisk ovariesyndrom, depression, alkoholforbrug, stof misbrug og/eller tobaksbrug. Fysisk undersøgelse vil omfatte: BW, BMI, taljeomkreds, højde, kontor BP (DBP og SBP målt i ambulatoriet med patienten i siddende stilling efter hvile i mindst 5 minutter), og pulsfrekvens Patient biologiske prøver vil blive identificeret ved en kode, der forbinder prøven med patienten. Plasmaprøver til ELISA-målinger vil blive analyseret i to eksemplarer på en blindet måde. ELISA-sæt er kommercielt tilgængelige og fremstillet af IBL America, Inc. Denne analyse udføres rutinemæssigt i PI's laboratorium og er blevet valideret ved hjælp af passende standarder (leveret af fabrikanterne). Vi vil bruge duplikerede eller tredobbelte prøver, når de analyseres. Biologiske kontroller såsom buffer som blindprøve vil blive brugt som tekniske kontroller. Fordi ELISA-kits vil blive anskaffet fra kommercielle leverandører, omfatter autentificering fra sælger(erne) certificeringer af reaktivitet, renhed, applikationer. Disse metoder og resultater er tidligere blevet rapporteret. Interne kontrollers standardkurve for forskellige koncentrationer af sPRR vil blive inkluderet i hver pladeaflæsning til sammenligningsformål. For at reducere bias vil prøver blive analyseret tilfældigt, hvor det er muligt, og inkludere positive standardkontroller med kendte koncentrationer til sammenligningsformål. Både en datahåndteringsplan (outliers, rapport om manglende data) og en statistisk analyseplan (Statistisk analyseplan, endepunkter [primære og sekundære], inklusion til flere tests vil blive brugt. Vores laboratorium har autentificeret sPRR ELISA og sammenlignet med målinger offentliggjort af andre. For at sikre påvisning af meningsfulde og realistiske forskelle er prøvenumrene baseret på kravet om at udføre hver analyse (beregninger af effekt og prøvestørrelse). For at sikre reproducerbarhed vil alle protokoller blive rapporteret, herunder alle de eksperimentelle forhold i detaljer. Efter afslutningen af ​​undersøgelsen vil prøver udelukkende blive brugt til fedme og DM-relateret forskning. Mål 1: Bestem om plasmaniveauer af sPRR falder hos overvægtige patienter efter fedmekirurgi. Videnskabelig forudsætning og begrundelse: Hos overvægtige rotter forstærkes PRR og renin to gange i fedtvæv. Foreløbige data fra mus med T2DM-induceret af kost med højt fedtindhold viste tilstedeværelse af en fænotype karakteriseret ved fedme, øget SBP, glukoseintolerance, markant insulinresistens og øgede niveauer af sPRR i plasma med 18 uger på diætregimet. Disse mus viste også øget PRR-ekspression i adipocytter fra visceralt fedt. Vores foreløbige undersøgelse viste, at plasma-sPRR-niveauer er højere hos magre mænd end hos magre kvinder. I modsætning hertil var plasma-sPRR-niveauer højere hos overvægtige diabetiske kvinder end hos mænd. Desuden fandt vi, at overvægtige patienter med T2DM udviste en positiv sammenhæng mellem plasma sPRR og BMI hos kvinder, men ikke hos mænd. Formålet med dette er at teste hypotesen om, at fedtvæv er den største leverandør af plasma-sPRR hos overvægtige patienter.

Eksperimentelt design: kvantificeringer vil blive udført i plasmaprøver opnået fra 50 overvægtige patienter, der gennemgår bariatrisk kirurgi. Plasmaprøver vil blive udtaget før fedmekirurgi (før-op besøg) og ved hvert af 2 opfølgningsbesøg (1 måned ± 1 - 2 uger og efter 6 måneder ± 1-2 måneder) til vurdering af plasma sPRR ved ELISA ( Prieto's Lab, Tulane University) (Se Power Analysis). Disse prøver vil blive indhentet fra patienter fra Bariatric and Minimal Invasive Surgery Clinic af Christopher G. Ducoin, MD ved Tulane HSC (Collaborator). Sammenligninger vil blive etableret med humane biologiske afidentificerede plasmaprøver fra magre kontrolpatienter, som allerede er blevet indsamlet og er tilgængelige som en del af Tulane Obesity-Endocannabinoids Study (Tina Thethi, M.D, Collaborator). Efter patientens samtykkeaftale vil patienten blive undersøgt i Bariatric and Minimal Invasive Surgery Clinic for vitale tegn, BP (SBP og DBP, taget ved sphygmomanometri), talje-til-hofte-forhold og BMI. Fastende blodprøver vil blive udtaget ved venepunktur for glykæmi, HbA1c, lipidprofil (LDL, HDL, triglycerider) og sPRR. Baggrundsfaktorer og personlig sygehistorie vil blive taget som beskrevet i afsnittet Studiedesign. Effektanalyse og statistiske overvejelser: Alle resultater på hvert tidspunkt vil blive opsummeret som middelværdi og standardafvigelse (SD). Variansanalysen med gentagne mål og parret test vil blive udført for at evaluere ændringen på tværs af tidspunkterne. De historiske data tyder på, at omkring 10 patienter får fedmekirurgi om måneden i den ambulante bariatriske klinik ved Tulane University; vi forventer, at mindst 50 kvalificerede patienter vil blive rekrutteret i de første 6 måneder af dette projekt.

Mål 2: Definer om ændringer i plasmaniveauer af sPRR korrelerer med forbedring af T2DM-parametre hos overvægtige patienter efter vægttab efter fedmekirurgi. Videnskabelige forudsætninger og begrundelse: Fedme og T2DM er vigtige risikofaktorer for CVD.

Aktivering af RAS er impliceret i patogenesen af ​​CV-risikofaktorer. Ofte forbedres T2DM umiddelbart efter fedmekirurgi og endnu mere med det vedvarende betydelige BW-tab. Det er dog stadig uvist, om fedtvæv er den største leverandør af sPRR i plasma fra overvægtige patienter, og om plasma sPRR bidrager til T2DM og CV-komplikationer hos disse patienter. Brug af sPRR-hæmmere ville udgøre en ny terapeutisk tilgang til at håndtere fedme hos kvinder og CV-komplikationer. Vi vil teste hypotesen om, at fald i niveauer af plasma sPRR efter fedmekirurgi er forbundet med forbedringen i glykæmisk kontrol og lipidprofil hos overvægtige patienter. Analyse og statistiske overvejelser: Flere lineære regressionsmodeller vil blive brugt til at måle sammenhængen mellem sPRR, glykæmi, HbA1c, lipidprofil (LDL, HDL, triglycerider). Der vil blive etableret sammenligninger med værdier før og 2 besøg efter operationen. Den foreslåede n=50 vil være tilstrækkelig til at passe modeller med op til 7 prædiktorer og til at have 80 % effekt til at detektere en signifikant sammenhæng mellem sPRR og en hvilken som helst prædiktor, hvis mindst 12,25 % af den totale variabilitet af sPRR er taget højde for af prædiktoren . Ujusterede og justerede korrelationer og tilhørende P-værdier vil blive rapporteret.

Forventede resultater, faldgruber og alternativ tilgang Mål 1: Så vidt vi ved, har ingen tidligere undersøgelse defineret forholdet mellem plasma sPRR-fedme-T2DM eller har etableret korrelationerne mellem plasma sPRR og BMI, WHR eller HbA1c. Vi forventer, at plasma-sPRR-niveauer vil være højere hos overvægtige end i magre kontrolprøver, og at sammenlignet med kontrol vil plasma-sPRR-niveauer være højere hos T2DM-overvægtige patienter. Vi forventer, at plasma-sPRR-niveauer vil være positivt forbundet med fedme hos T2DM-overvægtige kvinder, men ikke hos mandlige modparter efter justering for baggrundsfaktorer, hvilket tyder på, at stigninger i plasma-sPRR hos kvinder kan skyldes hyperandrogenæmi. Mål 2: vil definere om ændringer i plasma sPRR korrelerer med forbedring af T2DM og lipidprofil hos overvægtige patienter efter fedmekirurgi. Baseret på vores stærke foreløbige data forventer vi, at resultaterne vil tillade en bedre forståelse af rollen af ​​sPRR og metaboliske risikofaktorer hos overvægtige patienter. Potentielle faldgruber: Fordi patienter, der gennemgår fedmekirurgi er mere almindeligt kvinder, hvis rekruttering/tilmelding af mænd resultater for at være lave, vil vi begrunde analysen med kvinder til mænd frekvensdataforhold på 4:1,19 Alternativ tilgang: Vi forventede, at resultaterne tillader sammenligning indvirkningen af ​​de direkte effekter af fedmekirurgi versus de langsigtede virkninger (sandsynligvis relateret til vægttab) på plasma sPRR og insulinresistens. Hvis rekrutteringen er mindre end forventet, vil vi kontakte andre lokale fedmekirurgiske centre, herunder Ochsner Clinic.