Effekten av plasmalöslig proreninreceptor hos överviktiga och typ 2-diabetespatienter

Mänskliga blodprover kommer att samlas in prospektivt från 50 överviktiga patienter, som är inskrivna och planerar att genomföra bariatrisk kirurgi i den polikliniska bariatriska kirurgiska kliniken vid Tulane University, HSC (Christopher G. Ducoin, MD, MPH; ordförande för Bariatric Surgery Clinic and Surgeon, och Shauna Levy, MD, Bariatric Surgeon Specialist). Typ av bariatrisk kirurgi som används i varje patient kommer att registreras. Eftersom det har visat sig att det efter 6 månaders bariatrisk kirurgi är ca 50-60% kroppsviktsförlust 15-18 planerar vi att ta två rör med blodprov med 5 ml blod vardera. Blod kommer att tas under pre-Op-besöket och under 3 besök efter bariatrisk operation: 1 vecka ± 2-3 dagar, 1 månad ± 2 veckor och 6 månader ± 1 - 2 månader. Blodprover kommer att användas för plasmamätningar av: glykemi, HbA1c, lipidprofil (LDL, HDL, triglycerider) och sPRR. Tidpunkten för blodprovtagning kommer att registreras på grund av potentiella effekter av dygnsrytmer på RAS. Kvantifiering av plasma sPRR med ELISA kommer att utföras i Dr. Minolfa Prietos laboratorium vid Tulane University School of Medicine. Patientbiologiska prover kommer att identifieras med en kod som länkar provet till patienten. Efter avslutad studie kommer prover att användas uteslutande för forskning om fetma och T2DM-relaterade tillstånd. Bakgrundsfaktorer inkluderar: kön, ålder, ras, etnicitet, sjukförsäkringsstatus och personlig medicinsk historia kommer att bedöma närvaron av något av följande tillstånd: diabetes mellitus eller hypertoni (inklusive någon av följande behandlingar: antihypertensiva läkemedel -ACEi, AT1R-blockerare , diuretika eller kalciumantagonister), användning av p-piller eller hormonersättning, tidigare operationer (typ, datum), sista menstruationsdatum inklusive eventuell oregelbunden menstruation, kongestiv hjärtsvikt (CHF), perifer kärlsjukdom (PVD), pulmonell hypertoni (PHTN) ), eller ischemisk hjärtsjukdom, obstruktiv sömnapné (OSA), astma, djup ventrombos/lungemboli (DVT/PE), gastroesofageal refluxsjukdom (GERD), leversjukdom, dyslipidemi, polycystiskt ovariesyndrom, depression, alkoholanvändning, substans missbruk och/eller tobaksbruk. Fysisk undersökning kommer att inkludera: BW, BMI, midjeomkrets, höjd, kontorstryck (DBP och SBP mätt på polikliniken med patienten i sittande ställning efter att ha vilat i minst 5 minuter) och pulsfrekvens Patientbiologiska prover kommer att identifieras genom en kod som länkar provet med patienten. Plasmaprover för ELISA-mätningar kommer att analyseras i duplikat på ett blindat sätt. ELISA-kit är kommersiellt tillgängliga och tillverkas av IBL America, Inc. Denna analys utförs rutinmässigt i PI:s laboratorium och har validerats med lämpliga standarder (tillhandahållna av tillverkarna). Vi kommer att använda dubbla eller tredubbla prover när de analyseras. Biologiska kontroller som buffert som blank kommer att användas som tekniska kontroller. Eftersom ELISA-kit kommer att erhållas från kommersiella leverantörer, inkluderar autentisering av leverantören/leverantörerna certifieringar av reaktivitet, renhet, applikationer. Dessa metoder och resultat har tidigare rapporterats. Internkontrollstandardkurvor för olika koncentrationer av sPRR kommer att inkluderas i varje plattavläsning för jämförelseändamål. För att minska bias kommer prover att analyseras slumpmässigt när det är möjligt och inkluderar positiva standardkontroller med kända koncentrationer för jämförelsesyften. Både en datahanteringsplan (avvikelser, rapport om saknade data) och en statistisk analysplan (Statistisk analysplan, endpoints [primära och sekundära], inkludering för flera tester kommer att användas. Vårt labb har autentiserat sPRR ELISA och jämfört med mätningar publicerade av andra. För att säkerställa upptäckten av meningsfulla och realistiska skillnader baseras provsiffrorna på kravet att utföra varje analys (effekt- och provstorleksberäkningar). För att säkerställa reproducerbarhet kommer alla protokoll att rapporteras inklusive alla experimentella förhållanden i detalj. Efter avslutad studie kommer prover att användas uteslutande för fetma och DM-relaterad forskning. Syfte 1: Bestäm om plasmanivåerna av sPRR minskar hos överviktiga patienter efter bariatrisk operation. Vetenskaplig premiss och motivering: Hos feta råttor förstärks PRR och renin två gånger i fettvävnad. Preliminära data från möss med T2DM-inducerad av diet med hög fetthalt visade närvaron av en fenotyp som kännetecknas av fetma, ökad SBP, glukosintolerans, markant insulinresistens och ökade nivåer av sPRR i plasma med 18 veckor på dietregimen. Dessa möss visade också ökat PRR-uttryck i adipocyter från visceralt fett. Vår preliminära studie visade att plasma-sPRR-nivåer är högre hos magra män än hos magra kvinnor. Däremot var plasma-sPRR-nivåerna högre hos feta diabetiker än hos män. Dessutom fann vi att överviktiga patienter med T2DM uppvisade en positiv korrelation mellan plasma sPRR och BMI hos kvinnor men inte hos män. Syftet med detta är att testa hypotesen att fettvävnad är den största leverantören av plasma-sPRR hos överviktiga patienter.

Experimentell design: kvantifieringar kommer att göras i plasmaprover erhållna från 50 överviktiga patienter som genomgår bariatrisk operation. Plasmaprover kommer att tas före bariatrisk kirurgi (före operationsbesök) och vid vart och ett av 2 uppföljningsbesök (1 månad ± 1 - 2 veckor och efter 6 månader ± 1-2 månader) för bedömning av plasma sPRR med ELISA ( Prieto's Lab, Tulane University) (Se Power Analysis). Dessa prover kommer att erhållas från patienter från Bariatric and Minimal Invasive Surgery Clinic av Christopher G. Ducoin, MD vid Tulane HSC (Collaborator). Jämförelser kommer att upprättas med humana biologiska avidentifierade plasmaprover från magra kontrollpatienter som redan har samlats in och är tillgängliga som en del av Tulane Obesity-Endocannabinoids Study (Tina Thethi, M.D, Collaborator). Efter patientens samtycke kommer patienten att undersökas i Bariatric and Minimal Invasive Surgery Clinic för vitala tecken, BP (SBP och DBP, tagna med sfygmomanometri), midja-till-höft-förhållande och BMI. Fastande blodprov kommer att tas genom venpunktion för glykemi, HbA1c, lipidprofil (LDL, HDL, triglycerider) och sPRR. Bakgrundsfaktorer och personlig medicinsk historia kommer att tas enligt beskrivningen i avsnittet Studiedesign. Effektanalys och statistiska överväganden: Alla utfall vid varje tidpunkt kommer att sammanfattas som medelvärde och standardavvikelse (SD). Variansanalysen med upprepade mått och det parade testet kommer att utföras för att utvärdera förändringen över tidpunkterna. De historiska uppgifterna tyder på att cirka 10 patienter får bariatrisk kirurgi per månad i den polikliniska bariatriska kliniken vid Tulane University; vi förväntar oss att minst 50 kvalificerade patienter kommer att rekryteras under de första 6 månaderna av detta projekt.

Syfte 2: Definiera huruvida förändringar i plasmanivåer av sPRR korrelerar med förbättring av T2DM-parametrar hos överviktiga patienter efter viktminskning efter bariatrisk operation. Vetenskaplig premiss och motivering: Fetma och T2DM är stora riskfaktorer för hjärt-kärlsjukdom.

Aktivering av RAS är inblandad i patogenesen av CV-riskfaktorer. Ofta förbättras T2DM omedelbart efter bariatrisk kirurgi och ännu mer med den ihållande betydande BW-förlusten. Det är dock fortfarande okänt om fettvävnad är den största leverantören av sPRR i plasma från överviktiga patienter, och om plasma sPRR bidrar till T2DM och CV-komplikationer hos dessa patienter. Användning av sPRR-hämmare skulle utgöra en ny terapeutisk metod för att hantera fetma hos kvinnor och CV-komplikationer. Vi kommer att testa hypotesen att minskningar i nivåer av plasma-sPRR efter bariatrisk kirurgi är associerad med förbättringen av glykemisk kontroll och lipidprofil hos överviktiga patienter. Analys och statistiska överväganden: Flera linjära regressionsmodeller kommer att användas för att mäta sambandet mellan sPRR, glykemi, HbA1c, lipidprofil (LDL, HDL, triglycerider). Jämförelser kommer att upprättas med värden före och 2 besök efter operationen. Det föreslagna n=50 kommer att räcka för att passa modeller med upp till 7 prediktorer och för att ha 80 % effekt för att detektera ett signifikant samband mellan sPRR och en prediktor om minst 12,25 % av den totala variabiliteten av sPRR står för av prediktorn . Ojusterade och justerade korrelationer och tillhörande P-värden kommer att rapporteras.

Förväntade resultat, fallgropar och alternativ tillvägagångssätt Mål 1: Såvitt vi vet har ingen tidigare studie definierat sambandet mellan plasma sPRR-fetma-T2DM eller har fastställt sambanden mellan plasma sPRR och BMI, WHR eller HbA1c. Vi förväntar oss att plasma-sPRR-nivåerna kommer att vara högre hos feta än i magra kontrollprover, och att plasma-sPRR-nivåerna kommer att vara högre i T2DM-överviktiga patienter jämfört med kontroll. Vi förväntar oss att plasma-sPRR-nivåer kommer att vara positivt associerade med fetma hos T2DM-överviktiga kvinnor men inte hos manliga motsvarigheter efter justering för bakgrundsfaktorer, vilket tyder på att ökningar av plasma-sPRR hos kvinnor kan bero på hyperandrogenemi. Syfte 2: kommer att definiera huruvida förändringar i plasma-sPRR korrelerar med förbättringen av T2DM och lipidprofil hos överviktiga patienter efter bariatrisk kirurgi. Baserat på våra starka preliminära data, förväntar vi oss att resultaten kommer att ge bättre förståelse för rollen av sPRR och metabola riskfaktorer hos överviktiga patienter. Potentiella fallgropar: Eftersom patienter som genomgår överviktsoperationer oftare är kvinnor, om resultatet för rekrytering/rekrytering av män är lågt, kommer vi att motivera analysen med frekvensdataförhållande mellan kvinnor och män på 4:1,19 Alternativt tillvägagångssätt: Vi förväntade oss att resultaten gör det möjligt att jämföra. effekterna av de direkta effekterna av bariatrisk operation kontra de långsiktiga effekterna (förmodligen relaterade till viktminskning) på plasma-sPRR och insulinresistens. Om rekryteringen är mindre än förväntat, kommer vi att nå ut till andra lokala bariatriska kirurgicenter, inklusive Ochsner Clinic.