Effekten af ​​fækal mikrobiel transplantationsbehandling hos voksne med atopisk dermatitis

Prospektiv enkeltblindet placebokontrolleret cross-over-undersøgelse blandt voksne patienter, der lider af moderat til svær atopisk dermatitis (AD), som ikke reagerer tilstrækkeligt på topisk og systemisk behandling. Alle patienter modtager 2 placebotransplantationer med 2 ugers mellemrum efterfulgt af 4 fækale mikrobielle transplantationer (FMT'er) fra raske donorer med 2 ugers mellemrum. Patienterne fik lov til at fortsætte med deres baseline medicinske topiske behandling, inklusive fugtighedscreme og glukokortikoider, i løbet af undersøgelsesperioden, men ingen ny behandling blev påbegyndt. Sværhedsgraden af ​​AD og den fækale mikrobiomprofil blev evalueret ved at score atopisk dermatitis (SCORAD-score) og den ugentlige brug af topikale kortikosteroider i begyndelsen af ​​undersøgelsen, før hver FMT og 1-6 måneder efter den sidste FMT .

I løbet af undersøgelsesperioden fik patienterne kun lov til at bruge topisk terapi, herunder blødgørende midler og glukokortikoider eller calcineurinhæmmere.

FMT forberedelse og levering:

Frivillige donorer var raske, ikke-gravide voksne i alderen 18 til 50 år med et normalt kropsmasseindeks. Frivillige donorer blev udelukket på grund af enhver væsentlig sygehistorie eller for enhver brug af antibiotika i de foregående 3 måneder. Kandidater var berettigede i henhold til det israelske sundhedsministeriums retningslinjer, som omfatter en fysisk undersøgelse og laboratoriescreeningstests, herunder fækale enteriske patogener, serumantistoffer mod hepatitis A, B og C; humant immundefektvirus; HTLV og Treponema pallidum samt cøliaki, CBC (og yderligere tests, der overholder retningslinjerne fra det israelske sundhedsministerium). Afføring blev leveret inden for få minutter efter afføring i en ren lukket plastikbeholder og blev behandlet på Tel Aviv Medical Centers afføringsbank for at forberede kapsuleret FMT. Kort fortalt blev fækalt materiale fortyndet med normalt saltvand (600 ml/100 g fækalt materiale), filtreret og koncentreret præparatet i en centrifuge. Pelleten blev suspenderet i sterilt saltvand og glycerol (20%), der blev tilsat som et bakterielt kryobeskyttelsesmiddel. Dette materiale blev derefter pipetteret i syrefaste kapsler, som blev lukket og derefter sekundært forseglet med yderligere sæt kapsler. Kapslerne blev opbevaret frosne ved -80°C. Placebo-kapsler var visuelt identiske og indeholdt kun fortyndet glycerol.

Kapslet FMT procedure:

FMT blev indgivet i to doser af 15 FMT-kapsler på to på hinanden følgende dage (i alt 30 kapsler) på bakterioterapiklinikken i Tel Avivs lægecenter (TLVMC). På indgivelsesdagen blev kapsler frosset ved -80°C taget ud af fryseren og transporteret til klinikken på is. Femten kapsler blev givet individuelt til patienten, og patienten indtog kapslerne med det samme med noget vand. Patienterne blev bedt om at faste natten over før kapselindtagelse.

Fækal mikrobiel analyse:

For at undersøge, om den kliniske effekt kan medieres af kolonisering af nye bakteriestammer, udviklede efterforskerne en robust og følsom metode til at beregne parvis DNA-sekvensforskel mellem bakteriestammer af samme art på tværs af forskellige metagenomiske prøver. Donorafføringsprøver, der blev brugt til FMT-kapsler, og afføringsprøver, der blev indsamlet fra patienterne i løbet af undersøgelsesperioden, blev sekventeret i metagenomiske aflæsninger. Aflæsninger, der blev kortlagt, blev stablet op for at opnå per-position variantinformation for hver påvist art. Forskel i varianten af ​​en bestemt art ved en given position mellem to prøver blev defineret som at have ingen skæring mellem sættet af detekterede alleler i de to prøver, der sammenlignes. Den estimerede arts-DNA-sekvensforskel for et par prøver er så antallet af forskellige positioner divideret med det samlede antal positioner, der sammenlignes.