Az atópiás dermatitiszben szenvedő felnőttek széklet-mikrobiális transzplantációs kezelésének hatékonysága

Prospektív, egyszeresen vak, placebo-kontrollos keresztezett vizsgálat középsúlyos-súlyos atópiás dermatitisben (AD) szenvedő felnőtt betegek körében, akik nem reagáltak megfelelően a helyi és szisztémás kezelésre. Minden beteg 2 hetes különbséggel 2 placebo-transzplantációt kap, majd 4 széklet-mikrobiális transzplantációt (FMT) egészséges donoroktól 2 hetes különbséggel. A betegek folytathatták a kiindulási helyi orvosi kezelést, beleértve a hidratáló szereket és a glükokortikoidokat, a vizsgálati időszak alatt, de új terápia nem kezdődött. Az AD súlyosságát és a széklet mikrobiom profilját a Scoring Atopic Dermatitis Score (SCORAD pontszám), valamint a lokális kortikoszteroidok heti alkalmazásával értékelték a vizsgálat elején, minden FMT előtt és 1-6 hónappal az utolsó FMT után. .

A vizsgálati időszak alatt a betegek csak helyi terápiát használhattak, beleértve a bőrpuhító szereket és a glükokortikoidokat vagy a kalcineurin inhibitorokat.

FMT előkészítés és szállítás:

Az önkéntes donorok egészséges, nem terhes felnőttek voltak, 18 és 50 év közöttiek, normál testtömeg-indexszel. Az önkéntes donorokat kizártuk bármilyen jelentős kórtörténet vagy az előző 3 hónap során antibiotikum-használat miatt. A jelöltek megfeleltek az izraeli egészségügyi minisztérium iránymutatásainak, amelyek magukban foglalják a fizikális vizsgálatot és a laboratóriumi szűrővizsgálatokat, beleértve a széklet bélben lévő kórokozóit, valamint a hepatitis A, B és C elleni szérum antitesteket; humán immunhiány vírus; HTLV és Treponema pallidum, valamint cöliákia, CBC (és további vizsgálatok, amelyek megfelelnek az izraeli Egészségügyi Minisztérium irányelveinek). A székletet a székletürítés után perceken belül egy tiszta, zárt műanyag edényben szállították ki, és a Tel Aviv Medical Center székletbankjában dolgozták fel a kapszulázott FMT elkészítésére. Röviden, a székletanyagot normál sóoldattal (600 ml/100 g széklet) hígítottuk, szűrtük, és a készítményt centrifugában koncentráltuk. A pelletet steril sóoldatban és glicerinben (20%) szuszpendáltuk, amelyet bakteriális krioprotektánsként adtunk hozzá. Ezt az anyagot ezután saválló kapszulákba pipettáztuk, amelyeket lezártunk, majd másodsorban további kapszulakészlettel lezártuk. A kapszulákat fagyasztva tároltuk -80 °C-on. A placebo kapszulák vizuálisan azonosak voltak, és csak hígított glicerint tartalmaztak.

Kapszulázott FMT eljárás:

Az FMT-t két adagban, 15 FMT kapszulában, két egymást követő napon (összesen 30 kapszula) adták be a Tel Aviv Medical Center (TLVMC) Bakterioterápiás klinikáján. A beadás napján a -80°C-ra fagyasztott kapszulákat kivettük a fagyasztóból és jégen szállították a klinikára. Tizenöt kapszulát egyenként adtunk át a páciensnek, és a beteg azonnal lenyelte a kapszulát kevés vízzel. A betegeket arra kérték, hogy egy éjszakán át koplaljanak a kapszula bevétele előtt.

Széklet mikrobiológiai elemzése:

Annak megvizsgálására, hogy a klinikai hatást közvetítheti-e új baktériumtörzsek kolonizációja, a kutatók robusztus és érzékeny módszert dolgoztak ki az azonos fajba tartozó baktériumtörzsek közötti DNS-szekvencia-különbségek páronkénti kiszámítására különböző metagenomikai mintákon. Az FMT kapszulákhoz használt donor székletmintákat és a betegektől a vizsgálati időszakban gyűjtött székletmintákat metagenomikai leolvasásokba szekvenáltuk. A feltérképezett leolvasásokat felhalmozták, hogy minden észlelt fajra vonatkozóan pozíciónkénti variáns információkat kapjanak. Egy adott faj variánsában egy adott pozícióban két minta között fennálló különbséget úgy határoztuk meg, hogy nincs metszéspontja a két összehasonlított mintában kimutatott allélkészlet között. A becsült faji DNS-szekvencia-különbség egy pár minta esetén a különböző pozíciók száma osztva az összehasonlított pozíciók teljes számával.