Effekten av fekal mikrobiell transplantationsbehandling hos vuxna med atopisk dermatit

Prospektiv enkelblind placebokontrollerad cross-over-studie, bland vuxna patienter som lider av måttlig till svår atopisk dermatit (AD), som inte svarar tillräckligt på lokal och systemisk behandling. Alla patienter får 2 placebotransplantationer med 2 veckors mellanrum följt av 4 fekala mikrobiella transplantationer (FMT) från friska donatorer med 2 veckors mellanrum. Patienterna fick fortsätta med sin medicinska topikala behandling, inklusive fuktighetskräm och glukokortikoider, under studieperioden, men ingen ny behandling påbörjades. Svårighetsgraden av AD och den fekala mikrobiomprofilen utvärderades med poängsättningen för atopisk dermatit (SCORAD-poäng) och den veckovisa användningen av topikala kortikosteroider, i början av studien, före varje FMT och 1-6 månader efter den senaste FMT .

Under studieperioden fick patienterna endast använda topikal terapi inklusive mjukgörande medel och glukokortikoider eller kalcineurinhämmare.

FMT förberedelse och leverans:

Frivilliga donatorer var friska, icke-gravida vuxna i åldern 18 till 50 år, med ett normalt kroppsmassaindex. Frivilliga donatorer exkluderades för någon signifikant medicinsk historia eller för användning av antibiotika under de föregående 3 månaderna. Kandidater var valbara enligt det israeliska hälsoministeriets riktlinjer som inkluderar en fysisk undersökning och laboratoriescreeningtest inklusive fekala enteriska patogener, serumantikroppar mot hepatit A, B och C; humant immunbristvirus; HTLV och Treponema pallidum samt celiaki, CBC (och ytterligare tester som följer riktlinjerna från det israeliska hälsoministeriet). Avföring levererades inom några minuter efter avföring i en ren stängd plastbehållare och bearbetades vid Tel Aviv Medical Centers avföringsbank för att förbereda kapslad FMT. Kortfattat späddes fekalt material med normal koksaltlösning (600 ml/100 g fekalt material), filtrerades och koncentrerades beredningen i en centrifug. Pelleten suspenderades i steril koksaltlösning och glycerol (20%) som tillsattes som ett bakteriellt kryoskyddsmedel. Detta material pipetterades sedan i syraresistenta kapslar, som stängdes och förseglades sedan sekundärt med ytterligare uppsättning kapslar. Kapslar förvarades frysta vid -80°C. Placebokapslar hade identiska visuellt och innehöll endast utspädd glycerol.

Kapsulerad FMT-procedur:

FMT administrerades i två doser om 15 FMT-kapslar under två på varandra följande dagar (totalt 30 kapslar), på bakterioterapikliniken vid Tel Avivs medicinska center (TLVMC). På administreringsdagen togs kapslar frysta vid -80°C ut ur frysen och transporterades till kliniken på is. Femton kapslar gavs individuellt till patienten och patienten fick i sig kapslarna omedelbart med lite vatten. Patienterna ombads att fasta över natten före kapselintag.

Fekal mikrobiell analys:

För att undersöka om den kliniska effekten kan förmedlas genom kolonisering av nya bakteriestammar, utvecklade forskarna en robust och känslig metod för att beräkna parvisa DNA-sekvensskillnader mellan bakteriestammar av samma art över distinkta metagenomiska prover. Donatoravföringsprover som användes för FMT-kapslar och avföringsprover som samlades in från patienterna under studieperioden sekvenserades till metagenomiska avläsningar. Avläsningar som kartlades staplades upp för att erhålla variantinformation per position för varje upptäckt art. Skillnaden i varianten av en viss art vid en given position mellan två prover definierades som att den inte hade någon skärning mellan uppsättningen av detekterade alleler i de två proverna som jämfördes. Den uppskattade artens DNA-sekvensskillnad för ett par av prover är sedan antalet olika positioner dividerat med det totala antalet positioner som jämförs.