Wirksamkeit der fäkalen mikrobiellen Transplantationsbehandlung bei Erwachsenen mit atopischer Dermatitis

Prospektive, einfach verblindete, Placebo-kontrollierte Crossover-Studie mit erwachsenen Patienten, die an mittelschwerer bis schwerer atopischer Dermatitis (AD) leiden und unzureichend auf eine topische und systemische Behandlung ansprechen. Alle Patienten erhalten 2 Placebo-Transplantationen im Abstand von 2 Wochen, gefolgt von 4 fäkalen mikrobiellen Transplantationen (FMTs) von gesunden Spendern im Abstand von 2 Wochen. Die Patienten durften während des Studienzeitraums mit ihrer topischen medizinischen Grundbehandlung, einschließlich Feuchtigkeitscremes und Glukokortikoiden, fortfahren, aber es wurde keine neue Therapie begonnen. Der Schweregrad der AD und das fäkale Mikrobiomprofil wurden anhand des Scoring Atopic Dermatitis Score (SCORAD-Score) und der wöchentlichen Anwendung von topischen Kortikosteroiden zu Beginn der Studie, vor jedem FMT und 1-6 Monate nach dem letzten FMT bewertet .

Während des Studienzeitraums durften die Patienten nur topische Therapien einschließlich Weichmachern und Glucocorticoiden oder Calcineurin-Inhibitoren anwenden.

FMT-Vorbereitung und -Lieferung:

Freiwillige Spender waren gesunde, nicht schwangere Erwachsene im Alter von 18 bis 50 Jahren mit einem normalen Body-Mass-Index. Freiwillige Spender wurden aufgrund einer signifikanten medizinischen Vorgeschichte oder einer Verwendung von Antibiotika in den vorangegangenen 3 Monaten ausgeschlossen. Die Kandidaten waren gemäß den Richtlinien des israelischen Gesundheitsministeriums geeignet, die eine körperliche Untersuchung und Labor-Screening-Tests umfassen, einschließlich fäkaler enterischer Krankheitserreger, Serumantikörper gegen Hepatitis A, B und C; menschlicher Immunschwächevirus; HTLV und Treponema pallidum sowie Zöliakie, CBC (und zusätzliche Tests, die den Richtlinien des israelischen Gesundheitsministeriums entsprechen). Der Stuhl wurde innerhalb von Minuten nach dem Stuhlgang in einem sauberen, verschlossenen Kunststoffbehälter geliefert und in der Stuhlbank des Tel Aviv Medical Center verarbeitet, um gekapseltes FMT herzustellen. Kurz gesagt wurde das Fäkalienmaterial mit normaler Kochsalzlösung (600 ml/100 g Fäkalienmaterial) verdünnt, filtriert und das Präparat in einer Zentrifuge konzentriert. Das Pellet wurde in steriler Kochsalzlösung und Glycerin (20 %) suspendiert, das als bakterielles Kälteschutzmittel zugesetzt wurde. Dieses Material wurde dann in säurebeständige Kapseln pipettiert, die verschlossen und dann sekundär mit einem zusätzlichen Kapselsatz verschlossen wurden. Kapseln wurden gefroren bei –80°C gelagert. Placebo-Kapseln waren optisch identisch und enthielten nur verdünntes Glycerin.

Gekapseltes FMT-Verfahren:

FMT wurde in zwei Dosen von 15 FMT-Kapseln an zwei aufeinanderfolgenden Tagen (insgesamt 30 Kapseln) in der Bacteriotherapy-Klinik des medizinischen Zentrums von Tel Aviv (TLVMC) verabreicht. Am Tag der Verabreichung wurden die bei –80°C gefrorenen Kapseln aus dem Gefrierschrank genommen und auf Eis in die Klinik transportiert. Fünfzehn Kapseln wurden dem Patienten einzeln ausgehändigt und der Patient nahm die Kapseln sofort mit etwas Wasser ein. Die Patienten wurden gebeten, vor der Kapseleinnahme über Nacht zu fasten.

Fäkale mikrobielle Analyse:

Um zu untersuchen, ob die klinische Wirkung möglicherweise durch die Besiedelung neuer Bakterienstämme vermittelt wird, entwickelten die Forscher eine robuste und empfindliche Methode zur Berechnung der paarweisen DNA-Sequenzunterschiede zwischen Bakterienstämmen derselben Art über verschiedene metagenomische Proben hinweg. Stuhlproben von Spendern, die für FMT-Kapseln verwendet wurden, und Stuhlproben, die den Patienten während des Studienzeitraums entnommen wurden, wurden in Metagenomik-Reads sequenziert. Die kartierten Reads wurden gestapelt, um für jede erkannte Art Varianteninformationen pro Position zu erhalten. Der Unterschied in der Variante einer bestimmten Spezies an einer gegebenen Position zwischen zwei Proben wurde als keine Überschneidung zwischen dem Satz detektierter Allele in den zwei verglichenen Proben definiert. Die geschätzte Arten-DNA-Sequenz-Unähnlichkeit für ein Probenpaar ist dann die Anzahl unterschiedlicher Positionen dividiert durch die Gesamtzahl der verglichenen Positionen.