Efficacia del trattamento del trapianto microbico fecale negli adulti con dermatite atopica

Studio cross-over prospettico in singolo cieco controllato con placebo, tra pazienti adulti affetti da dermatite atopica (AD) da moderata a grave, che non risponde sufficientemente al trattamento topico e sistemico. Tutti i pazienti ricevono 2 trapianti di placebo ogni 2 settimane di distanza seguiti da 4 trapianti microbici fecali (FMT) da donatori sani ogni 2 settimane di distanza. Ai pazienti è stato permesso di continuare con il loro trattamento topico medico di base, inclusi creme idratanti e glucocorticoidi, durante il periodo di studio, ma non è stata avviata alcuna nuova terapia. La gravità dell'AD e il profilo del microbioma fecale sono stati valutati mediante il punteggio Scoring Atopic Dermatitis (punteggio SCORAD) e l'uso settimanale di corticosteroidi topici, all'inizio dello studio, prima di ogni FMT e 1-6 mesi dopo l'ultimo FMT .

Durante il periodo di studio, ai pazienti è stato permesso di utilizzare solo la terapia topica inclusi emollienti e glucocorticoidi o inibitori della calcineurina.

Preparazione e consegna FMT:

I donatori volontari erano adulti sani, non gravidi, di età compresa tra 18 e 50 anni, con un normale indice di massa corporea. I donatori volontari sono stati esclusi per qualsiasi storia medica significativa o per qualsiasi uso di antibiotici nei 3 mesi precedenti. I candidati erano idonei secondo le linee guida del Ministero della Salute israeliano che includono un esame fisico e test di screening di laboratorio tra cui agenti patogeni enterici fecali, anticorpi sierici contro l'epatite A, B e C; virus dell'immunodeficienza umana; HTLV e Treponema pallidum così come celiachia, emocromo (e test aggiuntivi conformi alle linee guida del Ministero della Salute israeliano). Le feci sono state consegnate entro pochi minuti dopo la defecazione in un contenitore di plastica pulito e chiuso e sono state processate presso la banca delle feci del Tel Aviv Medical Center per preparare FMT capsulato. In breve, il materiale fecale è stato diluito con normale soluzione fisiologica (600 ml/100 g di materiale fecale), filtrato e concentrato il preparato in una centrifuga. Il pellet è stato sospeso in soluzione salina sterile e glicerolo (20%) che è stato aggiunto come crioprotettore batterico. Questo materiale è stato quindi pipettato in capsule resistenti agli acidi, che sono state chiuse e quindi sigillate secondariamente con un set aggiuntivo di capsule. Le capsule sono state conservate congelate a -80°C. Le capsule di placebo erano visivamente identiche e contenevano solo glicerolo diluito.

Procedura FMT capsulata:

FMT è stato somministrato in due dosi di 15 capsule FMT in due giorni consecutivi (per un totale di 30 capsule), presso la clinica di batterioterapia del centro medico di Tel Aviv (TLVMC). Il giorno della somministrazione, le capsule congelate a -80°C sono state estratte dal congelatore e trasportate in clinica in ghiaccio. Quindici capsule sono state consegnate individualmente al paziente e il paziente ha ingerito immediatamente le capsule con un po' d'acqua. Ai pazienti è stato chiesto di digiunare durante la notte prima dell'assunzione della capsula.

Analisi microbica fecale:

Al fine di esaminare se l'effetto clinico possa essere mediato dalla colonizzazione di nuovi ceppi batterici, i ricercatori hanno sviluppato un metodo robusto e sensibile per calcolare la dissomiglianza della sequenza del DNA a coppie tra ceppi batterici della stessa specie su campioni di metagenomica distinti. I campioni di feci di donatori utilizzati per le capsule FMT e i campioni di feci raccolti dai pazienti durante il periodo di studio sono stati sequenziati in letture metagenomiche. Le letture mappate sono state accumulate per ottenere informazioni sulle varianti per posizione per ogni specie rilevata. La differenza nella variante di una particolare specie in una data posizione tra due campioni è stata definita come assenza di intersezione tra l'insieme di alleli rilevati nei due campioni confrontati. La dissomiglianza della sequenza del DNA delle specie stimata per una coppia di campioni è quindi il numero di posizioni diverse diviso per il numero totale di posizioni confrontate.