Validering af Dual-isotop-metoden til måling af ileal-proteinfordøjelighed (VALDIM)
Studieoversigt
Detaljeret beskrivelse
Testmåltidet vil bestå af 60 g frysetørret hele æggepulver, som indeholder 30 g 2H-ægprotein og 800 mg [U-13C]-spirulina eller 400 mg 13C fri AA-blanding, blandet med vand og kogt som en omelet. 2H-æggepulveret er blevet produceret af vores samarbejdspartnere fra St John's Research Institute i Bangalore (Indien). Celite (syreuopløselig aske, Advanced Minerals Corporation) vil blive tilsat til måltidet som en ufordøjelig markør for at kontrollere genvindingen af måltidet i spildevand. Testmåltidet vil blive givet som en bolus eller som plateaufodring (gentagne minimåltider) afhængigt af grupperne af forsøgspersoner. 600 g 2H-mærkede frysetørrede æg vil blive opnået fra laghøns, der får en ensartet 2H-mærket AA-blanding oralt i 60 dage med deres daglige foder. Mikrobiologiske analyser vil blive udført for at sikre deres sikkerhed til konsum.
18 frivillige vil blive inkluderet i slutningen af undersøgelsen og testet på Human Nutrition Research Center på Avicenne Hospital (Frankrig). De vigtigste inklusionskriterier er mænd og kvinder, 18 til 45 år gamle, body mass index (BMI) 18 til 30 kg/m2. De vigtigste udelukkelseskriterier er enhver fordøjelses- eller leverpatologi, allergi mod æg, allergi mod latex, gravide kvinder. På grund af den invasive intubationsprocedure planlægger efterforskerne at rekruttere 30 frivillige til at imødekomme de sædvanlige 40 % frafald.
Fagene vil blive opdelt i 3 grupper af n = 6:
- Bolus-spi, n = 6, vil de frivillige indtage testmåltidet som en bolus på én gang ved t = 0, med 13C-spirulina som referenceprotein
- Plateau-spi, n = 6, vil de frivillige indtage testmåltidet i en plateaufodringsprotokol med 13C-spirulina som referenceprotein
- Plateau-AA, n = 6, vil de frivillige indtage testmåltidet i en plateaufodringsprotokol med 13C-fri AA-blanding som reference "protein"
En uge før forsøget vil de frivillige følge en standarddiæt tilpasset deres kropsvægt for at kontrollere deres proteinindtag (1,3 g protein/kg kropsvægt).
De frivillige vil ankomme til Human Nutrition Research Center på Avicenne Hospital om morgenen før dagen for eksperimentet. De vil være udstyret med et tredobbelt lumen tarmrør, der får lov til at bevæge sig gennem tarmkanalen i 24 timer. Et af lumenerne er radiougennemsigtigt og tjener til at perfundere en ikke-absorberbar maker i tarmen (langsom markørmetode). Det andet lumen er dedikeret til at puste en vægtet ballon op, der letter migreringen af røret. Det tredje lumen er dedikeret til den kontinuerlige aspiration af spildevandet, 15 cm under perfusionsstedet. Målingen af den ikke-absorberbare markør i spildevandet tillader bestemmelse af spildevandsstrømningshastigheden.
På dagen for forsøget vil rørets position blive kontrolleret ved radiografi for at verificere dets placering ved den terminale ileum. Et kateter vil blive indsat i underarmsvenen til blodprøvetagning. Perfusionen af den ikke-absorberbare markør, polyethylenglycol (PEG) 4000 (20 g/l), starter ved en flowhastighed på 1 ml/min. Tarmstrømmen og den basale ileale prøve vil blive opsamlet i løbet af 30 min. Basal plasma- og urinprøve vil blive indsamlet.
Ved t = 0 vil de frivillige i gruppen "Bolus-spi" indtage alt testmåltidet på mindre de 20 min. For de frivillige i grupperne "Plateau-spi" og "Plateau-AA" vil testmåltidet blive opdelt i 22 lige store portioner, og de vil indtage det første måltid som en priming dosis på 6 miniportioner. Derefter vil de indtage enkelte miniportioner hvert 30. minut i 7,5 timer. En portion vil blive dedikeret til måltidsanalyser. Indtil t = 8 vil tarmindholdet løbende blive opsamlet ved aspiration og samlet hvert 30. min. Der tages blodprøver hver time i løbet af 4 timer og hvert 30. minut fra t = 5 til t = 8. Urin vil blive opsamlet hver 2. time indtil t=8 (det samlede volumen af urinproduktion vil blive noteret på hvert tidspunkt for proportional pooling). Åndedrætsprøver vil blive indsamlet hvert 30. min. Kuldioxid output (VCO2) vil blive evalueret hver time i løbet af 10 minutter ved indirekte kalorimetri (Canopy). Urinprøve vil blive indsamlet ved starten af eksperimentet og under undersøgelsesprotokollen. Fækale prøver vil blive indsamlet før starten af eksperimentet og inden for de næste 24 timer. Naso-ileal-røret vil blive fjernet efter den sidste opsamling af spildevand ved t = 8. Naso-ileal-røret vil blive fjernet efter den sidste opsamling af spildevand ved t=8.
Følgende analyser vil blive udført:
- Koncentration af PEG-4000 ved turbidimetrisk metode i digesta-prøver
- Totalt brintindhold og 2H berigelse i måltider og fordøjelsesprøver ved isotopforhold massespektrometri (IRMS) koblet til pyrolyseanalysator
- Totalt kulstofindhold og 13C berigelse i måltider og fordøjelsesprøver ved hjælp af Elemental Analyser (EA) koblet til IRMS
- AA-koncentration i måltider og fordøjelsesprøver ved Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC)
- 13C-AA og 2H-AA berigelsesplasma og måltidsprøver ved væskekromatografi koblet til tandem massespektrometri (LC-MS/MS)
- 13C-AA og 2H-AA berigelse i fordøjelses- og måltidsprøver ved gaskromatografi-forbrænding-isotopforhold massespektrometri (GC-C-IRMS)
- Celiteindhold i poolede (0-8 timer) digesta-prøver
- 13CO2 i udåndingsprøve af Multiflow-IRMS
- Amino-acidom og peptidom af fordøjelses-, plasma-, urin- og fækale prøver
En del af analyserne (13C-AA og 2H-AA berigelsesplasma og mel ved LC-MS/MS, -omiske analyser) vil blive udført af vores samarbejdspartnere fra St John's Research Institute i Bangalore (Indien).
Undersøgelsestype
Tilmelding (Anslået)
Fase
- Ikke anvendelig
Kontakter og lokationer
Studiekontakt
- Navn: Juliane Calvez, PhD
- Telefonnummer: +33144088677
- E-mail: juliane.calvez@agroparistech.fr
Undersøgelse Kontakt Backup
- Navn: Claire Gaudichon, Prof
- Telefonnummer: +33144081829
- E-mail: claire.gaudichon@agroparistech.fr
Studiesteder
-
-
-
Bobigny, Frankrig, 93000
- Rekruttering
- Centre de Recherche sur Volontaires (CRV) de l'hôpital Avicenne
-
Kontakt:
- Juliane Calvez, PhD
- E-mail: juliane.calvez@agroparistech.fr
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- 18<BMI<30
- Sund og rask
- Forsikret under det franske socialsikringssystem
- For kvinder: brug af prævention
- Underskrevet informeret samtykke
Ekskluderingskriterier:
- Enhver diætallergi
- Latexallergi
- Positiv serologi til HIV, hepatit C virus antistof, hepatit B virus overflade antigen og kerne antistoffer
- Glutenintolerance
- Anæmi
- Brug af stoffer
- Højt forbrug af alkohol
- Hypertension, diabetes, fordøjelsessygdom, lever- eller nyresygdom, alvorlig hjertesygdom
- Graviditet
- Højsportstræning (>7 timer/uge)
- Bloddonation i de 3 måneder forud for undersøgelsen
- Deltagelse i en klinisk undersøgelse i de 3 måneder forud for undersøgelsen
- Intet underskrevet informeret samtykke
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
- Primært formål: Grundvidenskab
- Tildeling: Randomiseret
- Interventionel model: Parallel tildeling
- Maskning: Ingen (Åben etiket)
Våben og indgreb
Deltagergruppe / Arm |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Eksperimentel: Bolus-spi
De frivillige vil indtage testmåltidet som en bolus på én gang ved t = 0, med 13C-spirulina som referenceprotein
|
Fordøjeligheden af aminosyrer vil blive bestemt inden for hver arm ved indsamling af ileal digesta på grund af naso-ileal intubationsanordning og ved plasmaprøver med den dobbelte isotopmetode.
|
|
Eksperimentel: Plateau-spi
De frivillige vil indtage testmåltidet i en plateaufodringsprotokol med 13C-spirulina som referenceprotein
|
Fordøjeligheden af aminosyrer vil blive bestemt inden for hver arm ved indsamling af ileal digesta på grund af naso-ileal intubationsanordning og ved plasmaprøver med den dobbelte isotopmetode.
|
|
Eksperimentel: Plateau-AA
De frivillige vil indtage testmåltidet i en plateaufodringsprotokol med 13C-fri AA-blanding som reference "protein"
|
Fordøjeligheden af aminosyrer vil blive bestemt inden for hver arm ved indsamling af ileal digesta på grund af naso-ileal intubationsanordning og ved plasmaprøver med den dobbelte isotopmetode.
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Ægte ileal aminosyre fordøjelighed
Tidsramme: -30 minutter til 8 timer efter det første måltid
|
Målingerne af aminosyrekoncentration (mmol) og deres individuelle 2H-berigelse (atom-%) tillader bestemmelse af diætaminosyrer, der er tilbage i lumen. Diætaminosyrer, der genfindes i ilealprøverne, betragtes derefter som ikke-absorberede og udtrykt som % af indtaget aminosyre, det muliggør beregning af reel ileal-aminosyrefordøjelighed (100 - diætaminosyre ikke absorberet) |
-30 minutter til 8 timer efter det første måltid
|
|
Indirekte aminosyrefordøjelighed
Tidsramme: -30 minutter til 8 timer efter det første måltid
|
Den individuelle aminosyre 2H berigelse (atom %) og 13C berigelse (atom %) i måltidet og i plasmaet fra 5 timer til 8 timer eller 0 timer til 8 timer efter det første måltid (afhængigt af gruppen) vil blive evalueret til beregn deres forhold: Forhold måltid AAi = 2H måltid AAi / 13C måltid AAi Forhold plasma AAi = 2H plasma AAi / 13C plasma AAi Forholdet mellem måltids- og plasmaforhold vil blive korrigeret af den kendte fordøjelighed af spirulina-aminosyre eller fri aminosyre (i %, afhængig af gruppen) for at bestemme den indirekte aminosyrefordøjelighed af frysetørret æggeprotein med følgende formel: Indirekte ileal aminosyre fordøjelighed (%) = AAi ileal fordøjelighed spirulina eller fri AA blanding (%) x Ratio plasma AAi / Ratio måltid AAi |
-30 minutter til 8 timer efter det første måltid
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Urin-, fækal- og plasmakoncentration af individuelle aminosyrer som reaktion på proteinindtagelse
Tidsramme: -30 minutter til 8 timer efter det første måltid
|
Bestemmelse af aminosyrekoncentrationer (i mmol) i plasma-, urin- og fæcesprøver og bioinformatisk analyse før og efter indtagelse af proteinmel til karakterisering af ikke- eller minimalt invasive fordøjelighedsmarkører
|
-30 minutter til 8 timer efter det første måltid
|
|
Plasma-, urin- og fækalt peptidom som reaktion på proteinindtagelse
Tidsramme: -30 minutter til 8 timer efter det første måltid
|
Sekventering af peptider i plasma-, urin- og fæcesprøver og bioinformatisk analyse før og efter indtagelse af proteinmel til karakterisering af ikke- eller minimalt-invasive fordøjelighedsmarkører
|
-30 minutter til 8 timer efter det første måltid
|
|
Tarmmikrobiota som reaktion på proteinindtagelse
Tidsramme: Før og 24 timer efter måltid
|
Mikrobiel DNA-sekventering af fækale prøver før og efter indtagelse af proteinmel
|
Før og 24 timer efter måltid
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart (Faktiske)
Primær færdiggørelse (Anslået)
Studieafslutning (Anslået)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (Faktiske)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Faktiske)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Andre undersøgelses-id-numre
- VALDIM
Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter
Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt
Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .