Enkeltcelle-immunrespons til kontrolleret glutenindtagelse hos børn med cøliaki (CELLiomicS)

Cøliaki er en kronisk, immunmedieret enteropati, der udløses af glutenindtagelse hos genetisk disponerede individer. Hos pædiatriske patienter fører streng overholdelse af en glutenfri diæt (GFD) til mukosalt helbred og klinisk forbedring; dog er det systemiske immunologiske landskab under langvarig GFD fortsat ufuldstændigt forstået. Uheldig gluteneksponering er almindelig i dagligdagen og kan udløse subklinisk immunaktivering selv i fravær af tydelige symptomer. De biologiske konsekvenser af sådanne lavdosis-eksponeringer, især på enkeltcelle-niveau, er ikke fuldt ud karakteriseret hos børn.

CELLiomicS (Enkeltcelle immunrespons til kontrolleret glutenindtagelse i pædiatrisk cøliaki) er en randomiseret, kontrolleret, parallelgruppeklinisk undersøgelse, der er designet til at karakterisere systemiske immunresponser på kontrolleret glutenindtagelse hos pædiatriske patienter med etableret cøliaki. Kvalificerede deltagere er børn i alderen 8-14 år, der har fulgt en streng GFD i mindst 18 måneder før tilmelding. Undersøgelsen planlægger at rekruttere cirka 45 deltagere med biopsi- eller serologibekræftet cøliaki.

Deltagerne randomiseres til tre interventionsgrupper: placebo, 50 mg gluten eller 5 g gluten. De valgte glutendoser repræsenterer to klinisk relevante scenarier: (1) uheldig lavniveau-eksponering (50 mg), og (2) diætovertrædelse (5 g), begge under den tærskel, der typisk kræves for at forårsage serologisk tilbagefald. Gluten eller placebo administreres én gang dagligt på dag 1, 2 og 3. Blodprøver indsamles på dag 1 (baseline) og dag 8 (fem dage efter den sidste dosis). Afløbsprøver og urinprøver indsamles også på samme tidspunkter til komplementære analyser, herunder fekale gluten immunogene peptider (GIP) og eksplorativ metabolomik.

Perifere blodmononukleære celler behandles til højdimensionel immunprofilering ved hjælp af enkeltcelle RNA-sekventering og T-celle receptor (TCR) sekventering (10x Genomics). Disse analyser muliggør karakterisering af immuncellsammensætning, transskriptionel aktivitet og klonale T-celledynamikker før og efter glutenudfordring. Derudover vurderes eksosomal microRNA-ekspression som godkendt af etikkomiteændringen SICEIA-2025-001434, og ikke-målrettet metabolomisk profilering af blod-, afførings- og urinprøver udføres for at udforske systemiske metaboliske signaturer forbundet med gluteneksponering.

Det primære mål er at identificere gluteninducerede transskriptionelle og cellulære ændringer i perifere immunceller mellem baseline (dag 1) og post-intervention (dag 8). Sekundære mål inkluderer: (1) vurdering af dosisafhængig immunaktivering; (2) identifikation af immuncelleunderstammer og genekspressionsprogrammer forbundet med forskellige glutenmængder; (3) karakterisering af TCR-repertoireændringer efter gluteneksponering; (4) evaluering af inter-individuel variabilitet i immunresponser; (5) analyse af eksosomale microRNA-ændringer; og (6) identifikation af metabolomiske signaturer forbundet med glutenindtagelse.

Ved at give et højopløseligt billede af systemisk immunaktivering efter kontrolleret glutenindtagelse sigter denne undersøgelse mod at uddybe forståelsen af den biologiske effekt af virkelighedsnær gluteneksponering i pædiatrisk cøliaki og at støtte udviklingen af nye biomarkører til diætmonitorering og personlig klinisk behandling.