Иммунный ответ на уровне отдельных клеток при контролируемом употреблении глютена у детей с целиакией (CELLiomicS)

Целиакия — это хроническая иммуноопосредованная энтеропатия, вызванная употреблением глютена у генетически предрасположенных лиц. У педиатрических пациентов строгое соблюдение безглютеновой диеты (БГД) приводит к восстановлению слизистой оболочки и клиническому улучшению; однако системный иммунологический ландшафт при длительном соблюдении БГД остается недостаточно изученным. Случайное воздействие глютена часто встречается в повседневной жизни и может вызвать субклиническую иммунную активацию даже при отсутствии явных симптомов. Биологические последствия таких низкодозовых воздействий, особенно на уровне отдельных клеток, у детей полностью не охарактеризованы.

CELLiomicS (Иммунный ответ отдельных клеток на контролируемое употребление глютена при педиатрической целиакии) — это рандомизированное контролируемое клиническое исследование с параллельными группами, предназначенное для характеристики системных иммунных реакций на контролируемое употребление глютена у педиатрических пациентов с установленной целиакией. Подходящие участники — дети в возрасте 8–14 лет, которые соблюдали строгую БГД не менее 18 месяцев до включения в исследование. Планируется набрать около 45 участников с биопсически или серологически подтвержденной целиакией.

Участники рандомизируются в три группы вмешательства: плацебо, 50 мг глютена или 5 г глютена. Выбранные дозы глютена представляют два клинически значимых сценария: (1) случайное низкоуровневое воздействие (50 мг) и (2) диетическое нарушение (5 г), оба ниже порога, обычно необходимого для серологического рецидива. Глютен или плацебо вводятся один раз в день в дни 1, 2 и 3. Образцы крови берутся в день 1 (исходный уровень) и день 8 (через пять дней после последней дозы). Образцы стула и мочи также собираются в те же временные точки для дополнительных анализов, включая фекальные глютен-иммуногенные пептиды (ГИП) и исследовательскую метаболомику.

Мононуклеарные клетки периферической крови обрабатываются для высокоразмерного иммунного профилирования с использованием секвенирования РНК отдельных клеток и секвенирования Т-клеточного рецептора (TCR) (10x Genomics). Эти анализы позволяют охарактеризовать состав иммунных клеток, транскрипционную активность и динамику клональных Т-клеток до и после провокации глютеном. Кроме того, оценивается экспрессия экзосомальной микроРНК, как одобрено поправкой этического комитета SICEIA-2025-001434, и проводится нецелевое метаболомное профилирование образцов крови, стула и мочи для изучения системных метаболических сигнатур, связанных с воздействием глютена.

Основная цель — выявить вызванные глютеном транскрипционные и клеточные изменения в периферических иммунных клетках между исходным уровнем (день 1) и постинтервенционным периодом (день 8). Вторичные цели включают: (1) оценку дозозависимой иммунной активации; (2) идентификацию подмножеств иммунных клеток и программ экспрессии генов, связанных с различными количествами глютена; (3) характеристику изменений репертуара TCR после воздействия глютена; (4) оценку межиндивидуальной изменчивости иммунных ответов; (5) анализ изменений экзосомальной микроРНК; и (6) выявление метаболомных сигнатур, связанных с употреблением глютена.

Предоставляя высокоразрешающий вид системной иммунной активации после контролируемого употребления глютена, это исследование направлено на углубление понимания биологического воздействия реального воздействия глютена при педиатрической целиакии и поддержку разработки новых биомаркеров для мониторинга диеты и персонализированного клинического ведения.